食管鱗癌中DNA結(jié)合/分化抑制蛋白-1和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子-D表達(dá)及意義

祁艷娟 秦愛(ài)萍 龍啟福 陳 凡 馬建青 周 毛 常巧梅

(青海大學(xué)附屬醫(yī)院腫瘤放療科，青海 西寧 810001)

食管鱗癌主要見(jiàn)于中老年人。上皮細(xì)胞在腫瘤性因素刺激下癌變后形成浸潤(rùn)性癌，進(jìn)展時(shí)常伴有淋巴結(jié)播散〔1〕。腫瘤在進(jìn)展時(shí)間質(zhì)可以伴有淋巴管新生后并形成有功能的淋巴管，這被認(rèn)為是與腫瘤細(xì)胞最近的淋巴管，且易于被腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)時(shí)侵襲。與淋巴管生成最重要的因子是血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)-D，其與受體(VEGFR)3結(jié)合后使淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞增殖，為轉(zhuǎn)移提供重要的管腔結(jié)構(gòu)〔2,3〕，DNA結(jié)合/分化抑制蛋白(ID)-1是重要影響因素之一。ID-1與腫瘤細(xì)胞的增殖和轉(zhuǎn)移有關(guān)〔4〕。本文關(guān)注食管鱗癌中ID-1和VEGF-D的表達(dá)，分析其相關(guān)性。

1 資料與方法

1.1一般資料 收集2016年10月至2017年12月青海大學(xué)附屬醫(yī)院住院治療、經(jīng)病理學(xué)確診、行手術(shù)根治的食管鱗癌患者87例為觀(guān)察組，納入標(biāo)準(zhǔn)：①臨床資料完整；②符合WHO中的診斷標(biāo)準(zhǔn)；③患者或家屬簽署知情同意書(shū)。排除標(biāo)準(zhǔn)：①伴有其他器官惡性腫瘤；②有先天性疾病或遺傳性疾病；③有消化道手術(shù)史；④術(shù)前放、化療。其中男45例，女42例，年齡55～86歲，平均63.8歲。食管切緣(距腫物邊緣>2 cm)的黏膜組織23例為對(duì)照組。其中男12例，女11例，年齡57～83歲，平均61.4歲。兩組性別構(gòu)成和年齡差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.2ID-1和VEGF-D表達(dá) ID-1和VEGF-D檢測(cè)均基于術(shù)后石蠟切片，應(yīng)用免疫組化二步法完成，ID-1和VEGF-D試劑均購(gòu)自北京博奧森生物技術(shù)有限公司。實(shí)驗(yàn)中ID-1濃度為1∶100，VEGF-D濃度為1∶300。操作中切片均有陽(yáng)性質(zhì)控，嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)進(jìn)行。

1.3ID-1和VEGF-D結(jié)果的判讀 ID-1和VEGF-D以細(xì)胞質(zhì)中染成棕黃色為陽(yáng)性。按著色強(qiáng)度和著色百分率的乘積進(jìn)行評(píng)分。著色強(qiáng)度：無(wú)著色0分；弱著色1分，中等程度著色2分，強(qiáng)著色3分。著色百分率：選擇4個(gè)高倍視野，以<5%為0分，5%～10%為1分，以11%～30%為2分，以31%～50%為3分，以>50%為4分。最終以≤3分為陰性，以>3分為陽(yáng)性。

1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行χ2檢驗(yàn)、線(xiàn)性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1兩組ID-1和VEGF-D的比較 兩組ID-1和VEGF-D陽(yáng)性差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。見(jiàn)表1。

表1 兩組ID-1和VEGF-D陽(yáng)性表達(dá)的比較〔n(%)〕

2.2ID-1和VEGF-D在觀(guān)察組不同臨床特征中表達(dá)差異 觀(guān)察組中ID-1和VEGF-D表達(dá)與脈管累犯和淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移相關(guān)，ID-1表達(dá)與腫瘤的增殖指數(shù)和分化程度相關(guān)。二者與炎細(xì)胞浸潤(rùn)無(wú)相關(guān)性。見(jiàn)表2。

表2 ID-1和VEGF-D在觀(guān)察組不同臨床特征中陽(yáng)性表達(dá)〔n(%)〕

2.3觀(guān)察組中ID-1和VEGF-D表達(dá)的相關(guān)性 ID-1和VEGF-D呈正相關(guān)(r=0.46，P=0.030)。

3 討 論

食管癌起源于黏膜的鱗狀上皮，與形成上皮的干細(xì)胞有一定關(guān)系，出現(xiàn)異型增生、癌變，進(jìn)展時(shí)表現(xiàn)出腫瘤細(xì)胞對(duì)間質(zhì)的侵襲作用，并對(duì)轉(zhuǎn)移起促進(jìn)作用。腫瘤在進(jìn)展過(guò)程中，可以伴有淋巴道播散，也是上皮源性腫瘤重要的轉(zhuǎn)移途徑〔5,6〕。間質(zhì)中的脈管結(jié)構(gòu)對(duì)轉(zhuǎn)移起重要的輔助作用。其中間質(zhì)的小淋巴管是最易受侵襲的。研究認(rèn)為在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中，新生腫瘤組織的間質(zhì)可以有淋巴管的新生，這種淋巴管為腫瘤轉(zhuǎn)移提供了最便捷的通路〔7,8〕。引起淋巴管增殖的有淋巴管生成因子，其中VEGF-D是主要因子，其在腫瘤進(jìn)展過(guò)程中由腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生，并可以激活其受體，與受體結(jié)合后促進(jìn)淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞的增殖，形成枝芽狀的生長(zhǎng)，在淋巴液的沖擊作用下形成管腔，形成具有特異性結(jié)構(gòu)和功能的淋巴管〔9,10〕。腫瘤細(xì)胞可以通過(guò)此途徑發(fā)生淋巴管轉(zhuǎn)移。調(diào)節(jié)淋巴管生成因子的因素較多，其中ID-1可能是重要的調(diào)控因子。ID-1是螺旋-環(huán)-螺旋(HLH)轉(zhuǎn)錄因子的主要成員，具有癌基因的特征〔11〕。研究顯示ID-1陽(yáng)性表達(dá)的腫瘤細(xì)胞具有細(xì)胞小、細(xì)胞核小、核染色深等特征，認(rèn)為其具有干細(xì)胞的“永生化”的特征和功能〔12〕。ID-1表達(dá)升高時(shí)，可以阻止細(xì)胞的分化，使其處于原始狀態(tài)，并具有異源性生長(zhǎng)的特征，此種腫瘤細(xì)胞表現(xiàn)為高增殖和高遷移狀態(tài)。腫瘤中ID-1過(guò)度表達(dá)的細(xì)胞能使其老化時(shí)間增強(qiáng)，與抑制凋亡的作用相似，使腫瘤細(xì)胞持續(xù)對(duì)機(jī)體進(jìn)行破壞和侵襲〔13〕。ID-1的作用也可能具有多樣性，如對(duì)脈管生成的調(diào)控作用等〔14〕。

本研究結(jié)果顯示ID-1和VEGF-D高表達(dá)是促進(jìn)腫瘤形成的重要因素，也是引起腫瘤細(xì)胞異型的重要蛋白因素，二者是促癌生成的基因。ID-1和VEGF-D是腫瘤細(xì)胞播散的重要因素。ID-1具有引起腫瘤失控性增生的特征，并抑制細(xì)胞由幼稚分化為成熟的細(xì)胞〔15〕。本文結(jié)果提示ID-1和VEGF-D與腫瘤細(xì)胞進(jìn)展時(shí)的間質(zhì)反應(yīng)無(wú)關(guān)。ID-1 表達(dá)升高時(shí)可以調(diào)節(jié)鱗狀細(xì)胞分化，這是腫瘤細(xì)胞內(nèi)在調(diào)節(jié)過(guò)程，使腫瘤細(xì)胞停滯于增殖的不同時(shí)期，也使腫瘤停滯在不同原始階段，此時(shí)細(xì)胞異型程度明顯，與起源組織的差別小，形成接近幼稚的干細(xì)胞形態(tài)，具有明顯增殖活性。本文提示ID-1和VEGF-D呈正相關(guān)，ID-1高表達(dá)是促進(jìn)淋巴管生成因子形成的因素之一〔16〕，ID-1可能是上游基因，調(diào)節(jié)VEGF-D、表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)和磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)等信號(hào)通路，引起細(xì)胞增殖和遷移〔17〕。但I(xiàn)D-1/VEGF-D/VEGFR-3是否作為淋巴管生成直接通路有待證實(shí)。