D7-CRP型全自動血細胞分析儀臨床性能評價

陳 娟 吳志成* 楊恒歌 賴小婷

在臨床中C反應蛋白(C-reactive protein，CRP)與白細胞聯合檢測應用廣泛，但同時檢測血常規及全血CRP的一體機目前較為少見[1]。D7-CRP型全自動血細胞分析儀能夠進行全血細胞計數、白細胞5分類和CRP測定。該儀器采用庫爾特原理檢測紅細胞(red blood cell，RBC)、血小板(platelet，PLT)的數目和體積分布，采用半導體激光流式技術測量白細胞總數(white blood cell，WBC)并對其進行分類。采用免疫散射比濁法進行CRP檢測，并根據樣本中血細胞壓積結果對CRP結果進行修正。該儀器有多種進樣方式，既可以自動也可以手動，既可以采用靜脈血也可以用末梢血進行測量，血量少時還可以用微量稀釋再測定，適合于那些很難采到血液樣本的患者，且操作維護簡單。根據“全國臨床檢驗操作規程”和實驗室對血細胞分析儀的基本要求，本研究對D7-CRP型全自動血細胞分析儀主要性能進行評價，并與日本XN-9000型全自動血細胞分析儀進行比對實驗，檢驗其是否符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)以及實驗室高效檢驗的要求。

1 材料與方法

1.1 實驗樣本

選取北京大學深圳醫院門診檢驗科2017年10月至2018年1月就診的47例門診患者的47份血樣標本，采集其含乙二胺四乙酸抗凝血1.5～2.0 ml備用，所有樣本均在4 h內檢測完畢。

1.2 儀器與試劑

(1)D7-CRP全自動血細胞分析儀(深圳帝邁公司)及其原裝配套試劑：①LYA-1。批號為20170619，效期為20190618；②LYA-2。批號為20170624，效期為20190623；③LYA-3。批號為20170615，效期為20190614；④DIL-A。批號為20171017，效期為20191016；⑤CRP-R1。批號為20180801，效期為20190731；⑥CRP-R2。批號為20180801，效期為20190731。

(2)XN-9000全自動血細胞分析儀(日本Sysmex公司)及原裝配套試劑、質控品及校準品。

(3)血球及CRP質控品：①血球。批號為E5125-02，效期為2018-1-10；②CRP。批號為463LPC，效期為2018-6-28，Randox提供。

(4)校準品。批號為PLUS1117，效期為2017-12-5。

(5)線性評價物。批號為CL123，效期為2017-11-25，美國R&D Systems提供，均在有效期內使用。

1.3 檢測方法

根據國家衛生行業標準(WS/T406-2012)“臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求”進行操作，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀的WBC、RBC、血紅蛋白(hemoglobin，HGB)、紅細胞平均體積(mean corpuscular volume，MCV)、PLT的本底計數、攜帶污染率、批內/日間精密度、線性、正確度、不同吸樣模式的結果可比性、實驗室內的結果可比性和準確度以及CRP的本底計數、攜帶污染率、精密度等方面進行評價。所有操作均嚴格按照“全國臨床檢驗操作規程”[2]的要求，判斷標準參考國家衛生行業標準(WS/T406-2012)[3]。

1.4 檢測與評價指標

(1)空白計數。用稀釋液作為樣本在分析儀上連續檢測3次，3次檢測結果的最大值應在允許范圍內。

(2)攜帶污染率[4]。分別針對不同檢測項目，取一份高濃度的臨床樣本(EDTA-K2或EDTA-K3抗凝靜脈血)，混合均勻后連續測定3次，測定值分別為H1、H2及H3；再取一份低濃度的臨床樣本，混合均勻后連續測定3次，測定值分別為L1、L2及L3。其攜帶污染率計算為公式1：

(3)高值樣本要求。①WBC＞90.0×109/L；②RBC＞6.20×1012/L；③HGB＞220 g/L；④PLT＞900×109/L。

(4)低值樣本要求。0＜WBC＜3.0×109/L，0＜RBC＜1.50×1012/L，0＜HGB＜50 g/L，0＜PLT＜30×109/L。

(5)精密度。①批內精密度：取1份濃度水平在[WBC：(4.0～10.0)×109/L、RBC：(3.5～5.5)×1012/L、HGB：(110～160)g/L、HCT：(35～55)%、MCV：(80～100)fl、MCH：(27～34)pg、MCHC：(320～360)g/L、PLT：(100～300)×109/L]的臨床樣本，按常規方法重復檢測11次，計算后10次檢測結果和算術平均值和標準差，計算變異系數；②日間精密度：取同批號高、中、低3個水平的質控品，連續檢測20 d，每份標本在檢測當日至少進行1次室內質控，剔除失控數據(失控結果已得到糾正)逐項計算20 d內檢測結果的變異系數。

(6)線性。分別使用濃縮及稀釋的方法獲得接近檢測上限(廠商制定)的高值樣本，及略高于檢出限的低值樣本，根據臨床常見值確定線性驗證的濃度系列，配制不同濃度的樣本，每份樣本重復檢測3次，計算平均值，將實測值(Y)與理論值(X)作比較，計算Y=aX+b，驗證線性范圍應符合美國實驗室標準化委員會(The Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI)的EP6文件要求[5]：a值在1.00±0.05范圍內，相關系數≥0.975。

(7)正確度。選擇10份檢測結果在參考區間內的健康體檢者的新鮮血樣本，每份樣本檢測2次，以實驗室內部規范操作檢測系統(XN-9000儀器檢測系統)為評價標準，分別計算D7-CRP型全自動血細胞分析儀和XN-9000型全自動血細胞分析儀2種儀器所有檢測結果的均值，以XN-9000型全自動血細胞分析儀的檢測均值為標準，計算偏倚。

(8)不同吸樣模式的結果可比性[6]。每次校準后，取5份臨床樣本分別使用不同模式進行檢測，每份樣本各檢測2次，以開放模式為標準，分別計算不同模式下檢測結果均值間的相對差異[7]。

(9)實驗室內的結果可比性。選取20份臨床新鮮全血樣本，分別在D7-CRP型和XN-9000型全自動血細胞分析儀進行檢測。XN-9000型全自動血細胞分析儀已校準，并參加國家臨床檢驗中心室間質量控制，所有室間質量控制結果均在控，評價方案和標準參照原衛生部2012版“臨床血液學檢驗常規項目分析質量要求”和CLSI批準的EP9-A2文件[8]計算D7-CRP型與XN-9000型全自動血細胞分析儀之間的相對偏差。要求20份標本中16份滿足此標準為比對合格[9]。具體要求：①WBC偏差≤±7.5%(當WBC＜2×109/L時，其偏差≤±10.0%)；②RBC偏差≤±3.0%；③HGB偏差≤±3.5%；④HCT偏差≤±3.5%；⑤MCV偏差≤±3.5%；⑥PLT偏差≤±12.5%(當PLT＜40×109/L時，其偏差≤±10.5%)。

(10)準確度。取5份定值臨床樣本分別進行單次檢測，定值臨床樣本由XN-9000型全自動血細胞分析儀上檢測所得。XN-9000型全自動血細胞分析儀已校準，并參加國家臨床檢驗中心室間質量控制，所有室間質量控制結果均在控。計算每份樣本檢測結果與靶值的相對偏差，每個檢測項目的相對偏差符合下述要求的比例應≥80%，相對偏差=(檢測結果-靶值)÷靶值×100%。

1.5 統計學方法

檢測所得數據均使用Microsoft Excel軟件進行統計學分析，線性范圍評價試驗的相關性采用線性回歸分析。

2 結果

2.1 本底計數檢測

對D7-CRP型全自動血細胞分析儀使用稀釋液作為樣本連續檢測3次，WBC、RBC、HGB及PLT本底結果滿足國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求；CRP的本底結果均為0.0 mg/L，滿足企業要求，見表1。

2.2 攜帶污染率檢測

按檢測方法要求，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀分別使用滿足要求的樣本測試，WBC、RBC及PLT計數及HGB的攜帶污染率分別為0.03%、0.26%、0.11%和0.0%，滿足國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求；CRP攜帶污染率滿足企業要求，見表2。

表1 本底計數評價試驗結果

2.3 精密度檢測

2.3.1 批內精密度

按檢測方法要求，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀使用符合要求的樣本測試，其結果見表3。其中，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的批內精密度分別為1.65%、0.54%、0.51%、0.53%、0.17%、0.37%、0.42%以及1.96%，符合國家衛生行業標準(WS/T 406-2012)的要求；CRP批內精密度滿足企業要求。

表2 攜帶污染率評價試驗結果

表3 批內精密度正常水平評價試驗結果

2.3.2 日間精密度

按前述檢測方法試驗，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀使用質控物連續20 d后，統計WBC、RBC、PLT、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的低、中、高水平質控物的日間精密度，均符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求；CRP日間精密度滿足企業要求，見表4。

2.4 線性檢測

按照線性檢測方法，D7-CRP型全自動血細胞分析儀WBC的線性范圍為0.00～356.46×109/L、RBC的線性范圍為0.00～9.02×1012/L、HGB的線性范圍為0～263 g/L、HCT的線性范圍為0.0～91.3%、PLT的線性范圍為0～6166×109/L，均能滿足廠商的要求，相關系數r均≥0.975，符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求，見表5。

2.5 正確度檢測

按正確度檢測方法測試，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀驗證檢測系統的正確度，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC及PLT的偏倚分別為-0.66%、-1.61%、0.00%、-1.75%、-0.18%、1.66%、1.80%、0.08%，均符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求，見表6。

表4 日間精密度評價試驗結果

表5 線性評價試驗結果

表6 正確度評價試驗結果

表7 不同吸樣模式結果可比性評價試驗結果

表8 實驗室內結果可比性試驗評價結果

2.6 不同吸樣模式結果可比性

按不同吸樣模式檢測方法試驗，對D7-CRP型全自動血細胞分析儀以開放模式為標準，與自動進樣模式結果比對，WBC、RBC、HGB、HCT、MCV以及PLT的偏差均符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求，見表7。

2.7 實驗室內結果可比性

按實驗室內檢測方法試驗，D7-CRP型全自動血細胞分析儀的WBC、RBC、PLT計數，HGB、HCT、MCV、MCH及MCHC的實驗室內的結果可比性均符合國家衛生行業標準(WS/T 406-2012)的要求，見表8。

2.8 準確度檢測

按照準確度檢測方法試驗，D7-CRP型全自動血細胞分析儀的WBC、RBC、PLT計數，HGB、HCT、MCV、MCH及MCHC的準確度均符合國家衛生行業標準(WS/T406-2012)的要求，見表9。

3 討論

由于科學技術的進步，臨床檢驗設備越來越先進，隨著技術的不斷引進與吸收消化，國產大型醫療儀器設備的設計與制造日漸走向成熟，相信在不久的將來國產大型醫療設備一定會在世界上占有一席之地[10]。

表9 準確度試驗評價結果

本研究通過對D7-CRP型全自動血細胞分析儀主要性能評價發現，該儀器全血細胞計數與CRP檢測各參數空白試驗良好，極低的攜帶污染率完全符合設計需求，精密度均小于規定的質量評價標準允許誤差。精密度試驗表明儀器有較高重復性，能滿足臨床應用的要求，通過與參加全省實驗室室間質評的國外同類儀器比較均在行業標準范圍內，表明D7-CRP型全自動血細胞分析儀具有良好的準確性和可靠性[11]。

D7-CRP型全自動血細胞分析儀的主要性能達到國家衛生行業標準(WS/T406-2012)規定的要求，能滿足血細胞檢測的一般需要。儀器總體設計合理、操作簡單，具有高度自動化和智能化，有較強的質量控制功能，并有故障自檢功能，故障時可提示故障類型和相應自動處理措施，有較完善的保養功能，進樣針和管道系統可自動沖洗，對檢驗結果的質量保障起了重要的作用[12-13]。

D7-CRP型全自動血細胞分析儀帶有20 μl微量血液預稀釋模式功能，可以滿足幼兒及其他特殊人群血常規檢查需求，是一款性能優良的國產全自動血細胞分析儀，可滿足臨床實驗室的需要。