尿液培養常見病原菌的分布及耐藥分析

劉澤雨，楊永長

(1.四川省金堂縣婦幼保健院檢驗科，四川 成都 610499；2.四川省醫學科學院·四川省人民醫院檢驗科，四川 成都 610072)

尿路感染是指病原體侵犯尿路黏膜或組織引起的尿路炎癥[1]，細菌、念珠菌、支原體、衣原體等均可引起尿路感染，以細菌感染居多，是各年齡階段和不同性別最常見的社區和院內獲得性感染[2～4]。由于臨床治療措施的增多，尿路感染概率增加，抗菌藥物的廣泛應用，造成病原菌耐藥率較高，給治療帶來難度。研究尿液培養細菌和念珠菌的分布和抗菌藥物敏感性可為臨床治療提供重要依據，為此，本文對2016年1～12月門診和住院患者尿液培養結果進行了詳細分析，現報道如下。

1 材料和方法

1.1標本來源2016年1月1日至12月31日四川省人民醫院住院及門診患者送檢的清潔中段尿、導尿于2小時內送檢。

1.2培養及鑒定按《全國臨床檢驗操作規程》第4版標準操作，用一次性無菌接種環分別取10微升尿液標本接種于血平板、麥康凱平板、沙保羅平板(SDA)、沙保氏平板(含氯霉素)(SGC)上，同時用尿沉渣涂片染色觀察白細胞、細菌、念珠菌情況。SGC為法國梅里埃生產，其它均為鄭州安圖生產。細菌培養35度5%～10%CO2環境培養18～48小時，念珠菌SDA37度、SGC28度環境培養1～7天[5]，采用法國梅里埃ViTEK-2、ATB-Expression鑒定儀及配套試劑進行鑒定及藥敏分析，部分念珠菌用安圖顯色平板作鑒定。

1.3藥敏試驗藥敏試驗方法和結果判讀參照CLSI2016標準，藥敏質控使用大腸埃希菌ATCC25922，銅綠假單胞菌ATCC27853，肺炎克雷伯菌ATCC700603，糞腸球菌ATCC29212、白念珠菌ATCC90028標準菌株，均來自美國菌種保藏中心。

1.4統計學方法采用Excel進行數據統計處理。

2 結果

2.1尿液培養陽性檢出情況2016年培養出細菌和念珠菌共1317株，其中細菌928株(70.46%)，以革蘭陰性桿菌和革蘭陽性球菌為主；念珠菌389株(29.54%)，見表1。

表1 患者尿液分離細菌和念珠菌種類

2.2尿液培養陽性患者的科室分布尿液培養陽性患者主要來自老年重癥、神內、門急診，見表2。

2.3尿液培養陽性結果的性別分布男、女患者尿液培養結果以革蘭陰性桿菌為主，其次是念珠菌，見表3。

2.4不同性別患者尿液培養的主要細菌分布男、女患者分離的細菌均以大腸埃希菌為主，其次是屎腸球菌，見表4。

2.5不同性別患者尿液培養的主要念珠菌分布男性患者分離的念珠菌以熱帶念珠菌為主，女性患者以光滑念珠菌為主，見表5。

2.6尿液培養菌株的藥物敏感性分析

2.6.1尿液培養腸球菌屬的抗菌藥物敏感性分析

腸球菌屬對利奈唑胺、萬古霉素和替加環素的敏感率>95%。屎腸球菌對青霉素類、喹諾酮類的耐藥率>90%，糞腸球菌對青霉素類、呋喃妥因的敏感率>95%，見表6。

表2 患者尿液標本培養主要細菌和念珠菌的主要科室分布(株)

表3 尿液培養陽性結果的性別分布

表4 不同性別患者尿液培養的主要細菌分布

表5 不同性別患者尿液培養的主要念珠菌分布

2.6.2尿液培養革蘭陰性桿菌的抗菌藥物敏感性分析 大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌對頭霉素類、碳青酶烯類、阿米卡星的敏感率>90%，對青霉素類、三代頭孢菌素類(除頭孢他啶)、喹諾酮類、復方新諾明、四環素耐藥；奇異變形桿菌對多數抗菌藥物敏感；銅綠假單胞菌對阿米卡星、多粘菌素B、妥布霉素、四代頭孢敏感性高，見表7。

2.6.3尿液培養念珠菌藥敏分析 不同念珠菌對5-氟胞嘧啶、兩性霉素B、伏立康唑的敏感性高，見表8。

表6 尿液培養腸球菌屬的抗菌藥物敏感性分析

表7 尿液培養革蘭陰性桿菌的抗菌藥物敏感性分析

表8 尿液培養念珠菌的抗菌藥物敏感性分析(%)

2.7尿液分離培養的耐藥菌分布產超廣譜β內酰胺酶(ESBLs)：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌屬、奇異變形桿菌檢出率分別為57.2%(194/339)、50.6%(42/83)、29.2%(7/24)，腸桿菌科細菌總檢出率為54.5%(243/446)；產碳青酶烯酶類(CRE)：大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌屬檢出率分別為0.29%(1/339)、9.64%(8/83)；高水平氨基糖苷類耐藥腸球菌(HLAR)：屎腸球菌、糞腸球菌檢出率分別為87.4%(83/95)、41.2%(21/51)，耐萬古霉素腸球菌(VRE)：屎腸球菌檢出率為3.2%(3/95)。

3 討論

影響尿液培養結果的因素很多，陽性結果除按一般標準判斷外，還需結合尿常規的白細胞、亞硝酸鹽結果及尿沉渣的涂片染色情況以及臨床病史綜合判斷。

本文尿液培養陽性標本主要來源于老年重癥、神內、門急診，92.4%為清潔中段尿，7.6%來源于導尿。陽性菌株以革蘭陰性桿菌、念珠菌、腸球菌為主，與國內報道較一致[6，7]。大腸埃希菌分離率26.7%(351/1317)居首位，以門急診為最高，革蘭陰性桿菌前三位為大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌，與國內報道較一致[2，8]，男女前兩位細菌均為大腸埃希菌、屎腸球菌，與林濤報道一致[7]，國內部分報道腸球菌以糞腸球菌為主[1，6]，存在地區差別。女性大腸埃希菌檢出率高于男性一倍。念珠菌男性以熱帶念珠菌為主，女性以光滑念珠菌為主，其次均為白念珠菌。產脲酶棒桿菌以男性為主，因能分解尿素產氨，易造成尿路結石，應分離鑒定，乳桿菌引起女性尿路感染，男、女在革蘭陽性桿菌、念珠菌主要分離種類上均存在不同。

由于抗菌藥物的廣泛使用，病原菌的耐藥及多重耐藥逐漸增多，腸桿菌科細菌ESBLs檢出率54.5%，對青霉素類、三代頭孢菌素類(除頭孢他啶)耐藥較高。奇異變形桿菌對多數抗生素敏感，但對四環素類、替加環素、呋喃妥因、多粘菌素B天然耐藥。銅綠假單胞菌耐藥嚴重，但對阿米卡星、多粘菌素B高敏感。腸桿菌科細菌對復方新諾明的耐藥率達到50%，該藥為銅綠假單胞菌的天然耐藥，且對腸球菌屬無效；腸桿菌科細菌、屎腸球菌對喹諾酮類耐藥率分別達到50%、90%以上；大腸埃希菌、糞腸球菌對呋喃妥因敏感性高，但肺炎克雷伯菌對該藥耐藥，奇異變形桿菌、粘質沙雷菌對其天然耐藥。這些抗生素副作用較大，且耐藥率較高，已不適宜作為泌尿系統感染治療的首選用藥。腸桿菌科細菌、銅綠假單胞菌對阿米卡星敏感，但其對腎臟的毒性較大，應慎用。屎腸球菌對青霉素類、喹諾酮類的耐藥率>90%，糞腸球菌對青霉素類的敏感率>95%，與鄧燕燕等的報道有一定差異[1]，屎腸球菌對奎奴普丁/達福普汀高敏感，但糞腸球菌對其天然耐藥，屎腸球菌耐藥性及多重耐藥檢出較糞腸球菌高。VRE對萬古霉素的耐藥性多數是由于耐藥基因所介導，多見于屎腸球菌，應關注其耐藥變化。念珠菌對常用抗真菌藥物敏感性高，以5-氟胞嘧啶、兩性霉素B最敏感，敏感率>95%，與林濤報道的一致[7]，白念珠菌對幾種抗菌藥物最敏感，光滑念珠菌、熱帶念珠菌對氟康唑有一定的耐藥性，且氟康唑對克柔念珠菌天然耐藥。

尿路感染多重耐藥檢出率高，應加強腸桿菌科細菌CRE以及腸球菌屬VRE的監測及預防，結合本醫院或本地區的細菌、念珠菌分布及耐藥性特點，合理選用抗菌藥物，降低耐藥性的產生，積極采取院感控制措施，防控多重耐藥菌在醫院的擴散。