瑤藥抗疲方對慢性疲勞綜合征大鼠血清SOD活性和血液流變學的影響*

張林平，戴必勝，歐陽資章

1清遠職業技術學院護理學院，廣東 清遠 511520;2清遠市人民醫院藥劑科

慢性疲勞綜合征（chronic fatigue syndrome，CFS）患者常表現為難以忍受的全身乏力、慢性疲勞，患者工作生活受到很大影響。筆者采用瑤藥和傳統中藥組成瑤藥抗疲方治療慢性疲勞綜合征，對消除疲勞有顯著的效果［1］，但其治療機制尚未闡明。CFS的發病與患者在應激狀態下神經-內分泌-免疫網絡調節及代謝功能失調有關，相關的文獻報道多以此為基礎來闡明CFS的發病機制

和治療機制。本實驗以Wistar大鼠建立慢性疲勞綜合征模型，并以瑤藥進行干預，測定大鼠血清丙二醛（MDA）含量、超氧化物歧化酶（SOD）活性以及血液流變參數變化，試圖為瑤藥抗疲方治療CFS提供實驗依據，并從氧自由基代謝和血液流變學角度推測CFS的發病機制和瑤藥抗疲方的治療機制。

1 材料與方法

1.1 動物 Wistar大鼠30只，雄性，平均體質量（180±20）g，實驗動物合格證號：SCXK（粵）20090011。由廣東省醫學實驗動物中心提供。

1.2 藥物 瑤藥抗疲方，藥物組成：黃花倒水蓮20g，五指毛桃20g，黨參15g，白術10g，丹參15g，葛根15 g，淫羊藿15 g，郁金15 g。以上中草藥均購自廣東大參林連鎖藥店有限公司，經鑒定全部藥材均符合藥用標準。將上方水煎濃縮為含生藥1.30 g/mL的濃縮液。

1.3 分組與造模 取雄性大鼠30只，適應性飼養，任其自由攝水和飲食。1周后，隨機選取10只大鼠為對照組，另外20只進行慢性疲勞綜合征大鼠造模。造模方法采用文獻報道方法［2-3］：1）單日冷水（4℃）游泳30分鐘（勞力）；2）雙日讓其與發情期Wistar雌鼠合籠（每次合籠均新換一批雌鼠，房勞）；3）每天上午9：00～12：00 將大鼠置于自制限制活動的塑料筒內，不能自由活動，同時禁止飲食，每次限制活動3小時（勞神）。造模時間連續14天，造模結束后，將造模成功的20只雄鼠隨機分為模型組及瑤藥抗疲方組，每組10只。

1.4 處理方法 1）對照組與模型組：普通飼養，按每100g體質量1mL給予生理鹽水灌胃；2）瑤藥抗疲方組：普通飼養，按每100 g體質量1 mL給予瑤藥抗疲方濃縮液灌胃。從造模結束次日起開始灌胃給藥，3組均1次/d，連續14天。

1.5 取材與檢測 末次給藥次日，3組大鼠均采集頸總動脈血。試管中靜置20分鐘，4℃，3 000 r/min離心10分鐘，按照測定試劑盒的技術要求制備血清。用HT-l型血液流變儀（上海航天局第803所）測定全血黏度（高切、低切）、血漿黏度。SOD和MDA測定分別采用硫代巴比妥酸法、黃嘌呤氧化酶法，試劑盒均購于南京建成生物工程研究所。

1.6 統計學方法 所有數據采用SPSS 17.0統計軟件處理，計量資料以（±s）表示，采用t檢驗，P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 大鼠血清M D A含量及SO D活性 模型組大鼠與對照組比較，大鼠血清SOD活性明顯下降（P＜0.01）并且MDA含量明顯上升，差異有統計學意義（P＜0.01）；瑤藥抗疲方組與模型組比較，大鼠血清SOD活性及血清MDA含量差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組大鼠血清M D A含量及SO D活性比較（±s）

表1 3組大鼠血清M D A含量及SO D活性比較（±s）

注：與模型組比較，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01

組別 只數 劑量 /（g·kg-1） M D A/（nm ol·m L-1） SO D/（U·m L-1）對照組 10 - 6.99±1.24b 245.29±12.54b模型組 10 - 9.01±0.56 224.67±12.63瑤藥抗疲方組 10 13.0 8.18±0.48a 244.10±5.21b

2.2 大鼠血液流變學指標 模型組與對照組比較，高切和低切黏度升高明顯（P＜0.01），血漿黏度升高明顯（P＜0.01）；瑤藥抗疲方組與模型組比較，大鼠高切和低切黏度降低明顯（P＜0.01），血漿黏度有所降低（P＜0.05）。見表2。

表2 3組大鼠血液流變學指標比較（±s）

注：與模型組比較，a表示P＜0.05，b表示P＜0.01

組別 只數 劑量/（g·kg-1） 全血黏度/（m Pa·s） 血漿黏度/（m Pa·s）高切200/s 低切1/s對照組 10 - 0.20±0.06b 4.22±0.41b 1.13±0.09b模型組 10 - 2.38±0.53 6.30±0.27 1.45±0.81瑤藥抗疲方組 10 13.0 0.44±0.08b 4.38±0.41b 1.19±0.22a

3 討論

CFS患者的物理和實驗室檢查常無明顯的特異性表現，其發病機制仍然在探索之中。有研究顯示，神經-內分泌-免疫網絡調節及代謝功能失調可能參與了CFS的發生。現代醫學研究認為自由基與許多疾病的發生發展有關。有文獻報道，CFS的發生與自由基網絡中的氧自由基代謝平衡失調有關［4］。機體通過有效的抗氧化防御系統，維持氧自由基生成與清除的動態平衡。在抗氧化防御系統中，SOD是最主要的抗氧化酶，是氧自由基的清除劑，可保護細胞免受損傷。MDA是氧自由基與不飽和脂肪酸發生脂質過氧化反應的代謝產物，對細胞有損傷作用。二者的測定常常相互印證，反映機體氧自由基的代謝狀況。本實驗結果顯示，模型組大鼠血清SOD活性降低而MDA含量升高，反映出模型大鼠氧自由基代謝紊亂。推測可能與大鼠在勞力、勞神、房勞狀態下，機體清除氧自由基能力下降、代謝穩態失衡，其強大的破壞作用引起機體組織功能的氧化損傷，導致機體內環境如神經-內分泌-免疫網絡調節及代謝功能失調有關。瑤藥抗疲方對CFS大鼠進行干預后，均能不同程度地提高大鼠血清SOD的活性，降低MDA的含量，提示瑤藥抗疲方能增強機體清除氧自由基的能力，抵抗氧自由基對機體的氧化應激損害，維持自由基生成與清除的代謝穩態，這可能是瑤藥抗疲方治療CFS的機制之一。

本實驗同時觀察到模型組大鼠在不同切變力下全血黏度和血漿黏度與對照組大鼠相比明顯升高，提示在CFS狀態下，大鼠機體血液流變學特性改變可能與CFS的發生發展有關［5］。血液流變性異常引起血流動力學變化、微循環障礙，導致組織缺血缺氧、代謝紊亂和功能失調，導致CFS發生。本實驗中瑤藥抗疲方組大鼠的血液流變學指標明顯比模型組大鼠下降，提示瑤藥抗疲方能降低血液黏度，改善微循環，改善組織缺血缺氧狀態，改善CFS機體內環境，促進CFS的康復。

現代中醫藥研究認為CFS可導致多個臟腑的氣血陰陽失調，病機復雜。筆者在臨床中觀察到CFS患者多見心、脾、腎3臟氣虛，濕瘀阻滯，氣郁不利等證，瑤藥抗疲方據此而立。方中黃花倒水連、五指毛桃是廣東瑤族地區常用的民間草藥。現代藥理研究顯示，黃花倒水蓮具有清除自由基作用［6］，黃花倒水蓮總苷能抑制血瘀模型和高脂血癥血液流變學指標的改變，降低血液黏度，改善血液循環［7］。五指毛桃水提液可提高實驗小鼠血清SOD，降低小鼠血清 MDA水平［8］。方中白術含有的白術多糖能增強衰老大鼠大腦皮質SOD、GSH-Px活力，降低自由基代謝產物的含量［9］。丹參活血化瘀，可改善微循環。葛根素對家兔紅細胞壓積、全血比黏度、血沉等指標也有改善作用。淫羊藿總黃酮可明顯增強機體神經內分泌免疫網絡的調節功能，維持機體內環境穩定，激發機能，延緩衰老［10］。瑤藥抗疲方選藥結合了現代藥理學的研究成果，諸藥相互協同，起到了改善CFS大鼠血液流變學異常和恢復機體氧自由基代謝平衡的作用。

以中醫病因理論為依據，通過竭力運動、束縛應激和過度交配模擬人類的勞傷致病因素，建立大鼠CFS模型，與人類因社會環境和工作壓力而產生CFS狀態的病因相似。瑤藥抗疲方干預CFS大鼠，可減輕大鼠的疲勞反應，增強其抗自由基氧化能力，降低血液黏度，改善微循環，從而起到治療CFS的作用。