鹽酸曲馬多緩釋片的含量測(cè)定分析

河南省三門(mén)峽市食品藥品檢測(cè)中心（472000）蔡旭升

1 儀器與試藥

Alliance高效液相色譜儀（美國(guó)Waters公司生產(chǎn)），鹽酸曲馬多對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所提供），鹽酸曲馬多緩釋片（深圳南方盈信制藥有限公司，批號(hào)030201，批號(hào)030301，批號(hào)030501），超純水、色譜純、分析純，備好待用。

2 方法與結(jié)果

2.1 設(shè)置條件 取KR100 C18柱應(yīng)用，柱長(zhǎng)250mm，內(nèi)徑4.6mm，填充材料Akzonobel，直徑5μm；實(shí)驗(yàn)用流動(dòng)相：為磷酸二氫鉀與庚烷磺酸鈉混合液（磷酸二氫鉀0.68g+庚烷磺酸鈉1.02g加水500ml）-甲醇-三乙胺-三乙醇，所占比例為45∶55∶0.1，磷酸調(diào)整pH，使其為3.5；將流速調(diào)整至1.0ml/min，波長(zhǎng)271nm，柱溫25℃，進(jìn)樣量20μL。理論塔板數(shù)依據(jù)鹽酸曲馬多峰予以記算，需>1500。

附表 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.2 制備溶液 鹽酸曲馬多對(duì)照品25mg干燥至恒重狀態(tài)稱(chēng)定后，放置于25ml的實(shí)驗(yàn)用量瓶中，加入流動(dòng)相，溶解至刻度搖勻，對(duì)1mg/ml的溶液獲取，再對(duì)5ml精密量取，放置于50ml實(shí)驗(yàn)量瓶中，加入流動(dòng)相，至刻度，對(duì)0.1mg/ml的鹽酸曲馬多對(duì)照品溶液獲取；取鹽酸曲馬多緩釋片10片研成粉末狀，對(duì)約為鹽酸曲馬多50mg的量稱(chēng)取，于規(guī)格為50ml的實(shí)驗(yàn)用量瓶中放置，加入流動(dòng)相溶解。適度稀釋至刻度，充分混勻、過(guò)濾，對(duì)過(guò)濾液精密量取5ml，放置在50ml的量瓶中，取流動(dòng)相加入，稀釋至刻度，對(duì)供試品溶液獲取。

2.3 方法學(xué)分析 ①線性關(guān)系分析：于105℃下，作干燥至恒重處理的鹽酸曲馬多對(duì)照品50mg精密稱(chēng)定后，放置于100ml量瓶中加入流動(dòng)相稀釋至刻度搖勻。對(duì)上述對(duì)照品溶液分別稱(chēng)取1ml，2ml，5ml，10ml，15ml，20ml，25ml，于規(guī)格為100ml的量瓶中放置，取流動(dòng)相加入予以稀釋處理，相應(yīng)制成濃度為10μg/ml，25μg/ml，50μg/ml，100μg/ml，150μg/ml，200μg/ml，250μg/ml的溶液。分析結(jié)果示，峰面積與濃度存在良好的線性關(guān)系。得出鹽酸曲馬多以10～25μg/ml為質(zhì)量濃度線性范圍。②精密度分析：取對(duì)照品溶液100μg/ml，連續(xù)行進(jìn)樣6次操作，對(duì)平均峰面積測(cè)取，具體為685958.93，計(jì)算RSD為0.23%。③重現(xiàn)性分析：對(duì)同一批樣品精密稱(chēng)取，共6份，對(duì)供試品溶液制備，各取20μL，對(duì)峰面積測(cè)定，RSD為0.5%；④穩(wěn)定性分析：配制供試品溶液4h、8h、12h、25h后，依據(jù)色譜條件進(jìn)樣，提示25h內(nèi)，供試品溶液穩(wěn)定。⑤空白干擾試驗(yàn)：參考處方的實(shí)際比例，取與0.5片相當(dāng)?shù)妮o料量，參考含量測(cè)定方法，對(duì)溶液予以配制，取20μL在液相色譜儀有效注入，在含量測(cè)定項(xiàng)下，若鹽酸曲馬多保留時(shí)間處未出現(xiàn)吸收峰，提示空白輔助未對(duì)實(shí)驗(yàn)構(gòu)成干擾。⑥回收流試驗(yàn)：對(duì)鹽酸曲馬多對(duì)照品分別取約45mg，50mg，55mg，并依次取0.5片處方量的空白輔料加入，充分混合均勻后，于規(guī)格為50ml的實(shí)驗(yàn)用量瓶中放置，取流動(dòng)相加入，溶解，過(guò)濾，對(duì)續(xù)濾液稱(chēng)取5ml，于50ml量瓶中放置，取20μl于色譜儀注入。另對(duì)呈恒重狀態(tài)的對(duì)照品50mg稱(chēng)取，相同方法予以測(cè)定，對(duì)含量進(jìn)行計(jì)算。見(jiàn)附表。

2.4 樣品含量測(cè)定 各取供試品溶液20μl，于色譜儀注入，對(duì)鹽酸曲馬多含量計(jì)算，采用HPLC法測(cè)定，含量為98.5%。

3 討論

依據(jù)《中國(guó)藥典》（2000年版二部）中制定的關(guān)于鹽酸曲馬多原料藥標(biāo)準(zhǔn)，溶劑取流動(dòng)相乙酸與乙醇鈉緩釋液-甲醇應(yīng)用時(shí)，樣品表現(xiàn)為較差的溶解性，有較多氣泡存在，較難實(shí)現(xiàn)定容。鹽酸曲馬多色譜峰存在一定的拖尾現(xiàn)象。應(yīng)用磷酸二氫鉀與庚烷磺酸鈉混合液-三乙胺-甲醇，樣口表現(xiàn)出較好的溶解性，行振搖操作時(shí)，有少量氣泡產(chǎn)生，氣泡在5s內(nèi)呈完全消失顯示。故磷酸混合液與庚烷磺酸鈉混合液-三乙胺-甲醇（pH值3.5）可發(fā)揮作為溶劑和流動(dòng)相進(jìn)行使用的最佳效果。鹽酸曲馬多緩釋片為其常用制劑，在保持血藥濃度穩(wěn)定、延長(zhǎng)藥效時(shí)間、降低藥物不良反應(yīng)率方面價(jià)值顯著[1]。對(duì)鹽酸曲馬多緩釋片中所分布的鹽酸曲馬多含量進(jìn)行測(cè)定，可為臨床安全用藥提供保障。鹽酸曲馬多平均回歸率為99.7%，HPLC法準(zhǔn)確、簡(jiǎn)便，有較高準(zhǔn)確度。