復方中藥擦劑X對試驗家兔正常皮膚黑色素影響的藥理學研究

呂帥

【中圖分類號】R28 【文獻標識碼】B 【文章編號】2095-6851（2018）09--01

目前，國內外對其研究已不斷深入，有藥物療法、物理療法及外科療法。本課題在此研究的背景下，搜集驗方，以中醫藥理論為指導，形成一種中藥擦劑X，對試驗家兔正常皮膚用藥，進行藥理學研究。通過對試驗家兔正常皮膚藥理試驗的研究，試找出能增加家兔正常皮膚黑色素的處方，由于人的皮膚與家兔皮膚類似，在眾多的關于皮膚用藥的藥理試驗研究中，研究者大多采用家兔做藥理試驗，若藥理試驗的研究能達到預期的效果—可增加或刺激試驗家兔正常皮膚黑色素，則為下一步“中藥擦劑X對白癜風疾病的治療效果研究”提供試驗依據。

研究的內容：

復方中藥擦劑X處方組成：蒺藜18—30份，補骨脂9—18份，制何首烏8—12份，當歸6—15份，紅花2—6份，甘草2—10份。

1 提取實驗

采用超聲波提取、試劑提取等不同的方法、采用乙醇、乙醚、乙酸乙酯等不同的試劑進行提取，試研究出簡單、有效、可行的、綠色環保的提取方法。

2 藥理試驗

對上述提取方法所得提取物對實驗家兔分別做急性毒理試驗、藥理試驗。

2.1 外用給藥的部位的選擇與處理。給藥部位應與臨床用藥保持一致，一般選用動物皮膚作為主要給藥部位。實驗前先根據實驗目的和要求，確定需要備皮的部位，給藥皮膚應光潔裸露、無損傷及瘢痕；如給藥時間較長，應在2～3d內脫毛1次，盡量消除毛發對給藥的影響。實驗過程中，用藥前后根據情況，可用溫水清洗用藥部位。

2.2 給藥過程中給藥時間、劑量、劑型、給藥方法的確定。

2.2.1 f外用給藥時間應盡量與臨床保持一致。如給幾次藥，每次保持多長時間，給藥間隔時間，共給幾天等。

2.2.2 外用藥的劑量的確定。對于粉末或膏狀，原則上以均勻涂覆在給藥區一層。根據多次試驗并與臨床溝通，認為中藥粉劑外用每層厚度約2—3mm；同時要對粉劑的粉碎度進行規定，根據不同中藥的性質，一般在60-80目之間，此粉碎度，無明顯的沙粒感，易于藥物發揮作用。

2.2.3 外用劑型及外用給藥方式。受試中藥應與臨床中藥外用制劑一致，如含有透皮促進劑或賦形劑有一定活性等，應考慮設透皮促進劑或賦形劑的對照組。

2.3 外用實驗的分組及對照組的設置。外用藥理實驗可設計2—3個劑量組，通過提高用藥的濃度、增大外用藥量、增大用藥面積改變外用藥量。但對于外用藥，每一種方式都有其不足，如濃度不能提高太多，濃度高可能不利于皮膚的吸收或在局部作用的發揮；外用給藥量的增大可能只是增加了藥物量，接觸藥物的皮膚面積不變，并不會明顯增加療效；增大用藥面積又會導致各組條件的不一致，缺少可比性。基于上述因素的綜合考慮，設置出合理的實驗組與對照組。

2.4 結果觀察做出實驗報告。

2.4.1 急性毒性試驗：

2.4.1.1 家兔急性毒性試驗：成年健康白色家兔24只，體重2kg左右，雌雄各半。賦形劑：30%的乙醇溶液。將家兔按體重、性別隨機分為6組，每組4只，即：完整皮膚模型動物，分為高、低劑量的實驗組和基質對照組。破損皮膚模型動物，分為高、低劑量的實驗組和基質對照組，受藥物濃度的限制，低劑量設為1.25ml/kg，高劑量設為5ml/kg，2次/d給予家兔，于試驗前24h用Na2S淀粉糊將所有動物背部脊柱兩側去毛，去毛面積約為150cm2（約占體表面積的10%）。破損皮膚去毛部位消毒后采用刀片將皮膚劃破，以滲血為度。試驗時將不同劑量擦劑或基質均勻涂于脫毛區，表面覆蓋無刺激性紗布，用膠布固定，每次低劑量給藥0.625ml/kg，高劑量給藥2.5ml/kg，間隔6h再給藥一次，共2次。第二天用溫水除去殘留藥物。

2.4.1.2 一般觀察：給藥即刻至第7天，每日觀察動物的全身中毒表現和死亡情況，包括皮膚、毛發、眼睛、粘膜、四肢活動有無異常變化，同時觀察動物呼吸、中樞神經系統有無中毒癥狀表現，以及給藥前后動物體重變化。實驗結果見表1.表2、表3。

由表1.表2可見，完整皮膚和破損皮膚模型動物給藥劑量高達臨床等效量40倍時，動物仍無死亡，觀察各組動物均未出現異常變化，一般活動正常，行為活潑，毛發亮光，飲食、排便無異常，口、眼、鼻無異常分泌物，粘膜無充血；由表3可見，家兔給藥前后，體重無明顯變化。說明該藥無毒，該藥的臨床用藥量是一個安全的劑量。

2.4.1.3 病理組織學檢查：觀察期結束，取各組部分動物敲擊頭部致死，取用藥部位皮膚進行病理組織學檢查，結果表明，正常組動物皮膚角質層、表皮層和真皮層結構完整，而破損皮膚組動物為角化的復層扁平上皮，表明該擦劑高、低劑量組，家兔用藥后皮膚與對照組比較未見顯著性差異。

觀察實驗結果顯示，使用上述復方中藥擦劑對實驗家兔的正常皮膚擦涂7天后，均有黑斑產生，說明該擦劑能刺激實驗家兔正常皮膚的黑色素的產生，為進一步研究該擦劑的臨床效果—治療白癜風、白斑病等黑色素疾病缺失性疾病提供了理論、實驗依據。