上海地區兒童腎功能生化項目參考區間的建立

陳時維， 葉志成， 付 盼， 李 巍， 楊 丹， 徐 錦

（復旦大學附屬兒科醫院臨床檢驗中心，上海 201102）

檢驗項目參考區間是疾病診斷、檢驗結果分析與解釋的重要依據。因此，實驗室為臨床提供一個準確、可靠的參考區間極為重要[1]。目前，臨床實驗室中大多數檢驗項目的參考區間引用自行業指南、儀器試劑說明書或國內成人標準，這些參考區間大多不分年齡、性別，且較少針對兒童群體。由于兒童和成人在免疫狀態、生長發育水平等方面均有差異，因此成人參考區間無法適用于兒童。兒童各項指標的參考區間亟待建立并規范，以利于兒童疾病的有效診治。為此，本研究按照美國臨床實驗室標準化協會（the Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）及國際臨床化學和檢驗醫學聯合會（the International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine，IFCC）聯合發布的C28-A3文件標準[2]，建立上海地區兒童腎功能項目[尿素、肌酐（creatinine，Cr）、尿酸（uric acid，UA）、總蛋白（total protein，TP）、白蛋白（albumin，Alb）]的參考區間，填補本地區兒童腎功能項目參考區間的空白。

1 材料和方法

1.1 研究對象

選取2015年7月—2017年5月復旦大學附屬兒科醫院特需門診體檢中心進行健康體檢的兒童。排除標準：（1）正在治療性服藥；（2）近1個月內有發熱、感染、創傷的情況；（3）近6個月內有住院史，近4個月內有輸血史；（4）兒童常規體檢的各項身體指標及體重指數不在參考區間內。入組兒童進一步進行血常規、尿常規和糞常規檢測，結果均正常。共納入滿足上述條件的兒童1 038名，其中男543名（52.31%）、女495名（47.69%），年齡3～17歲。按年齡分為3組：3～6歲組（345名，其中男147名、女198名）、7～12歲組（434名，其中男267名、女167名）、13～17歲組（259名，其中男129名、女130名）。本研究經復旦大學附屬兒科醫院倫理委員會批準，由接診醫生當面告知兒童家長本研究的相關情況并簽署知情同意書。

1.2 儀器與試劑

采用日立7180全自動生化分析儀（日本日立公司）及配套試劑、校準品檢測尿素（尿素酶紫外波長測定法）、Cr（酶法）、UA（尿酸酶-過氧化物酶法）、TP（雙縮脲比色法）、Alb（溴甲酚綠法）。質控品（2015年批號為M401011、M401012、M401013，2016年批號為M407081、M407082、M407083，2017年批號為M507471、M507472、M507473）由美國Beckman-Coulter公司提供。

1.3 方法

采集所有研究對象安靜狀態下的坐姿空腹12 h靜脈血3 mL，2 h內以2 200×g離心5 min分離血清，4 h 內完成檢測。所有樣本均無溶血、黃疸和脂血。嚴格按標準操作規程進行操作，在質控在控的情況下進行樣本檢測。每年進行1次儀器校準，試劑更換批號或儀器校準后進行留樣復查及質控品檢測。

1.4 統計學方法

采用SPSS 20.0軟件和Excel 2007軟件進行統計分析。離群值的判斷方法參照CLSI C28-A3文件[2]，將各項目的數據按男、女升序排列，檢測數據中若有疑似離群值，則將疑似離群值與相鄰值的差值（D）和數據全距（R）相除，若D/R≥1/3則為離群值，應剔除。采用 K-S檢驗進行正態性檢驗。呈正態分布的數據以s表示，多組間比較采用單因素ANOVA分析，兩兩比較采用q檢驗。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 不同年齡組之間腎功能項目的比較

不同年齡組之間除血清尿素差異無統計學意義（P＞0.05）外，血清Cr、UA、TP、Alb水平差異均有統計學意義（P＜0.05），且隨年齡的增長，血清Cr、UA、TP、Alb水平呈上升趨勢。見表1。

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表1 不同年齡組尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

注：與7～12歲比較，*P＜0.05；與13～17歲比較，#P＜0.05

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2.2 不同性別之間腎功能項目的比較

在3～6歲組中，男、女童之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平差異均無統計學意義（P＞0.05）；在 7～12歲組中，男、女童之間血清UA、Cr水平差異有統計學意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無統計學意義（P＞0.05）；在13～17歲組中，男、女童之間血清Cr、UA水平差異均有統計學意義（P＜0.05），而血清尿素、TP、Alb水平差異均無統計學意義（P＞0.05）。見表2～表4。

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表2 3～6歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表3 7～12歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

表4 13～17歲兒童不同性別之間尿素、Cr、UA、TP、Alb水平的比較

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2.3 上海地區兒童腎功能項目參考區間的建立

表5 不同年齡兒童Cr、UA、TP、Alb的參考區間

3 討論

參考區間在臨床疾病的診斷中起重要的指導作用，判斷檢測指標的測定結果有無臨床意義通常是基于其與參考區間的比較。兒童作為一個特殊的群體，由于其生理特性使得某些檢測項目的測定結果與成人相差較大，導致成人的參考區間在兒童群體中應用有一定的局限性，而目前國內尚未建立一套針對兒童檢驗項目的參考區間，因此實驗室為臨床提供正確、適用的兒童參考區間顯得極為重要。近年來，國內學者對此作了一些研究[3-4]，并建立了某些項目的參考區間，但大樣本、多項目的系統研究仍然是空白。為此，本研究建立了上海地區健康兒童腎功能多種生化指標的參考區間。

將本研究結果與國內同類研究[5-6]進行比較，5項參考區間的結果并不完全一致，特別是血清UA和Cr水平在7～12歲組和13～17歲組中呈現出明顯的性別差異。導致參考區間出現差異的原因可能是：（1）儀器檢測方法或原理不同；（2）研究對象年齡、地域不同。目前，我國尚未發布全國性的兒童檢驗項目的參考區間，因此臨床實驗室有必要建立本地區的兒童檢驗項目參考區間。進行標準化設計的大樣本參考區間調查是建立參考區間的理想方法[5]，但由于需要大量的人力、物力而不易開展，而利用已有的實驗室信息系統數據庫建立參考區間是值得探索的替代方法[7]。本研究利用實驗室信息系統數據庫導出2015年7月—2017年5月篩查組合結果，根據篩選標準得到1 038名健康兒童作為本研究的入組人群。因1 038名兒童在需要區分性別和年齡的情況下樣本還不夠大，所以本研究還存在一定的局限性，需在以后的研究工作中進一步細化和完善。