博落回提取物對(duì)商品豬場(chǎng)細(xì)菌抗藥性的影響

駱延波 商延 胡明 趙敏 楊勝福 李璐璐 齊靜 張印 張慶 劉玉慶

摘要：為了解博落回提取物（含血根堿1.50%，白屈菜紅堿0.75%）對(duì)仔豬細(xì)菌抗藥性的影響，本試驗(yàn)通過(guò)在30日齡仔豬的飲水中分別添加博落回提取物和阿莫西林，并用96點(diǎn)陣二倍稀釋法測(cè)定9種常用抗生素對(duì)大腸桿菌和金黃色葡萄球菌的最小抑菌濃度（MIC），評(píng)價(jià)其防止仔豬腹瀉、促進(jìn)仔豬生長(zhǎng)以及對(duì)細(xì)菌抗藥性的影響。結(jié)果表明，添加博落回提取物的試驗(yàn)組對(duì)細(xì)菌抗藥性以及仔豬腹瀉率、成活率、出欄重等生產(chǎn)性能指標(biāo)的影響與添加阿莫西林的對(duì)照組之間差異不顯著，基于上述結(jié)果，博落回提取物可替代阿莫西林用于預(yù)防仔豬腹瀉，提高仔豬成活率和促生長(zhǎng)。

關(guān)鍵詞：博落回提取物；阿莫西林；干預(yù)；細(xì)菌抗藥性；仔豬

中圖分類(lèi)號(hào)：S853.7文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)號(hào)：A文章編號(hào)：1001-4942（2018）07-0020-07

Abstract In order to investigate the effects of extracts of Macleaya cordata （containing 1.5% sanguinarine and 0.75% chelerythrine） on bacterial resistance， the experiment was carried out by adding the extracts and amoxicillin into drinking water of 30-day-old piglets repectively. The MIC values of nine common antibiotics to Escherichia coli and Staphylococcus aureus were determined by 96 dot matrix double dilution method to evaluate their effects on the prevention of diarrhea， growth promotion and the level of resistance of bacteria. The results showed that the inhibitory effect of extracts of Macleaya cordata on the drug resistance of bacteria was very small. There was no significant difference between the experimental group and the control group in the diarrhea rate， survival rate and slaughter weight. Based on the above results， the extracts of Macleaya cordata can replace amoxicillin for the prevention of piglet diarrhea and improve the survival rate and growth of piglets.

Keywords Extract of Macleaya cordata； Amoxicillin； Intervention； Bacterial resistance； Piglet

隨著抗生素的廣泛大量使用導(dǎo)致嚴(yán)重的多重抗藥性和藥物殘留，全球范圍內(nèi)抗生素的從嚴(yán)處方化管理和抗藥性監(jiān)測(cè)漸成常規(guī)[1，2]。另一方面，由于安全有效的新抗生素研發(fā)越來(lái)越困難，抗生素成為全球共有的稀缺珍貴資源，尋找新抑菌物質(zhì)和抗生素替代品也成為抗感染的趨勢(shì)。中國(guó)有中藥資源優(yōu)勢(shì)和使用經(jīng)驗(yàn)，在此方面取得了突出成就[3-5]。博落回 （Macleaya cordata）系罌粟科博落回屬大型草本植物，具有抑菌、殺蟲(chóng)、抗腫瘤等多種生物活性，臨床上主要用于治療指疔、膿腫及一些惡瘡和皮膚病等[6]。博落回果實(shí)及全草中含有豐富的異喹啉類(lèi)生物堿，主要有血根堿（sanguinarine）、白屈菜紅堿（chelerythrine）、原阿片堿（protopine）、別隱品堿（allocryptopine）等[7，8]。博落回全堿有局部麻醉作用，大劑量口服對(duì)心臟及神經(jīng)系統(tǒng)有毒害作用[9]，但提純的Sangrovit（博落回制劑），主要含1.50%血根堿與 0.75%白屈菜紅堿，安全性大大提高，100～600 mg/kg對(duì)豬、雞服用都是安全的，其在歐洲已經(jīng)廣泛用于替代抗生素作為藥物添加劑[10，11]。血根堿與白屈菜紅堿可以相互轉(zhuǎn)化，血根堿能抑制細(xì)菌色氨酸脫羧酶活性，阻止色氨酸脫羧產(chǎn)生吲哚及吲哚類(lèi)糞臭素，促使色氨酸用于蛋白質(zhì)合成，具有抑菌、消炎、除臭、促生長(zhǎng)的作用[10]。

阿莫西林為半合成青霉素類(lèi)廣譜β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素，在酸性條件下穩(wěn)定，胃腸道吸收率達(dá)90%。阿莫西林殺菌作用強(qiáng)，穿透細(xì)胞膜的能力也強(qiáng)，是目前獸醫(yī)臨床上使用較廣的抗生素，且多使用阿莫西林可溶性粉，本試驗(yàn)即以其為對(duì)照采用微量肉湯稀釋法和瓊脂平板法，參照美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)協(xié)會(huì)（CLSI）藥敏標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)方法，研究血根堿對(duì)干預(yù)后仔豬腸道菌群抗藥性的影響，以期為博落回提取物代替抗生素用作飼料添加劑的可行性提供參考依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)動(dòng)物

30日齡大長(zhǎng)白三元雜交商品仔豬450頭。

1.2 試驗(yàn)藥物與培養(yǎng)基

博落回提取物血根堿（批號(hào)20160204，含量92%），阿莫西林可溶性粉（批號(hào)20160501，規(guī)格10%）。藥物有多西環(huán)素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨芐西林、左旋氧氟沙星和環(huán)丙沙星。培養(yǎng)基有大腸桿菌顯色培養(yǎng)基、沙門(mén)氏菌顯色培養(yǎng)基、高鹽培養(yǎng)基。

1.3 試驗(yàn)時(shí)間與地點(diǎn)

2016年8月1日至9月2日于山東省諸城市某家庭農(nóng)場(chǎng)內(nèi)進(jìn)行試驗(yàn)。

1.4 試驗(yàn)方法

將試驗(yàn)仔豬分為2組， 150頭作為試驗(yàn)組，飲水中添加血根堿；300頭作為對(duì)照組，飲水中添加阿莫西林。在試驗(yàn)前和試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，分別采集各組仔豬新鮮糞便，分離鑒定大腸桿菌和金黃色葡萄球菌，測(cè)定9種抗生素（多環(huán)西素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨芐西林、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星）的最小抑菌濃度（MIC），對(duì)比細(xì)菌抗藥性的變化情況。

試驗(yàn)過(guò)程中記錄試驗(yàn)組和對(duì)照組豬死亡只數(shù)、腹瀉只數(shù)，試驗(yàn)結(jié)束時(shí)分別統(tǒng)計(jì)兩組的豬死亡只數(shù)、腹瀉只數(shù)和只出欄體重（kg），計(jì)算腹瀉率（%）、成活率（%）和平均出欄重（kg）。

1.5 數(shù)據(jù)處理

采用Microsoft Excel 2007和SPSS 18.0軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)整理分析與差異顯著性檢驗(yàn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 分離鑒定細(xì)菌

試驗(yàn)開(kāi)始前，從試驗(yàn)組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌12株；對(duì)照組分離到大腸桿菌40株，金黃色葡萄球菌18株。試驗(yàn)結(jié)束時(shí)，從試驗(yàn)組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌12株；對(duì)照組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌18株。

2.2 細(xì)菌抗藥性檢測(cè)結(jié)果

從圖1可以看出，干預(yù)前后試驗(yàn)組大腸桿菌對(duì)多西環(huán)素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、環(huán)丙沙星抗藥性水平基本上沒(méi)有變化，而對(duì)頭孢曲松、頭孢噻肟、慶大霉素、氨芐西林、左旋氧氟沙星的抗藥性水平下降，但差異不顯著（P>0.05）。

從圖2可以看出，干預(yù)前后對(duì)照組大腸桿菌對(duì)多西環(huán)素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨芐西林、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星抗藥性水平基本上沒(méi)變化，而對(duì)慶大霉素的抗藥性水平下降，但差異不顯著（P>0.05）。

從圖3可以看出，干預(yù)前后試驗(yàn)組金黃色葡萄球菌對(duì)多西環(huán)素、丁胺卡那霉素、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨芐西林、左旋氧氟沙星抗藥性水平均未有明顯變化，而對(duì)氟苯尼考、環(huán)丙沙星的抗藥性水平略有下降，但差異不顯著（P>0.05）。

從圖4可以看出，干預(yù)前后對(duì)照組金黃色葡萄球菌對(duì)多西環(huán)素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星抗藥性水平均未有明顯變化，而對(duì)氨芐西林的抗藥性水平略有下降，但差異不顯著（P>0.05）。

2.3 生產(chǎn)性能試驗(yàn)結(jié)果

從表2可以看出，試驗(yàn)組各項(xiàng)生產(chǎn)性能指標(biāo)與對(duì)照組無(wú)顯著差別，說(shuō)明博落回提取物在干預(yù)商品豬生產(chǎn)方面與阿莫西林效果相當(dāng)。

3 討論與結(jié)論

試驗(yàn)期間，大腸桿菌和金黃色葡萄球菌均對(duì)常用的9種抗生素產(chǎn)生抗藥性。試驗(yàn)組與對(duì)照組中細(xì)菌的MIC值均未發(fā)生顯著變化，與相關(guān)的研究結(jié)果一致[12，13]，這可能與干預(yù)時(shí)間較短有關(guān)。因?yàn)榧?xì)菌抗藥性發(fā)生顯著變化，需要在一定的抗生素濃度作用下經(jīng)過(guò)一定的時(shí)間才能發(fā)生[14，15]。

干預(yù)試驗(yàn)前，從試驗(yàn)組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌12株；對(duì)照組分離到大腸桿菌40株，金黃色葡萄球菌18株。干預(yù)試驗(yàn)后，從試驗(yàn)組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌12株；對(duì)照組分離到大腸桿菌38株，金黃色葡萄球菌18株。試驗(yàn)組與對(duì)照組在干預(yù)試驗(yàn)前后細(xì)菌分離情況基本一致。

根據(jù)藥敏檢測(cè)結(jié)果，多西環(huán)素、氟苯尼考、丁胺卡那霉素、慶大霉素、頭孢曲松、頭孢噻肟、氨芐西林、左旋氧氟沙星、環(huán)丙沙星9種常用抗生素對(duì)博落回提取物血根堿和阿莫西林2組分離到的大腸桿菌桿菌、金黃色葡萄球的MIC值未發(fā)生明顯變化。同時(shí)，博落回提取物血根堿與阿莫西林效果相當(dāng)，能夠提高仔豬的生產(chǎn)性能，有效減少仔豬腹瀉率，提高仔豬成活率，促進(jìn)生長(zhǎng)。這為博落回提取物代替抗生素用作飼料添加劑提供參考依據(jù)。

參 考 文 獻(xiàn)：

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