自身免疫性溶血性貧血對血型鑒定及交叉配血結果的影響

黎海江，馮學冠，符曉玲，楊藝偉，黃 植

自身免疫性溶血性貧血(AIHA)患者的自身抗體可以引起紅細胞的破壞，從而出現溶血性貧血。AIHA患者自身抗體包括溫抗體、冷抗體和冷-熱混合型抗體。這些自身抗體的存在，不僅凝集自身紅細胞，同時也凝集供者紅細胞，對AIHA患者的輸血前鑒定試驗帶來巨大的干擾，影響著輸血治療的安全性和療效[1]。本研究回顧性分析了128例AIHA患者的血清學特征及其對輸血前血型鑒定及交叉配血的影響，為AIHA患者的安全輸血提供參考。

1 資料與方法

1.1 病例資料 以2015年1月～2017年12月本院診治的AIHA患者128例為觀察對象，男性86例，女性 42 例，年齡 3～78（21.6±20.8）歲，未成年人82例，成年人46例。

1.2 試驗方法

1.2.1 抗人球蛋白試驗 取患者靜脈血6 ml，2000 r/min離心10 min，分離血清與紅細胞；生理鹽水洗滌紅細胞3次后，將紅細胞配成30 ml/L的紅細胞懸液，進行直接抗人球蛋白試驗（DAT）及間接抗人球蛋白試驗（IAT）。DAT/IAT試劑盒購自上海血液生物醫藥有限責任公司（國食藥監械準字2008第2400311號），按照試劑盒說明書進行操作及結果判定。

1.2.2 血型鑒定及交叉配血試驗 所有患者均在輸血前6 h內采用EDTA抗凝真空采血管抽取靜脈血2 ml，進行ABO、RH血型鑒定及交叉配血試驗。ABO血型鑒定采用試管法，進行正反定型，抗A、抗B標準血清購自北京中聯安華科技公司。交叉配血采用凝聚胺試驗法，試劑盒購自上海博普生物技術有限公司，按照試劑盒說明書進行操作。對血型鑒定及交叉配血結果判定困難者，進行氯喹放散試驗，具體操作及結果判定參照中國輸血技術操作規程進行[2]。

1.3 統計學方法 應用SPSS16.0統計軟件分析，計數資料以例及百分率表示，不同組間比較采用R×C列表χ2檢驗，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 抗人球蛋白試驗結果 128例AIHA患者DAT均陽性，強度在+～++++，以++和+++為主，占71.1%。IAT也均陽性，強度同DAT相似，抗體類型中以溫抗體型為主，其次是混合抗體型，冷抗體型最少。見表1。

2.2 血型鑒定及交叉配血結果 128例AIHA患者中，ABO血型正反定型不符65例（50.8%），隨著DAT陽性強度的增高，ABO血型正反定型血型不符的發生率顯著升高（P＜0.05）；不同抗體類型的AIHA患者血型正反定型不符合的發生率亦不相同（P＜0.05），其中冷抗體型最高，其次為混合抗體型，溫抗體型最低。128例患者中，72例（56.3%）交叉配血不相合，并且DAT陽性強度越高，交叉配血不相合的發生率越高（P＜0.05）；不同抗體類型的AIHA患者交叉配血不相合的發生率無顯著差異（P＞0.05）。溫抗體型血型正反不符者經氯喹分散試驗后，正反定型均相符；冷抗體型及混合抗體型中，ABO血型正反定型不符者經37℃加熱、再經氯喹分散試驗后，正反定型均相符，見表2。

表1 AIHA患者抗人球蛋白試驗結果(n=128)

表2 不同DAT強度及抗體類型AIHA患者血型及交叉配血結果［n(%)］

3 討論

由于AIHA患者存在自身抗體，可與紅細胞發生凝集而影響輸血治療，因此，原則上AIHA患者一般不進行輸血治療，但對于貧血嚴重而危及生命時，不得不輸血治療。也正是由于自身抗體的存在，AIHA患者輸血前血型鑒定和交叉配血難度增加[4]。本研究首先對128例AIHA患者抗人球蛋白試驗結果及抗體類型進行了回顧性分析，結果發現，所有患者DAT或IAT均陽性，陽性程度以++或+++為主，證實AIHA患者中存在較高滴度的自身抗體，與文獻報道一致[5]。另外，AIHA患者中抗體類型以溫抗體型為主，冷抗體型或混合抗體型較少，說明多數AIHA患者的這些抗體在35～40℃與紅細胞發生反應，與文獻報道一致[4]。

分析本組AIHA患者血型鑒定及交叉配血試驗結果發現，血型鑒定正反定型不符合者占50.8%，交叉配血不合者占56.3%，可見AIHA患者容易造成血型鑒定困難及交叉配血不合，這直接影響著患者輸血的安全性。這主要是由于AIHA患者體內存在自身抗體，這種抗體不僅造成自身紅細胞的凝集，同時還可與供血紅細胞凝集，影響著血型鑒定及交叉配血結果[6]。另外，本研究還發現，DAT陽性強度越高，血型正反定型不符合及交叉配血不合的發生率越高，表明DAT陽性強度與血型定型不符合及交叉配血不合相關，與文獻報道一致[4]。AIHA患者DAT陽性強度越高，在一定程度上反映自身抗體的水平越高，越容易造成自身或供血紅細胞的凝集，從而越容易影響血型定型及交叉配血結果。由于本組資料中無RH陰性標本，故對RH定型的影響未納入研究。

發現血型正反鑒定不符合或交叉配血結果不合時，如何處理以保證結果的可靠性，是對輸血科工作人員的考驗。對溫抗體型患者，采用氯喹分散試驗可有效去除紅細胞表面的自身抗體，從而減少和抑制紅細胞凝集，從而保證血型正反定型相符[1,4]。本組對溫抗體型血型正反定型不符合的AIHA患者進行了氯喹分散試驗后，均正反定型相符，排除了自身抗體對血型鑒定的影響。對于冷抗體型或混合抗體型，由于冷抗體的存在，選擇37℃溫浴或紅細胞熱洗滌等方式，可去除自身抗體對交叉配血或血型鑒定的影響[7]。本組對冷抗體型或混合抗體型AIHA患者在37℃水浴后再進行氯喹分散試驗，能夠有效清除對血型鑒定和交叉配血結果的影響。

綜上所述，AIHA患者自身抗體類型以溫抗體型為主，容易造成血型正反定型不符合及交叉配血不合，并且DAT強度與血型不符及交叉配血不合相關。采取氯喹分散試驗或37℃溫浴去除自身抗體的影響，可減少血型不符及交叉配血不合發生率。