陳皮提取物體外美容功效研究

鄭曉瑞，鐘桂云，韋權(quán)堃

(江門職業(yè)技術(shù)學(xué)院 材料技術(shù)系，廣東 江門 529090)

隨著社會的不斷發(fā)展和進(jìn)步，化妝品逐漸成為了現(xiàn)代人生活中不可缺少的一部分。人們對于化妝品品質(zhì)的要求也越來越高，開發(fā)有益于人體健康且兼顧美容保健作用的綠色化妝品具有廣闊的市場前景。植物類化妝品具有良好的應(yīng)用基礎(chǔ)，在中國古代，人們利用植物的汁液來美容和滋潤皮膚，通過果實或者枝葉的簡單處理，就直接使用，但其有效成分不明確，效率低。現(xiàn)有的植物提取工藝多從植物的有效成分入手，進(jìn)行有效成分的單體分離，導(dǎo)致提取成本上升，原料浪費(fèi)，難以普及。其實，一種植物里面，有活性的成分是多種多樣的，如果能將其提取出來并直接使用，對于化妝品行業(yè)來說，既提高了效率，又降低了提取成本。

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮，含有豐富的黃酮物質(zhì)，具有多種生物活性[1-2]，黃酮類物質(zhì)作為一種護(hù)膚因子，具有抗氧化、防衰老、美白防曬、抗輻射、保濕以及抑菌等功效。目前國內(nèi)對陳皮的研究主要集中其在藥理方面的應(yīng)用，比如抗腫瘤、抗過敏、抗炎和抗氧化等作用[3-5],而對陳皮美容功效的文獻(xiàn)報道較少。

因此，本文研究了陳皮提取物的紫外吸收性能，并采DPPH自由基清除實驗考察陳皮提取物的防曬、抗氧化等功效，以期為陳皮資源在化妝品的研發(fā)和應(yīng)用上提供一定的參考。

1 實驗部分

1.1 主要試劑與儀器

陳皮購買于江門市國大藥房，粉碎后備用。乙醇、丙二醇，均為分析純，國藥試劑公司。DPPH(1、1-二苯基-2-苦基肼自由基，Sigma-Fluka公司產(chǎn)品)，YP202電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)，U-4100型紫外-可見分光光譜儀(UV-Vis)，日本HITACHI公司；KQ-100DB型超聲波清洗器(昆山市超聲儀器有限公司)。

1.2 實驗過程

1.2.1 防曬能力評價方法

利用紫外可見分光光度計，測定陳皮提取液的紫外吸收光譜，然后分別計算陳皮提取液在UV，UVB和UVA的平均吸光度值，評價其紫外線吸收能力即防曬能力[6-7]。

1.2.2 陳皮防曬成分的提取工藝

在實驗中，以陳皮提取物對紫外光譜吸收度作為評定標(biāo)準(zhǔn)，依次考察各因素對超聲波提取工藝的影響。

1.2.2.1 萃取劑與吸光度的關(guān)系

準(zhǔn)確稱取陳皮樣品90、120、150、180mg各兩組，在第一組和第二組中分別加入丙二醇和75%乙醇2種不同的溶劑各20mL，浸潤后在30℃超聲波提取20min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，測其在200～400nm之間的紫外吸收光譜，并計算其UVC，UVB和UVA的平均吸光度值。

1.2.2.2 料液比對吸光度值的影響

精確稱取樣品8份，每份為90、110、150、220、280、320、380、390mg分別加入丙二醇各20mL，浸潤后在30℃，超聲波提取20min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，紫外吸收光譜測定同上。

1.2.2.3 超聲時間對吸光度值的影響

精確稱取樣品6份，每份為320mg，分別加入丙二醇20mL，浸潤后在30℃超聲波提取，提取時間分別為20min、40min、60min、80min、100min、120min過濾，濾液在4000r/min下離心15min，取2mL上清液，紫外吸收光譜測定同上。

1.2.3 陳皮提取液對DPPH自由基的清除實驗

1.2.3.1 DPPH溶液的配置

準(zhǔn)確稱取DPPH試劑40mg，用75%乙醇溶解，轉(zhuǎn)入250mL容量瓶中，用75%乙醇定容，搖勻，得質(zhì)量濃度160mg/L的DPPH溶液，避光置于冰箱中冷藏備用[8]。

1.2.3.2 樣品溶液的配置

陳皮提取液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)濃縮至干，準(zhǔn)確稱取陳皮提取物40mg，用75%乙醇溶解，轉(zhuǎn)入100mL的容量瓶中，用75%乙醇定容，搖勻，得質(zhì)量濃度為400mg/L的樣品溶液，置于冰箱中冷藏備用。

1.2.3.3 清除DPPH自由基能力的測定

準(zhǔn)確量取1.6mL DPPH溶液，加入2.4mL75%乙醇，混勻，在λ=517nm測吸光度作為Ac值。分別準(zhǔn)確量取各樣品溶液0.6、1.0、1.2、1.4，加入1.6mLDPPH液及1.8%、1.4%、1.2%、1.075%乙醇混合均勻，并將試管避光置于冰水浴中，避光反應(yīng)30min后，在λ=517nm測吸光度作為Ai。另外準(zhǔn)確稱量各樣品溶液0.6、1.0、1.2、1.4mL，加入75%乙醇，使每只試管體積4mL, 在λ=517nm測吸光度作為Aj。

按下式計算自由基清除率K值。

K=1-(Ai-Aj)/Ac

2 結(jié)果與討論

2.1 陳皮防曬成分最佳提取工藝

在實驗中，以陳皮提取物對紫外光譜吸收度作為評定標(biāo)準(zhǔn)，依次考察各因素對超聲波提取工藝的影響，結(jié)果如下。

2.1.1 溶劑種類

以陳皮黃酮提取液對紫外光譜吸收度作為評定標(biāo)準(zhǔn)，溶劑種類對超聲波提取工藝的影響見圖1。由圖1可知，乙醇依然是比較好的提取溶劑，但是在高濃度，以丙二醇作為提取液，提取效果要優(yōu)于乙醇。

圖1 溶劑對提取液防曬活性的影響Fig.1 The UV absorption valuespectra ofleaves of dried orange samples

2.1.2 料液比

料液比對超聲波提取工藝的影響見圖2。

由圖2可知，隨著料液比的增加，陳皮提取物的防曬活性也在增加，在0.0900∶20～0.3200∶20(g/mL)時，達(dá)到最大值。但是隨著料液比的繼續(xù)增加，陳皮提取物的防曬活性反而減少。原因可能是，原料一定的情況下防曬成分溶出率一定，料液比過大時，陳皮沒有得到充分浸提，另外過分增加提取溶劑丙二醇的體積，也為后續(xù)的回收工作帶來負(fù)擔(dān)。因此，最佳的料液比為0.3200∶20(g/mL)。

圖2 料液比對提取液防曬活性影響Fig.2 The effect on the sunscreen activity of different solid-liquid ratio

2.1.3 提取時間

提取時間對超聲波提取工藝的影響見表1。

表1 超聲提取時間對陳皮黃酮提取液的防曬活性的影響Table 1 The effect on the sunscreen activity of different time

由表1可知，當(dāng)提取時間在20～80min時，陳皮提取物的防曬活性，隨著提取時間的延長而增加，80min后，提取率不再增加。這是因為超聲條件下提取時間過長，有可能會導(dǎo)致陳皮中防曬成分受到一定的損失，因此，確定最佳的提取時間是80min。

2.2 陳皮提取液對DPPH自由基的清除實驗

不同濃度陳皮提取物對DPPH自由基清除能力見圖3。

圖3 陳皮提取物對DPPH自由基的清除率Fig.3 Scavenging effect of dried orange extract on DPPH radical

結(jié)果顯示，陳皮提取物具有清除DPPH自由基的能力，隨著陳皮提取物濃度的增加，對DPPH自由基的清除率能力有逐步增強(qiáng)的趨勢，說明陳皮提取物對DPPH自由基的清除能力與其濃度存在明顯的劑量效應(yīng)關(guān)系。

3 結(jié)論

通過紫外吸收光度的測定、清除DPPH自由基實驗，證實了陳皮提取液具有廣譜的紫外吸收能力、對DPPH自由基有很好的清除作用。同時找出陳皮用丙二醇提取時間最短且效果最好的提取方法：在室溫，料液比0.3200∶20(g/mL)，超聲波提取80min的條件下效率最高。綜上所述，陳皮提取液具有多種美容功效，有望作為一種全新的中草藥活性添加劑應(yīng)用到化妝品中。