香菇和杏鮑菇培養基pH值條件和營養液濃度的優化

胡敏　杜寶海

摘 要：為優化香菇和杏鮑菇兩種食用菌生長的培養基條件，對不同pH值和營養液濃度下菌絲形態和菌落的生長狀態進行研究，篩選適宜兩種食用菌生長的pH值條件和營養液濃度。結果表明，香菇和杏鮑菇培養液的最適pH值分別為8.0和6.0，最適培養液濃度均為0.6%，在此條件下，菌絲生長速度快，橫隔多，鎖狀聯合密集，液泡和細胞核明顯。

關鍵詞：香菇；杏鮑菇；培養條件；菌絲形態；菌落

中圖分類號：S646 文獻標識碼：A DOI 編碼：10.3969/j.issn.1006-6500.2018.09.013

Optimization of Medium pH and Nutrient Solution Concentration of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii

HU Min， DU Baohai， BI Xiaojuan， SUN Meng， LIN Jiaying， MENG Xiangsen

（College of Life Science ， Daqing Normal University， Daqing， Heilongjiang 163712， China）

Abstract： In order to optimize the conditions of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii， the experiment was conducted to study the mycelial morphology and the colony growth in different pH and nutrient solution concentration， selecting the optimal environment for the growth. The results showed that the optimum pH of Lentinus edodes and Pleurotus eryngii were 8.0 and 6.0 respectively， the optimum nutrient solution concentration were both 0.6%. Compared with the other conditions， the two edible fungi under the optimized condition had faster growth rate， more transverse septa of mycelium， denser had clamp connection of mycelium ， and the vacuole and cell nuclear were easier to be observed.

Key words： Lentinus edodes； Pleurotus eryngii； training condition； hyphase form； colony

香菇（Lentinus edodes），又名香菌，是側耳科植物香菌的子實體，營養價值高[1]。香菇的培養過程中，菌絲生長速度常常作為早期重要指標廣泛應用于菌種特性評價和育種篩選工作中[2]。

杏鮑菇（Pleurotus eryngii），又名刺芹側耳，杏鮑菇菌肉肥厚，質地脆嫩，營養豐富，具有杏仁香味[3]，有較高的食用價值和藥用價值，具有潤腸、美容、抗腫瘤等作用，是聯合國糧農組織向世界各國推薦的食用菌新品[4]。

食用菌的菌絲在不同培養條件下，生長狀態有所不同，菌絲形態、生長速度、生長勢等特征存在差異[5]。本文通過控制pH值和營養液濃度，觀察香菇和杏鮑菇菌絲形態和菌落特征，最終確定單因素條件下兩種食用菌菌絲培養的最佳環境，為食用菌子實體的生長和大規模栽培提供一定的理論依據。

1 材料和方法

1.1 試驗材料

1.1.1 供試材料 香菇和杏鮑菇為市售。

1.1.2 試劑 固體PDA培養基；市售營養液為濃縮液體肥，其配方包括大量元素氮（30 g·L-1）、磷（15 g·L-1）、氧化鉀（17.5 g·L-1），中量元素氧化鎂（1.3 g·L-1）、硫（1.7 g·L-1）外，還含有利于植物茁壯成長所備的整合態微量元素，其總含量≥0.2 g·L-1；1 mol·L-1 HCl溶液；1 mol·L-1 KOH溶液。

1.1.3 儀器設備 高壓蒸汽滅菌鍋，超凈工作臺，顯微鏡，電磁爐，水浴鍋，6 mm打孔器；燒杯，玻璃棒，三角瓶，培養皿（若干）。

1.2 試驗方法

1.2.1 菌種的獲取 將香菇和杏鮑菇切成1 cm3小塊，酒精浸泡1 min，用濾紙吸干酒精后分別接種在固體PDA培養基中，在溫度為25 ℃，濕度為60%條件下進行培養。

1.2.2 pH值條件優化試驗 將培養至第7天的香菇和杏鮑菇菌絲用打孔器分別接種在pH值為5，6，7，8，9的固體PDA培養基上，每個pH值培養基接種2組，一組用于菌落觀察，另一組用作插片觀察[6]，每組重復3次。

1.2.3 營養液濃度優化試驗 將培養至第7天的香菇和杏鮑菇菌絲用打孔器分別接種在營養液濃度為0.4%，0.5%，0.6%，0.7%，0.8%的固體PDA培養基上，每個營養液濃度的培養基接種2組，一組用于菌落觀察，另一組用作插片觀察，每組重復3次。

1.2.4 菌絲形態和菌落的觀察 （1）用光學顯微鏡（物鏡40×；油鏡100×）進行插片鏡檢，對其分隔的有無及是否明顯，鎖狀聯合的有無及密集程度（不密集，較密集，密集，多密集），液泡和細胞核是否明顯等進行觀察，并拍照記錄；（2）觀察菌絲的外觀形態和生長勢，用“+++”表示生長勢好，用“++”表示生長勢一般，用“+”表示生長勢差，用“-”表示不生長；（3）測量菌落半徑，每個平板按照劃線測量4個值，取平均值，計算菌落生長半徑（cm·d-1）。

2 結果與分析

2.1 pH值條件優化

2.1.1 不同pH值對兩種食用菌菌絲形態的影響 從表1和圖1可以看出，香菇在pH值6～9時，菌絲有橫隔和鎖狀聯合，液泡和細胞核有些較明顯，其中pH值為8時有明顯分隔，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯；杏鮑菇在pH值為5～9時，菌絲有橫隔，有鎖狀聯合，液泡和細胞核有些較明顯，其中pH值為6時有明顯分隔，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯。

2.1.2 不同pH值對兩種食用菌菌落的影響 從表2可以看出，香菇在pH值為5，6，7，9時，菌絲生長勢一般或較差，菌落生長半徑較小，pH值為8時菌絲生長勢好，菌落生長半徑最大，為1.95 cm·d-1；杏鮑菇pH值為5，7，8，9時，菌絲生長勢一般或較差，菌落生長半徑較小，pH值為6時菌絲生長勢好，菌落生長半徑最大，為2.01 cm·d-1。

2.2 營養液濃度優化

2.2.1 不同營養液濃度對兩種食用菌菌絲形態的影響 從表3和圖2可以看出，香菇在營養液濃度為0.5%～0.8%時，菌絲有橫隔，有鎖狀聯合，液泡和細胞核有些較明顯，其中濃度為0.6%時菌絲分隔明顯，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯；杏鮑菇在營養液濃度為0.4%～0.8%時，菌絲有橫隔，有鎖狀聯合，液泡和細胞核有些較明顯，其中濃度為0.6%時菌絲分隔明顯，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯。

2.2.2 不同營養液濃度對兩種食用菌菌落的影響 從表4可以看出，香菇在營養液濃度為0.4%，0.5%，0.7%，0.8%時，菌絲生長勢一般或較差，菌落生長半徑較小，營養液濃度為0.6%時，菌絲生長勢最好，菌落生長半徑最大，為2.28 cm·d-1；杏鮑菇在營養液濃度為0.4%，0.5%，0.7%，0.8%時，菌絲生長勢一般或較差，菌落生長半徑較小，營養液濃度為0.6%時菌絲生長勢最好，菌落生長半徑最大，為1.85 cm·d-1。

3 結論與討論

食用菌菌絲在不同的外界條件影響下其生長特性均有不同的表現，其顯微形態結構的表現與外在形態之間具有一定的關聯特征。當外界條件適宜菌絲生長時，菌絲表現為生長速度快、長勢好，其顯微形態結構通常表現為菌絲間橫隔長，鎖狀連合密集，并且液泡和細胞核容易觀察到。當外界條件不適宜菌絲生長時，菌絲表現為生長速度慢，長勢差，其顯微形態結構通常表現為菌絲橫隔短，鎖狀連合不密集，并且液泡和細胞核不容易觀察到[6]。

本試驗在研究不同pH值條件對兩種食用菌菌絲形態的影響時，發現香菇和杏鮑菇分別在pH值8.0和pH值6.0時生長勢最好，菌絲橫隔明顯，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯，最大生長半徑分別為1.95 cm·d-1和2.01 cm·d-1；在研究不同營養液濃度對兩種食用菌的影響時，發現香菇和杏鮑菇均在濃度為0.6%時生長勢最好，菌絲生長速度快，橫隔明顯，鎖狀聯合多密集，液泡和細胞核明顯，最大生長半徑分別為2.28 m·d-1和1.85 cm·d-1。與張穎等[7]在研究外界環境對香菇菌絲體生長影響中香菇最適pH值不同，主要原因在于所用培養基配方存在本質上差異導致，本試驗所采用的僅是普通的固體PDA培養基。

參考文獻：

[1]徐思煒，張君勝，周雯.香菇液體菌種培養條件優化[J].江蘇農業科學，2014，42（12）：290-292.

[2]宋春艷，楊曉春，張丹，等.香菇L808菌株自交子代在變溫培養中菌絲生長速度的分化[J].食用菌學報，2015，22（3）：17-20.

[3]田景花，李明，李守勉.我國杏鮑菇生產研究進展[J].北方園藝，2013，37（4）：179.

[4]暴增海，馬桂珍. 杏鮑菇多糖和營養成分的研究現狀[J]. 北方園藝，2007（6）：239-240.

[5]鄭國楊，廖漢泉. 中國草菇生產[M].北京.中國農業出版社，2000：99-148.

[6]郭勇，葉小金. 不同溫度和光照培養條件下3種食用菌菌絲的菌落及菌絲形態的研究[J]. 西南農業學報，2011，24（6）：2301-2306.

[7]張穎，陶佳喜.外界環境對香菇菌絲體生長的影響[J].湖北農業科學，2001（6）：58-60.