2種提取靈芝菌絲體基因組DNA方法的比較

孫墨可 李曉薇 張曼 田娟 董玉迪

摘 要：比較2種DNA提取方法提取靈芝菌絲體基因組DNA之間的差異，分別用改良的CTAB法和TPS法提取10株菌絲體基因組DNA，用超微量紫外分光光度計測定和瓊脂糖凝膠電泳的方法進行濃度及純度的測定。結果表明：利用改良的CTAB法提取靈芝菌絲體基因組DNA得到的濃度與純度較高，但耗費時間較長；利用TPS法提取的靈芝菌絲體基因組濃度與純度相對較低，但相對耗費時間較短；這2種方法提取的基因組都可以用于后續的PCR擴增反應。

關鍵詞：靈芝；CTAB；TPS；基因組

中圖分類號 S567.31 文獻標識碼 A 文章編號 1007-7731（2018）21-0034-02

靈芝（Ganoderma lingzhi）是我國著名的食藥用真菌，有著悠久的歷史文化[1]。靈芝含有多糖、萜類化合物、核苷、生物堿、氨基酸多肽、微量元素等多種活性成分。現代藥理研究表明，靈芝具有保肝、抗腫瘤、抗HIV-1及HIV-1蛋白酶活性、抗組織胺釋放、抑制血管緊張素、抗氧化、調節免疫及延緩衰老的作用[2-6]。當前對靈芝分子生物學研究不斷深入，如靈芝中的基因克隆與表達，轉化體系的建立等[7-9]。靈芝基因組的提取是進行后續分子生物學研究的基礎，基因組DNA的質量直接影響后續實驗的質量，實驗過程耗時少也是許多研究者的追求。CTAB是一種陽離子去污劑，具有從低離子強度溶液中沉淀核酸與酸性多聚糖的特性[10]。TPS法是一種快速提取小量DNA的方法，最初用到水稻上。筆者利用CTAB法與TPS法分別提取靈芝基因組DNA以進行比較，旨在為今后靈芝分子生物學方面的科研提供較適宜的DNA提取方法。……