不同產地南五味子藥材質量評價△

李筱玲，鄧寒霜

(商洛學院 生物醫藥與食品工程學院，陜西 商洛 726000)

五味子始載于《神農本草經》，列為上品，具有收斂固澀、益氣生津、補腎寧心之功效，有2000多年的藥用歷史[1]。五味子有南北之分，北五味子為木蘭科植物五味子Schisandrachinensis(Turcz.)Baill.的干燥成熟果實，習稱五味子[2]66；南五味子為木蘭科植物華中五味子SchisandrasphenantheraRehd.et Wils.的干燥成熟果實[2]244。長期以來南、北五味子同作五味子入藥[3]。經過長期實踐人們認識到其差別，自2000年起，《中華人民共和國藥典》將南五味子與五味子分開收錄[4-5]。現行藥典分別以五味子酯甲、五味子醇甲作為南、北五味子質量控制的指標性成分。南、北五味子有效成分不盡相同，功能主治略有差異，但在臨床使用過程中，存在兩種五味子混用現象。筆者所在商洛市位于陜西南部山區，地處秦嶺南麓東段，為南五味子主產區，近年來有文獻報道該地區所產南五味子品質較優[6-8]。本文對陜南及周邊地區藥材市場南五味子質量進行了初步調查、評價，以期為南五味子藥材質量控制及指導臨床合理用藥提供參考。

1 試劑與材料

1.1 試劑與儀器

LC-20A型高效液相色譜儀(日本島津)，四元泵，自動進樣器，PDA檢測器；安五脂素對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111844-201001)；南五味子對照藥材(中國食品藥品檢定研究院，批號：121118-200502)；五味子酯甲對照品(中國食品藥品檢定研究院，批號：111529-200503)等。

1.2 實驗材料

南五味子藥材樣品，隨機從藥材市場或藥店采購，共計14份，詳見表1。

2 方法與結果

按照2015版《中華人民共和國藥典》第一部及第四部相關項下要求，對收集到的樣品進行性狀、鑒別、檢查、含量測定等分析，評價南五味子藥材質量。

2.1 性狀

南五味子藥材呈扁球形或球形，直徑4～6 mm，表面顏色為棕紅色至暗棕色不等，果肉常貼于種子上且干癟皺縮，果肉氣微，味酸，種子1～2粒，腎形，表面棕黃色有光澤，種皮薄而脆，破碎后香氣弱，味辛，微苦。各樣品性狀見圖1。

表1 南五味子藥材樣品來源

經觀察可知，5號與11號藥材樣品表面顯暗紫紅色、皺縮油潤、果肉柔軟，符合北五味子藥材性狀特征；其他樣品表面棕紅色至暗棕色、皺縮干癟、果肉緊貼種子上，符合南五味子藥材性狀特征。

2.2 微鑒別

取樣品適量，粉碎，過四號篩，以水合氯醛裝片，用顯微鏡先以10倍鏡調至清晰找到物像，再轉至40倍鏡下調試觀察。結果見表2、圖2。

圖1 南五味子藥材樣品性狀

樣品號種皮外層石細胞種皮內層石細胞果皮表皮細胞導管1、2、3、4、6、7、8、9、10、12、13、 14多角形、長多角形,腔內含棕色物,縱面觀為長方形,外側壁無突起,壁孔及孔溝不明顯長圓形、類圓形,壁孔及孔溝明顯類多角形,表面有角質線紋,表皮中散有油細胞,垂周壁不呈連珠狀增厚螺紋、梯紋導管5、11表面觀呈多角形、長多角形,壁厚,孔溝極細密,細胞腔內含深棕色物多角形,類圓形,不規則,壁稍厚,紋孔較大類多角形,垂周壁呈連珠狀增厚,表面有角質線紋,表皮中散有油細胞螺紋導管

注：a，b南五味子果皮表皮細胞；c，d 北五味子果皮表皮細胞；e 南五味子螺紋導管；f 南五味子種皮外層石細胞；g 南五味子種皮外層石細胞縱面觀；h 南五味子種皮內層石細胞。圖2 藥材樣品顯微鑒別結果

南、北五味子藥材顯微鑒別特征類似，主要區別在于表皮細胞是否垂周壁呈連珠狀增厚[9]。由表2、圖2可知，5號與11號樣品表皮細胞垂周壁明顯呈連珠狀增厚，而其他樣品未發現此類情況。由此，可以初步判斷5號與11號樣品應為北五味子，其他樣品為南五味子。本次實驗使用水合氯醛裝片，未觀察到淀粉粒。

2.3 薄層鑒別

照《中華人民共和國藥典》(2015版，一部)南五味子鑒別項下有關規定進行，實驗結果如圖3所示。

注：1.安五脂素對照品；2.南五味子對照藥材；3.樣品；4.樣品。圖3 藥材樣品薄層鑒別結果

由圖3可知，5號、11號樣品薄層色譜與南五味子對照藥材相比有明顯差異，且5號與11號樣品色譜圖中未出現安五脂素斑點，由此可以進一步判斷5號、11號2個樣品應為北五味子；其余12個樣品均在與對照藥材和對照品相應的位置上，顯相同顏色的深藍色斑點，符合南五味子薄層鑒別特征。

2.4 檢查項目

取南味子藥材樣品適量，照《中華人民共和國藥典》有關規定，進行雜質、水分、總灰分檢查，詳細結果見表3。

表3 藥材樣品檢查項測定結果

注：《中華人民共和國藥典》規定，本品雜質不得過1%，水分不得過12.0%，總灰分不得過6.0%。

由表3可知，全部樣品雜質、水分、總灰分平均含量分別為0.61%、10.69%、4.25%；利用SPSS 13.0對3組數據進行單樣本t檢驗得知，所有樣品雜質、總灰分含量顯著低于藥典要求(P<0.01)，水分含量與藥典標準比較無顯著差異(P=0.107)。

2.5 含量測定

2.5.1 色譜條件 以十八烷基鍵合硅膠為填充劑，檢測波長為254 nm，以四氫呋喃-水(38∶62)為流動相，流速0.8 mL·min-1，柱溫40 ℃，按五味子酯甲色譜峰計算其理論塔板數應不低于3000。

2.5.2 樣品前處理 對照品溶液的制備 精密稱取五味子酯甲對照品5.8 mg于5 mL容量瓶中，加入少量甲醇，加熱使其溶解，待冷卻至室溫后以甲醇定容至刻度，即得濃度為1.16 mg·mL-1的對照品溶液。

供試品溶液的制備 精密稱取藥材粉末(過三號篩)0.5 g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇50 mL，稱定重量，在250 W、40 kHz的條件下超聲處理30 min，放冷至室溫，再次稱定重量，以甲醇補足減失重量，搖勻，過濾，收集續濾液，即得供試品溶液[10-12]。

2.5.3 線性關系考察 分別精密吸取五味子酯甲對照品溶液0、1、2、3、4、5，置5 mL容量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，進樣分析。以峰面積對濃度(mg·mL-1)進行回歸分析，得五味子酯甲回歸方程Y=3.0×107X+61 214，r=0.999 9，表明五味子酯甲在濃度0～1.16 mg·mL-1范圍內與峰面積呈良好線性關系，詳細結果見圖4。

圖4 五味子酯甲標準曲線

2.5.4 供試品含量測定 取前述方法所得供試品溶液20 μL，照2.5.1項下的色譜條件進樣分析，計算五味子酯甲含量。實驗結果見表4，標準品及樣品色譜圖見圖5。

表4 五味子酯甲含量測定結果

注：《中華人民共和國藥典》規定，本品按干燥品計算，含五味子酯甲不得少于0.20%。

注：1.五味子酯甲標準品；2.南五味子樣品；3.北五味子樣品。圖5 高效液相檢測色譜圖

由圖5可知，五味子酯甲保留時間在18.7 min左右，南五味子樣品色譜圖中可明顯看到五味子酯甲色譜峰；北五味子樣品中未檢出五味子酯甲。由表5可知，全部南五味子樣品五味子酯甲平均含量為0.63%，顯著高于《中華人民共和國藥典》標準(P<0.01)；其中2號樣品含量最低，9號樣品含量最高，全部樣品有效成分含量在藥典標準的2.5～3.9倍之間，表明陜南及周邊地區所產南五味子品質較優。

3 討論與分析

中藥五味子根據來源不同有南北之分，具有收斂固澀，益氣生津，補腎寧心的作用。被稱為南五味子的植物較多，有長梗南五味子KadsuralongipedunculataFinet et Gagnep.[13]、異形南五味子Kadsuraheteroclita(Roxb.)Craib.[14]、內南五味子KadsurainteriorA.C.Smith[15]等，上述3種南五味子與華中五味子同科不同屬，且藥用部位為根及藤莖，因此不常作為五味子偽品出現。陜南地區藥材市場上流通的五味子主要是華中五味子的干燥成熟果實，其主要成分為木質素類，如五味子酯甲、五味子甲素、安五脂素等[16]。因近年來北五味子向南引種及外地藥材流入等原因，在銷售及使用過程中存在部分南、北五味子混用的情況。兩種五味子在2015版《中華人民共和國藥典》中收錄的性味歸經、功能主治等內容完全相同，但因南、北五味子有效成分有明顯差異，臨床上仍習慣將二者區別使用。

本文調查發現，部分藥店人員不能正確區分五味子藥材，將兩種五味子同等銷售，在藥品監督管理過程中應引起注意。本文共收集五味子藥材樣品14份，其中5號、11號2份樣品在性狀及顯微鑒別中呈現明顯北五味子特征；在薄層色譜鑒別中該2份樣品與南五味子對照藥材有明顯差異，且未檢出安五脂素；在利用高效液相色譜法進行含量測定過程中，上述2份樣品色譜圖亦表現出與其他樣品的顯著差異且未檢出五味子酯甲，由此可以判斷5號及11號樣品應為北五味子。

所有南五味子樣品中，除少數樣品水分或總灰分含量未達到藥典標準外，其他指標均符合藥典要求，且有效成分含量均達到藥典標準2倍以上，說明陜南地區出產的南五味子藥材品質較為優良。部分藥材樣品中混有果梗、樹枝等非藥用部位，應是藥材采收、收購、加工時未經嚴格操作而引入的雜質，雖未超出藥典規定范圍，但也影響了藥材質量。部分樣品水分含量超標，影響了用量準確性，同時更易使藥材發生霉變。總灰分的限度要求對于保證中藥的品質和潔凈程度，有一定的意義，個別樣品總灰分超標也對藥材質量帶來隱患。在以后的生產、銷售過程中應注意加強產地初加工管理，嚴格按照《中藥材生產質量管理規范》(GAP)要求操作，規范藥材凈制、干燥等環節，防止非藥用部位及其它雜質混入，有效控制藥材含水量、雜質及總灰分，進一步提高南五味子藥材品質。