LOX- 1和Vaspin在冠心病患者體內(nèi)的表達(dá)及其與PCI術(shù)后再狹窄的關(guān)系

閆杰，刁增利，葛慶鋒，黃宇玲，李燕

(華北理工大學(xué)附屬醫(yī)院 心內(nèi)科,河北 唐山 063000)

冠心病是一種因冠脈血管出現(xiàn)粥樣硬化造成血管管腔阻塞、狹窄的疾病，是目前許多國家患者致死病因之一，患者最終因心肌缺血或供氧不足而死亡[1]。多數(shù)研究發(fā)現(xiàn),開通閉塞血管植入支架可以有效增加冠狀動脈有效官腔直徑，達(dá)到血運(yùn)重建[2- 3]。但經(jīng)皮冠狀動脈介入(percutaneous coronary intervention, PCI)治療存在著術(shù)后再狹窄的風(fēng)險(xiǎn)。有關(guān)再狹窄的監(jiān)測、預(yù)防及治療成為目前臨床上心血管研究領(lǐng)域所面臨的巨大挑戰(zhàn)。血凝素氧化低密度脂蛋白受體- 1(LOX- 1)可與病原體或凋亡細(xì)胞的膜糖蛋白、磷脂、脂質(zhì)顆粒等多種配體結(jié)合，被譽(yù)為清道夫受體。研究[4]發(fā)現(xiàn)，LOX- 1體內(nèi)高表達(dá)與冠狀動脈慢血流存在正相關(guān)。據(jù)報(bào)道[5]，內(nèi)臟脂肪特異性絲氨酸蛋白酶抑制劑(visceral adipose tissue- derived serine protease inhibitor，Vaspin)體內(nèi)分泌、表達(dá)水平受機(jī)體狀態(tài)的影響，與心血管疾病、2型糖尿病、肥胖等疾病存在相關(guān)性。為進(jìn)一步深入研究PCI術(shù)后再狹窄發(fā)病機(jī)制，為PCI術(shù)后再狹窄的早期診斷提供有效依據(jù)，本研究對體內(nèi)LOX- 1和Vaspin表達(dá)水平與PCI術(shù)后再狹窄的關(guān)系進(jìn)行探討，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性分析2013年10月至2016年7月在我院首次行PCI術(shù)185例患者的臨床資料，其中男125例，女60例，年齡29～78歲，平均(60.35±10.04)歲。對入選者進(jìn)行定期隨訪并再次行冠狀動脈造影檢查。再狹窄組患者入選標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)與靶血管相關(guān)的心源性死亡、心絞痛發(fā)作、心肌梗死、血運(yùn)重建或出現(xiàn)血管支架兩端5 mm支架段管腔直徑狹窄度超過50%。最終入選再狹窄組患者56例。其余129例PCI術(shù)后未發(fā)生再狹窄患者入選非再狹窄組。

1.2 研究方法

1.2.1 治療方法 所有患者行PCI術(shù)前規(guī)范給予氯吡格雷、阿司匹林等常規(guī)治療，術(shù)中統(tǒng)一采用樂普藥物涂層支架[Partner，316L不銹鋼，樂普(北京)醫(yī)療器械股份公司]，口服75 mg氯吡格雷(生產(chǎn)廠家：法國賽諾菲- -安萬特，規(guī)格75 mg·片-1)抗凝治療8 d，且術(shù)后1個月內(nèi)每天給予10 mg瑞舒伐他汀鈣片(魯南貝特制藥有限公司，規(guī)格5 mg·片-1)頓服。

1.2.2 冠狀動脈造影術(shù)[6]采用1%利多卡因注射液對患者進(jìn)行局部麻醉后，于右側(cè)橈動脈或股動脈進(jìn)行穿刺，將造影管送至左、右冠狀動脈，經(jīng)過多方位投照確定病變血管位置，最終將導(dǎo)引導(dǎo)管以及導(dǎo)引導(dǎo)絲送至冠狀動脈口以及病變血管遠(yuǎn)端。

1.2.3 各危險(xiǎn)因素定義[7](1)高血脂：服用降血脂藥物者；血清總膽固醇(TC)≥5.20 mmol·L-1；低密度脂蛋白膽固醇(LDL- C)≥3.12 mmol·L-1；高密度脂蛋白膽固醇(HDL- C)<1.03 mmol·L-1；(2)高血壓：服用降壓藥物者；連續(xù)兩次靜息狀態(tài)下舒張壓≥90 mmHg或(和)收縮壓≥140 mmHg；(3)糖尿病：確診并服用降糖藥物者；空腹血糖≥7.0 mmol·L-1；餐后2 h血糖≥11.1 mmol·L-1；(4)吸煙：入院前半年內(nèi)每天吸煙1支以上；(5)體質(zhì)指數(shù)(BMI)：BMI≥28 kg·m-2為肥胖，24 kg·m-2≤BMI<28 kg·m-2為超重，18.5 kg·m-2≤BMI<24 kg·m-2為正常，BMI<18.5 kg·m-2為偏低。

1.2.4 冠狀動脈狹窄嚴(yán)重程度評價(jià) 采用Gensini積分[8]進(jìn)行冠狀動脈狹窄嚴(yán)重程度評價(jià)。將病變血管分為右冠狀動脈、回旋支、左前降支和左主干；對血管狹窄程度進(jìn)行定量評定：狹窄100%計(jì)32分，91%～99%計(jì)16分，76%～90%計(jì)8分，51%～75%計(jì)4分，26%～50%計(jì)2分，不高于25%計(jì)1分；不同節(jié)段積分乘以相應(yīng)系數(shù)：左主干病變×5，左前降支近段×2.5、中段×1.5、遠(yuǎn)段×1，第一對角支×1，第二對角支×0.5，回旋支近段×2.5、遠(yuǎn)段×1，后側(cè)支×0.5，右冠狀動脈近中、遠(yuǎn)段均×1。最終積分為各支血管積分之和。

1.2.5 血清LOX- 1和Vaspin水平檢測 于術(shù)后1 d采集患者空腹肘靜脈血5 ml，采用酶聯(lián)免疫吸附法測定血清LOX- 1和Vaspin水平，嚴(yán)格按照試劑盒說明書測定步驟執(zhí)行。首先將標(biāo)準(zhǔn)品100 μl加入標(biāo)準(zhǔn)品孔中，按照稀釋系數(shù)為0.5依次稀釋10個孔。空白孔中不加任何樣品液，將50 μl樣品待測液加入樣品孔。于37 ℃孵育30 min，用預(yù)先配好的洗滌液清洗5次，每次30 s，晾干。將50 μl酶標(biāo)試劑加入各樣品孔，空白孔中不加酶標(biāo)試劑，繼續(xù)孵育、洗滌。將50 μl顯色劑A與顯色劑B孔分別加入各孔顯色，37 ℃下避光顯色15 min后用終止液50 μl終止反應(yīng)。在450 nm掃描波長下，以空白孔數(shù)值作為調(diào)零參照在酶標(biāo)儀上讀取數(shù)據(jù)。以標(biāo)準(zhǔn)品吸收值對應(yīng)其濃度繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，將待測物質(zhì)吸收值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算其實(shí)際濃度。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS 19.0軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，計(jì)量資料采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，兩組間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料采用例數(shù)(構(gòu)成比)表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)。多因素Logistic回歸分析PCI術(shù)后再狹窄的影響因素。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 兩組一般資料比較

與非狹窄組比較，再狹窄病組中高LDL- C、低HDL- C以及有吸煙史的比例升高，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05)。兩組在性別、高血壓、肥胖、糖尿病等方面的比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P>0.05)，見表1。

表1兩組一般資料比較

組 別n年齡/歲男性/例高血壓/例肥胖/例高LDL-C/例低HDL-C/例糖尿病/例吸煙史/例非再狹窄組12960.35±10.4393(72.09)87(67.44)28(21.71)8(6.20)9(6.98)36(27.91)33(25.58)再狹窄組5659.35±9.8535(62.50)35(62.50)8(14.29)11(19.64)16(28.57)12(21.43)29(51.79)χ2/t值0.6091.6860.4251.3727.65515.5810.85312.034P值0.5430.6940.5150.2420.0060.0000.3560.000

注：括號內(nèi)為百分率

2.2 各組間LOX- 1和Vaspin檢測結(jié)果比較

對比兩組中LOX- 1和Vaspin水平后發(fā)現(xiàn)，再狹窄組LOX- 1水平明顯高于非狹窄組，Vaspin水平卻明顯低于非狹窄組，且組間差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(均P<0.05),見表2。

表2兩組間LOX-1和Vaspin檢測結(jié)果比較μg·L-1

2.3 LOX- 1和Vaspin水平與Gensini積分相關(guān)性分析

對比再狹窄組不同Gensini積分患者體內(nèi)LOX- 1和Vaspin水平后發(fā)現(xiàn)，Gensini積分越高，體內(nèi)LOX- 1水平越高，Vaspin水平越低，組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),見表3。

此外，將再狹窄組中患者LOX- 1和Vaspin指標(biāo)水平與Gensini積分采用Spearman相關(guān)分析研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)LOX- 1水平與Gensini積分呈正相關(guān)(r=0.316，P=0.003)，Vaspin水平與Gensini積分呈負(fù)相關(guān)(r=-0.284，P=0.007)。

2.4 PCI術(shù)后再狹窄多因素Logistic回歸分析

以高LDL- C、低HDL- C、有吸煙史、LOX- 1以及Vaspin水平等單因素分析中有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的參數(shù)為自變量，以有無發(fā)生再狹窄為因變量(發(fā)生再狹窄記為1，未發(fā)生再狹窄記為0)，采用非條件多因素Logistic回歸分析，校正混雜因素后，結(jié)果顯示LOX- 1(OR=1.876，95%CI 1.452～2.345)、Vaspin(OR=1.755，95%CI 1.430～2.486)均為PCI術(shù)后再狹窄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(表4)。

表3LOX-1和Vaspin水平與Gensini積分相關(guān)性分析

組 別n積分LOX-1/μg·L-1Vaspin/μg·L-1高積分組18≥611.54±2.330.54±0.11中積分組274～58.79±2.110.75±0.23低積分組11≤36.59±1.871.25±0.38t1,24.1094.094P1,20.0000.000t1,35.9506.044P1,30.0000.000T3,23.0064.071P3,20.0050.001

注：t1,2、P1,2為高積分組與中積分組比較值；t1,3、P1,3為高積分組與低積分組比較值；t3,2、P3,2為低積分組與中積分組比較值。

表4PCI術(shù)后再狹窄的影響因素分析

因素OR95%CIP值LOX-11.8761.452～2.345<0.001Vaspin1.7551.430～2.486<0.001高LDL-C3.0051.478～9.5590.073低HDL-C3.3781.045～8.9810.059吸煙史4.2391.460～10.3290.068

3 討 論

冠心病是目前臨床上發(fā)病率以及病死率非常高的一類疾病，預(yù)后較差[9]。該病主要是由于冠狀動脈血管出現(xiàn)粥樣硬化導(dǎo)致管腔狹窄或阻塞，最終導(dǎo)致心肌缺血及供氧不足，甚至死亡。PCI術(shù)是目前臨床上公認(rèn)的冠心病治療的有效手段，但其術(shù)后再狹窄率較高，嚴(yán)重影響手術(shù)治療效果。盡管新型抗凝藥物以及藥物涂層支架的應(yīng)用能降低再狹窄發(fā)生率，但目前國內(nèi)外仍存在5%～15%的再狹窄率[10]。因此PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生機(jī)制與早期診斷及預(yù)防成為目前臨床上研究熱點(diǎn)。有研究表明，個人基因調(diào)控是導(dǎo)致PCI術(shù)后再狹窄發(fā)生的重要因素[11]，但在臨床實(shí)踐中，高危人群可操作性較差。本研究探討了高血壓、肥胖、高LDL- C、低HDL- C、糖尿病以及吸煙史與PCI術(shù)后冠狀動脈再狹窄嚴(yán)重程度的關(guān)系。結(jié)果顯示，再狹窄組中高LDL- C、低HDL- C以及有吸煙史比例明顯高于非狹窄組。

目前大多數(shù)報(bào)道[12]認(rèn)為PCI術(shù)后再狹窄是局部血管損傷后的一種修復(fù)過程，主要包括血小板沉積、炎癥反應(yīng)、血管彈性回縮、基質(zhì)沉積、血管平滑肌細(xì)胞凋亡減少或增殖過度等。LOX- 1水平與動脈粥樣硬化發(fā)病機(jī)制相關(guān)，高表達(dá)的LOX- 1與配體結(jié)合后激活NF- κB通路，同時介導(dǎo)AMP- AMPK/PKC/NADPH通路調(diào)節(jié)活性氧的釋放，進(jìn)而調(diào)節(jié)參與動脈粥樣硬化的基因的表達(dá)。Akhmedov等[13]研究發(fā)現(xiàn)，LOX- 1水平上調(diào)是心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加的危險(xiǎn)因素之一，且在PCI術(shù)后第2天至術(shù)后24周內(nèi)均處于較高水平，暗示LOX- 1可能參與PCI術(shù)后再狹窄過程。本次研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，LOX- 1水平在再狹窄組中明顯高于非狹窄組，且組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，驗(yàn)證了LOX- 1參與PCI術(shù)后再狹窄過程的假設(shè)。此外，經(jīng)Logistic回歸分析后發(fā)現(xiàn)，體內(nèi)LOX- 1水平是PCI術(shù)后再狹窄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素，提示高表達(dá)的LOX- 1可作為PCI術(shù)后再狹窄的早期預(yù)測指標(biāo)。有學(xué)者[14]開展了有關(guān)冠心病患者冠狀動脈前降支中段和近段損傷程度與LOX- 1水平相關(guān)性研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)體內(nèi)LOX- 1表達(dá)水平高的患者其冠狀動脈前降支中段和近段損傷程度更為嚴(yán)重，LOX- 1水平作為預(yù)測冠狀動脈前降支中段和近段損傷的敏感性達(dá)53.8%，特異性達(dá)95.2%。

Vaspin為一種新型脂肪因子，在脂蛋白生理代謝調(diào)節(jié)、胰島素敏感度調(diào)節(jié)以及炎癥反應(yīng)等過程中發(fā)揮明顯調(diào)控作用[15]。近年來研究[16]發(fā)現(xiàn)，Vaspin體內(nèi)表達(dá)水平與冠狀動脈血管病變支數(shù)、動脈粥樣硬化等呈負(fù)相關(guān)。本研究結(jié)果顯示，再狹窄組Vaspin水平明顯低于非狹窄組，且Vaspin水平與Gensini積分呈負(fù)相關(guān)，經(jīng)Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，體內(nèi)Vaspin水平是PCI術(shù)后再狹窄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素(P<0.05)。提示低表達(dá)的Vaspin更易出現(xiàn)PCI術(shù)后再狹窄，Vaspin濃度檢測在PCI術(shù)后再狹窄預(yù)測中具有評估價(jià)值。由于Vaspin濃度與C反應(yīng)蛋白、腫瘤壞死因子- α呈負(fù)相關(guān)，通過調(diào)節(jié)巨噬細(xì)胞、動脈平滑肌細(xì)胞以及血管內(nèi)皮細(xì)胞的生理過程來影響血管壁的平衡穩(wěn)態(tài)[17]，因此，Vaspin水平的下調(diào)易引發(fā)PCI術(shù)后再狹窄。

綜上所述，高表達(dá)LOX- 1與低表達(dá)Vaspin是PCI術(shù)后再狹窄的獨(dú)立危險(xiǎn)因素。