虎杖苷對(duì)葡聚糖硫酸鈉誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎的作用及其對(duì)Hedgehog通路影響

呂婷婷， 楊 雷， 沈 磊

武漢大學(xué)人民醫(yī)院消化內(nèi)科 消化系統(tǒng)疾病湖北省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430060

炎癥性腸病(inflammatory bowel disease, IBD)是指一組病因不明的慢性非特異性腸道炎癥性疾病，包括潰瘍性結(jié)腸炎(ulcerative colitis，UC)和克羅恩病(Crohn’s disease，CD)。近50年來，隨著人民生活水平改善和臨床診斷水平的提高，UC的發(fā)病率持續(xù)增長(zhǎng)，從(8～14)/10萬增加到(120～200)/10萬，CD發(fā)病率從(6～15)/10萬增加到(50～200)/10萬[1]。虎杖苷作為一種植物多酚類藥物，具有較強(qiáng)的抗炎、抗氧化藥理學(xué)作用[2]，有研究[3]表明，虎杖苷能夠通過上調(diào)Hedgehog信號(hào)通路來發(fā)揮抗炎、抗氧化、抗凋亡作用。目前尚無實(shí)驗(yàn)研究虎杖苷在小鼠急性UC中對(duì)Hedgehog信號(hào)通路的影響，本課題擬探討虎杖苷對(duì)葡聚糖硫酸鈉(dextran sodium sulfate, DSS)誘導(dǎo)的UC的作用及其對(duì)小鼠結(jié)腸組織中Hedgehog通路的影響。

1 材料與方法

1.1實(shí)驗(yàn)材料雄性C57BL/6J小鼠30只，SPF環(huán)境下飼養(yǎng)，6～8周齡，體質(zhì)量為(22±2)g，購(gòu)自北京維通利華實(shí)驗(yàn)動(dòng)物技術(shù)有限公司。DSS相對(duì)分子質(zhì)量為35 000～50 000，購(gòu)自美國(guó)MP公司。虎杖苷(純度≥98%)購(gòu)自北京百靈威科技有限公司。PCR反轉(zhuǎn)錄試劑盒購(gòu)自美國(guó)Sigma公司，抗Gli1蛋白一抗購(gòu)自美國(guó)艾博抗有限公司。

1.2實(shí)驗(yàn)分組30只小鼠采用隨機(jī)數(shù)字表法分成空白組、模型組、虎杖苷低、中、高干預(yù)組(15 mg/kg、30 mg/kg、45 mg/kg)，每組6只，SPF環(huán)境下飼養(yǎng)。造模：模型組及藥物干預(yù)組小鼠每天自由飲用質(zhì)量濃度為30 g/L的DSS溶液，空白組小鼠每天予正常飲水。藥物干預(yù)：空白組正常飲水同時(shí)予質(zhì)量濃度為9 g/L的生理鹽水，腹腔注射7 d；模型組造模同時(shí)予含質(zhì)量濃度為9 g/L生理鹽水，腹腔注射7 d；藥物干預(yù)組造模同時(shí)分別予虎杖苷 15 mg/kg、30 mg/kg、45 mg/kg,腹腔注射7 d。

1.3疾病活動(dòng)度評(píng)分每天記錄每組小鼠體質(zhì)量、大便性狀及便血情況，計(jì)算疾病活動(dòng)指數(shù)(disease activity index，DAI)評(píng)分(見表1)。……