實(shí)驗(yàn)性家兔股動(dòng)脈切開(kāi)置球囊管與股動(dòng)脈穿刺置球囊管成功率對(duì)比分析

張海峰　李巧汶　華光耀

【摘要】 目的：探討股動(dòng)脈切開(kāi)與股動(dòng)脈穿刺置球囊管成功率。方法：選取健康雄性新西蘭兔

20只，隨機(jī)平均分為股動(dòng)脈切開(kāi)組與股動(dòng)脈穿刺組，各10例。股動(dòng)脈切開(kāi)組采取股動(dòng)脈切開(kāi)探查后直視下置入球囊制作腹主動(dòng)脈球囊損傷模型，股動(dòng)脈穿刺組采取股動(dòng)脈穿刺置入球囊制作腹主動(dòng)脈球囊損傷模型。比較兩組球囊損傷成功率、死亡率、造模時(shí)間、術(shù)后進(jìn)食及內(nèi)膜增生情況。結(jié)果：股動(dòng)脈切開(kāi)組造模時(shí)間長(zhǎng)于股動(dòng)脈穿刺組（P<0.05）；兩組進(jìn)食時(shí)間、成功率、死亡率、新生內(nèi)膜厚度、血管平均狹窄程度、平滑肌細(xì)胞層厚度比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），其中股動(dòng)脈切開(kāi)組成功率達(dá)100%，股動(dòng)脈穿刺組成功率90.0%。結(jié)論：本研究?jī)煞N方法均有穩(wěn)定可靠、方法簡(jiǎn)單、易于復(fù)制、花費(fèi)時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，可以模擬臨床中的相關(guān)問(wèn)題，是PCI術(shù)后再狹窄研究中較理想的動(dòng)物模型。

【關(guān)鍵詞】 實(shí)驗(yàn)性家兔； 股動(dòng)脈切開(kāi)置球囊管； 股動(dòng)脈穿刺置球囊管； 成功率

Comparative Analysis of the Success Rate of Rabbit Femoral Artery Incision with Balloon Catheter and Femoral Artery Puncture with Balloon Catheter/ZHANG Haifeng，LI Qiaowen，HUA Guangyao.//Medical Innovation of China，2018，15（19）：00-004

【Abstract】 Objective：To investigate the success rate of femoral artery incision and femoral artery puncture with balloon catheter.Method：The 20 healthy male New Zealand rabbits were selected，randomly divided into femoral artery incision group and femoral artery puncture group，10 cases in each group.The femoral artery incision group was performed open femoral artery exploration，and then the balloon injury model was established under direct vision.The femoral artery puncture group was implanted into the balloon by femoral artery puncture to make the abdominal aortic balloon injury model.The success rate，mortality，modeling time，postoperative feeding and intimal hyperplasia between two groups were compared.Result：The modeling time in femoral artery incision group was longer than that of femoral artery puncture group（P<0.05）.The eating time，success rate，mortality rate，neointimal thickness，mean vessel stenosis and smooth muscle cell layer thickness in two groups were compared，the difference was not statistically significant（P>0.05），and the success rate of femoral artery incision group was 100%，femoral artery puncture group was 90.0%.Conclusion：The two methods in this study have the advantages of stability，reliability，simple method，easy replication，and short duration of time，can simulate the relevant problems in the clinic and are ideal animal models for restenosis after PCI.

【Key words】 Experimental rabbit； Femoral artery incision with balloon catheter； Femoral artery puncture with balloon catheter； Success rate

First-authors address：Qingyuan Peoples Hospital，Qingyuan 511518，China

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2018.19.001

動(dòng)脈粥樣硬化（Atherosclerosis，AS）表現(xiàn)為內(nèi)膜增厚，該病主要累及的大中型動(dòng)脈，可出現(xiàn)泡沫細(xì)胞，不斷加重的情況下可形成動(dòng)脈粥樣斑塊。隨著斑塊累及血管壁，不斷增多突入動(dòng)脈管腔，可堵塞血管，形成繼發(fā)動(dòng)脈粥樣血栓等嚴(yán)重臨床事件[1-3]，因此需要尋找一種快速的、操作簡(jiǎn)單的、容易掌握的AS動(dòng)物模型制作方法[4]。而股動(dòng)脈切開(kāi)置球囊管因需要切開(kāi)縫合，而存在一定的感染率與死亡率。為此，筆者在既往球囊損傷模型的基礎(chǔ)上，不斷優(yōu)化設(shè)計(jì)[5]，為今后研究AS的相關(guān)發(fā)病與治療機(jī)制提供依據(jù)。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 動(dòng)物 本研究采用的模型動(dòng)物為雄性新西蘭大耳白兔20只，3月齡，體重2.0～2.5 kg，每只單籠飼養(yǎng)，南方醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供[合格證號(hào)：SCXK（粵）2016-0041]；將其隨機(jī)平均分為股動(dòng)脈切開(kāi)組與股動(dòng)脈穿刺組，各10只。

1.2 方法 （1）股動(dòng)脈切開(kāi)組采取股動(dòng)脈切開(kāi)探查后直視下置入球囊制作腹主動(dòng)脈球囊損傷模型：兔耳緣3%苯戊巴比妥靜脈注射，根據(jù)稱(chēng)重后計(jì)算使用量，作全身麻醉1 mL/kg，仰位固定在兔臺(tái)上，剪去右股動(dòng)脈體毛，鋪無(wú)菌洞巾，皮膚碘伏消毒，沿股動(dòng)脈切開(kāi)皮膚。充分游離出股動(dòng)脈股靜脈和股神經(jīng)，后暴露股動(dòng)脈，在股動(dòng)脈近端置無(wú)損傷止血夾，使球囊位于腹主動(dòng)脈上段。球囊直徑與血管吻合之后，抽回球囊導(dǎo)管。拔出鞘管，退出導(dǎo)絲、球囊，壓迫血管，縫合手術(shù)切口，血管包扎采用明膠海綿。（2）股動(dòng)脈穿刺組采取在不切開(kāi)的情況下股動(dòng)脈穿刺置入球囊制作腹主動(dòng)脈球囊損傷模型：麻醉方式、固定方式、消毒方式同股動(dòng)脈切開(kāi)組，術(shù)者用左手食指、中指觸及股動(dòng)脈搏動(dòng)最明顯處，橈動(dòng)脈穿刺針行股動(dòng)脈穿刺術(shù)，其余操作同股動(dòng)脈切開(kāi)組。

1.3 觀察指標(biāo) 統(tǒng)計(jì)造模時(shí)間及術(shù)后進(jìn)食情況；術(shù)后喂養(yǎng)4周，比較兩組球囊損傷成功率及死亡率；術(shù)后喂養(yǎng)6周，觀察兩組內(nèi)膜增生情況，包括血管平均狹窄程度、新生內(nèi)膜層和中部平滑肌細(xì)胞層的平均厚度。制備動(dòng)物標(biāo)本，截取球囊損傷處血管組織，采取HE染色，測(cè)量新生內(nèi)膜層、血管狹窄程度、部平滑肌細(xì)胞層厚度，計(jì)算3個(gè)視野值取平均。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 使用SPSS 19.0軟件對(duì)所得數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料用（x±s）表示，組間比較采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較采用字2檢驗(yàn)或Fisher精確檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組家兔造模一般情況比較 股動(dòng)脈切開(kāi)組造模時(shí)間長(zhǎng)于股動(dòng)脈穿刺組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩組進(jìn)食時(shí)間、成功率、死亡率比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表1。

2.2 兩組內(nèi)膜增生情況比較 兩組新生內(nèi)膜厚度、血管平均狹窄程度、平滑肌細(xì)胞層厚度比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），見(jiàn)表2。兩組HE染色下內(nèi)膜增生情況見(jiàn)圖1、2。

3 討論

研究PCI術(shù)后再狹窄常用動(dòng)物模型目前主要采取的是新西蘭大耳白兔，根據(jù)損傷的部位進(jìn)行造模[6-10]，不同選擇有其特點(diǎn)，骼動(dòng)脈、股動(dòng)脈在損傷后造成血管閉塞的過(guò)程需要結(jié)扎動(dòng)脈遠(yuǎn)端，管腔通暢可能有所差別，血管重塑過(guò)程有個(gè)體差異；而經(jīng)股動(dòng)脈行頸動(dòng)脈損傷模型操作難度較大，需要考慮的因素較多，導(dǎo)絲送至心臟之間出現(xiàn)異常，但是卻毫無(wú)察覺(jué)，但目前相關(guān)報(bào)道中，股動(dòng)脈損傷造模運(yùn)用的較多[7]。且造模的整個(gè)過(guò)程中聯(lián)合高脂飼料喂養(yǎng)是再狹窄動(dòng)物模型制作方法的經(jīng)典操作[11-15]。但上述模型因需要切開(kāi)縫合，因此存在一定的感染率與死亡率，筆者在既往球囊損傷模型的基礎(chǔ)上，進(jìn)行優(yōu)化設(shè)計(jì)，采用股動(dòng)脈閉合穿刺的方法，以期縮短造模操作時(shí)間，降低造模感染率與死亡率，結(jié)果顯示，股動(dòng)脈切開(kāi)組造模時(shí)間長(zhǎng)于股動(dòng)脈穿刺組，比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；兩組進(jìn)食時(shí)間、成功率、死亡率、新生內(nèi)膜厚度、血管平均狹窄程度、平滑肌細(xì)胞層厚度比較，差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。表明采用股動(dòng)脈穿刺亦能夠快速成功建立腹主動(dòng)脈球囊損傷模型。

本研究制作血管再狹窄兔動(dòng)物模型經(jīng)驗(yàn)總結(jié)如下。（1）首先麻醉方法采用苯戊巴比妥，速度不宜過(guò)快，應(yīng)當(dāng)逐漸給藥，動(dòng)物角膜反射消失后即停止給藥，本研究未出現(xiàn)動(dòng)物在麻醉過(guò)量中死亡[16]。（2）模型制作中的關(guān)鍵：順利將球囊導(dǎo)入腹主動(dòng)脈，此時(shí)最容易出現(xiàn)的問(wèn)題是導(dǎo)絲穿透血管造成血管破裂，導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)失敗或動(dòng)物死亡，操作中注意保持導(dǎo)絲清潔及球囊濕潤(rùn)維持負(fù)壓，在無(wú)阻力下緩慢送入導(dǎo)絲，預(yù)埋結(jié)扎線，以減少血管夾上方的出血情況，若出現(xiàn)股動(dòng)脈破裂及時(shí)結(jié)扎縫線，需要采取血管夾配合止血[17]。（3）術(shù)后給予適量補(bǔ)液：造模成功之后給予常規(guī)補(bǔ)液，補(bǔ)液后可有效降低造模病死率[18]。（4）無(wú)須采用特殊導(dǎo)管：在操作過(guò)程中本研究試圖尋找一些合適的鞘管介入，比如嘗試過(guò)采用selding法分離血管，但操作難度增加，穿刺后出血量較大，污染操作視野，反而增加手術(shù)難度和風(fēng)險(xiǎn)，分離后血管纖細(xì)無(wú)支撐送鞘管，發(fā)生血管斷裂可能性增加[19]。（5）本研究采用PCI完全分離股動(dòng)脈，采用的軟導(dǎo)絲約15 cm，球囊管末端放置支撐，在股動(dòng)脈近端采取止血夾無(wú)損傷止血，在無(wú)齒鑷輔助下切開(kāi)股動(dòng)脈血管，再松血管夾立即送入球囊，充氣制作模型。（6）經(jīng)皮穿刺使用的鞘管費(fèi)用高，股動(dòng)脈容易應(yīng)激、痙攣，股動(dòng)脈相對(duì)細(xì)小且位于股靜脈和和股神經(jīng)后，經(jīng)皮穿難度大，易傷靜脈出血。

（7）游離股動(dòng)脈后，動(dòng)脈無(wú)支撐易滑動(dòng)，穿刺成功后置鞘管過(guò)程，鞘管粗大易撕裂動(dòng)脈，出血多，與鞘管和導(dǎo)管放置等操作則更方便[20]。（8）股動(dòng)脈穿刺處近、遠(yuǎn)端給予結(jié)扎后，所有的造模兔仍能良好存活，由于豐富的側(cè)支循環(huán)，因此并未影響其功能的恢復(fù)。

綜上所述，本研究所采取的兩種造模方法均有方法簡(jiǎn)單、穩(wěn)定可靠、花費(fèi)少易于復(fù)制、時(shí)間短等優(yōu)點(diǎn)，可以模擬臨床中的相關(guān)問(wèn)題，是PCI術(shù)后再狹窄研究中較理想的動(dòng)物模型。

參考文獻(xiàn)

[1] Hu C H，Ke X，Chen K，et al.Transplantation of human umbilical cord-derived endothelial progenitor cells promotes re-endothelialization of the injured carotid artery after balloon injury in New Zealand white rabbits[J].Chin Med J（Engl），2013，126（8）：1480-1485.