C4d和CD3對IgA腎病預后的預測價值

楊永林

(商洛市中心醫(yī)院 腎臟內科,陜西 商洛726000)

IgA腎病(Immunoglobulin A nephropathy，IgAN)是世界上最常見的原發(fā)性腎小球腎炎，以IgA在腎小球系膜區(qū)沉積為主要特征[1,2]。有研究表明，約有30%的IgAN患者將進展為終末期腎病，需要透析治療[3,4]。目前認為，高血壓，起病時腎小球濾過率(GFR)降低，系膜增生、節(jié)段壞死、小管萎縮-間質纖維化均與患者預后不良有關[5,6]。近年研究表明許多分子可能與IgA腎病的發(fā)病和進展有關，這表明生物標志物可成為預測IgA腎病進展的有力工具[7,8]。有研究表明，C4d和CD3均與IgAN預后不良有關[9]。本研究探討腎臟C4d沉積和CD3表達對IgAN患者預后的作用。

1 資料與方法

1.1 病例資料

2010年1月至2012年12月，我院收治經腎臟穿刺活檢病理確診IgA腎病患者80例，其中男性56例，女性24例；年齡18-78歲，中位年齡39歲。均經HE染色、免疫組化IgG、IgM、C1q染色，以及投射電鏡檢查，并按IgA腎病牛津分型進行評分。

1.2 免疫組化檢測C4d、CD3

采用免疫組化試劑盒說明書進行操作，石蠟切片脫蠟水化后，滅活內源性過氧化物酶，PBS沖洗，抗原修復，加入山羊血清封閉，加入兔抗人C4d和CD3 37℃孵育2 h，聚合物增強劑37℃孵育20 min，標記二抗，AEC顯色。用TBS緩沖液代替第一抗體作為陰性對照。高倍鏡下(×400)隨機選取4個視野，計數(shù)細胞總數(shù)及核陽性數(shù)，按陽性細胞所占的百分比(P)計分：<10%為1分，10%-50%為2分，50%-75%為3分，>75%為4分；同時根據(jù)染色的強弱程度積分：陰性1分，弱染色2分，中等程度染色3分，強染色4分。以兩者乘積判斷結果：1-8分為陰性；8-16分為陽性。

1.3 觀察指標

通過電話或門診對患者進行隨訪，隨訪終點為末次隨訪或進展期腎病(隨訪期間腎小球濾過率下降50%或進展至終末期腎病)[10]。根據(jù)隨訪結果將患者分為進展期腎病和非進展期腎病。比較C4d、CD3、患者臨床病理特征(高血壓，肉眼血尿等)與預后的相關性；比較兩組IgA腎病患者腎臟存活率。

1.4 統(tǒng)計學分析

應用SPSS 19.0軟件進行分析，患者間一般資料比較采用Pearsonχ2檢驗或fisher精確檢驗；腎臟存活率采用Kaplan-Meier分析并log-rank檢驗；多變量logistic回歸分析影響進展期腎病的相關因素。P<0.05為有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者一般資料比較

24例患者(30%)隨訪期間發(fā)展為進展期腎病。對兩組患者臨床病理因素進行分析，發(fā)現(xiàn)進展期腎病與年齡、性別、肉眼血尿、免疫沉積物(IgM、IgG、C1q)及牛津病理分型M1，S1，E1無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。高血壓、eGFR、蛋白尿、牛津病理分型T1-2、C4d、CD3與進展期腎病相關(P<0.05)。見表1，圖1。

表1 患者一般資料比較

注：與非進展期腎病比較，①P<0.05。

腎間質浸潤性T細胞CD3染色，a，嚴重；e，輕度b,C4d陽性；f,C4d陰性

2.2 C4d對患者腎臟存活率的影響

患者出院后進行為期4年的隨訪，中位隨訪時間為3.4年。C4d陽性患者腎臟存活率顯著低于C4d陰性患者(45.8% vs 69.6%，11/24 vs 39/56，P<0.05)。

2.3 影響腎臟存活率回歸分析

對患者的臨床病理資料如年齡、性別、高血壓、牛津病理分型及C4d，CD3積分等進行分析，結果表明，eGFR、C4d、CD3水平均為影響患者預后的獨立危險因素(P<0.05)，見表2。

表2 影響腎臟存活率的回歸分析結果

3 討論

本研究證實一些危險因素如eGFR降低、高蛋白尿、高血壓和牛津病理分型T1-2[11]對IgA腎病的預測作用，臨床病理參數(shù)的多變量分析結果表明，蛋白尿和高血壓與疾病進展有相關性，這與Espinosa M和Myllymaki J M等研究結果一致[12,13]。此外，我們對兩組患者臨床病理因素進行分析，發(fā)現(xiàn)進展期腎病與M1，S1，E1無相關性，與彭用華[14]的研究結果一致，與Masutani等[15]的研究相反，我們對此進行了分析，認為有以下幾個原因：①本研究樣本量小，且排除了兒科患者；②本研究中患者病情較嚴重，表現(xiàn)為更高的蛋白尿和更低的eGFR。

IgA腎病已被證實是一種免疫復合物介導的腎小球腎炎，越來越多的證據(jù)證實補體激活參與 IgA腎病的疾病進展，現(xiàn)多認為IgA腎病補體啟動是從C3旁路途徑開始，表現(xiàn)為系膜C3、IgA、IgM、IgG沉積；除此還存在甘露糖結合凝集素(MBL)補體啟動途徑，表現(xiàn)為系膜C4d沉積，檢測C4d在腎臟沉積情況可能有助于預測 IgA腎病患者腎臟疾病的進展及預后[16]。本研究中，C4d陽性患者腎臟存活率顯著低于C4d陰性患者，證實了腎小球C4d沉積可作為IgA腎病補體凝集素途徑激活的標志物，能夠反映IgA腎病疾病進展；腎小管間質損傷，特別是炎癥損傷，是影響IgAN腎病預后的重要因素。典型的T細胞表達抗原CD3多用于量化組織炎癥的程度，并可作為腎小管間質損傷標志物預測疾病進展。本研究結果也證實CD3與進展期腎病相關。

綜上所述，我們證實C4d和CD3可預測IgAN的疾病進展，該方法具有廉價方便，敏感性和特異性良好等優(yōu)點，可將其作為預測疾病臨床進展的指標。