血小板反應(yīng)蛋白-1和血小板活化因子在川崎病中的變化及意義

王楊記， 史衛(wèi)群， 王騫， 王艷， 呂進(jìn)泉

(江蘇大學(xué)附屬醫(yī)院兒科， 江蘇 鎮(zhèn)江 212001)

川崎病是一種可累及多器官和系統(tǒng)的血管炎，發(fā)病原因目前仍不明確，高發(fā)年齡為5歲以下兒童。心血管系統(tǒng)損害是川畸病的嚴(yán)重并發(fā)癥，部分可發(fā)展為心肌梗死[1]，目前已成為嬰幼兒后天性心臟病的常見原因，并有逐年上升趨勢[2]。血小板增高為川崎病的顯著特征，但目前有關(guān)血小板反應(yīng)蛋白-1(thrombospondin-1，TSP-1)、血小板活化因子(platelet activating factor，PAF)與川崎病關(guān)系的研究報(bào)道尚少，因此本文檢測了川崎病患兒血漿TSP-1、PAF的變化，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 對象與方法

1.1 一般資料

選取2014年10月至2017年4月在本院確診并進(jìn)行治療的川崎病患兒53例作為川崎病組，入組時(shí)按美國心臟協(xié)會(huì)2017年川崎病診斷標(biāo)準(zhǔn)[3]重新確認(rèn)診斷。其中男34例，女19例；年齡11月～7歲，平均2.6歲，確診時(shí)熱程4～8 d。急性期(起病1周內(nèi))血小板數(shù)量平均為402.6×109/L，恢復(fù)期(起病后5～6周)為602.6×109/L。確診后在病程第4～9天予人血丙種球蛋白1 g/(kg·d)靜脈滴注，連續(xù)使用2 d；同時(shí)口服阿司匹林。采用心臟超聲檢測患兒冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑，根據(jù)冠狀動(dòng)脈有無擴(kuò)張分成冠狀動(dòng)脈損傷組32例，非冠狀動(dòng)脈損傷組21例。冠狀動(dòng)脈損傷的診斷標(biāo)準(zhǔn)：≤5歲的嬰幼兒最大絕對管腔內(nèi)徑>3 mm及5歲以上最大絕對管腔內(nèi)徑>4 mm定義為冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張，任何節(jié)段冠狀動(dòng)脈管腔內(nèi)徑大于毗鄰節(jié)段的1.5倍定義為冠狀動(dòng)脈瘤[4]。冠狀動(dòng)脈損傷組中，29例為冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張，3例為小的冠狀動(dòng)脈瘤。選取20例健康兒童作為對照組，其中男13例，女7例, 年齡9月～8歲，平均2.4歲。川崎病組與對照組年齡及性別間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。

1.2 方法

53例川崎病患兒于急性期和恢復(fù)期抽取清晨空腹靜脈血，20例健康兒童在體檢當(dāng)天空腹抽取靜脈血。留取靜脈血3 mL，用枸櫞酸鈉抗凝，低速離心15 min，留取血漿置于-80 ℃冰箱備檢。按照ELISA試劑盒(武漢純度生物科技有限公司)說明書分別檢測TSP-1、PAF含量。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

2 結(jié)果

ELISA檢測結(jié)果經(jīng)分析顯示，川崎病患兒急性期TSP-1濃度比對照組明顯升高(P<0.05)；恢復(fù)期較急性期顯著下降(P<0.05)，與對照組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。川崎病患兒急性期PAF含量顯著高于恢復(fù)期及對照組(P均<0.05)，恢復(fù)期血漿PAF含量亦顯著高于對照組(P<0.05)。見表1。

冠狀動(dòng)脈損傷組患兒血漿TSP-1、PAF的含量見表2。無論是急性期還是恢復(fù)期，冠狀動(dòng)脈損傷組的TSP-1濃度與非損傷組間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均>0.05)。急性期冠狀動(dòng)脈損傷組PAF明顯高于非損傷組(P<0.05)；恢復(fù)期冠狀動(dòng)脈損傷組的PAF含量與非損傷組間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

組別nTSP-1(μg/L)PAF(mU/mL)急性期53186.72±76.56a,b406.20±70.27a,b恢復(fù)期53124.98±17.89262.32±65.06a對照組20112.83±17.67189.36±37.16F值24.82110.24P值<0.05<0.05

a:P<0.05，與對照組比較；b:P<0.05，與恢復(fù)期比較

組別nTSP-1(μg/L)PAF(mU/mL)急性期恢復(fù)期急性期恢復(fù)期冠狀動(dòng)脈損傷組32191.50±81.75126.35±20.47443.36±51.69273.41±64.79非冠狀動(dòng)脈損傷組21179.42±69.19122.90±13.23349.57±55.84245.43±63.27t值0.560.686.261.55P值>0.05>0.05<0.05>0.05

3 討論

川崎病的發(fā)病機(jī)制雖仍未確定，但普遍認(rèn)為是由感染導(dǎo)致免疫系統(tǒng)過度激活，引發(fā)全身炎癥反應(yīng)[5]，其中冠狀動(dòng)脈損害是影響預(yù)后的最重要因素。冠狀動(dòng)脈損害早期表現(xiàn)為冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張或冠狀動(dòng)脈瘤形成，發(fā)生率各家報(bào)道不一，從15%至65%不等，可能與種族、人群、檢測時(shí)間、檢測方法及判斷標(biāo)準(zhǔn)等的差異有關(guān)。本組資料中以超聲于急性期檢測冠狀動(dòng)脈內(nèi)徑來判斷冠狀動(dòng)脈損害，其發(fā)生率為60.4%(32/53)，均表現(xiàn)為冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張及小的冠狀動(dòng)脈瘤，并未出現(xiàn)嚴(yán)重的大冠狀動(dòng)脈瘤及冠狀動(dòng)脈血栓。川崎病的炎性病變與眾多細(xì)胞因子的參與有關(guān)，其中TSP-1及PAF是與血小板有關(guān)的兩個(gè)重要細(xì)胞因子。TSP-1是一種細(xì)胞基質(zhì)蛋白，最先在活化的血小板中被發(fā)現(xiàn)，另外內(nèi)皮細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞在炎癥反應(yīng)中亦會(huì)分泌TSP-1[6]。有研究表明，正常血管壁中TSP-1低水平表達(dá)，但在血管炎性病癥如動(dòng)脈粥樣硬化處，TSP-1水平異常升高[7]。本研究結(jié)果表明，川崎病患兒血漿TSP-1含量在急性期顯著增高，恢復(fù)期降至正常水平，提示血漿中TSP-1可能與急性期炎癥反應(yīng)有關(guān)。TSP-1增高可能是對免疫反應(yīng)和組織過度損害的代償。TSP-1可調(diào)節(jié)其他細(xì)胞因子共同參與血管炎癥反應(yīng)。有研究表明，在導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化的炎性過程中，TSP-1缺陷的小鼠通過加速斑塊成熟和壞死來增強(qiáng)炎癥反應(yīng)，表現(xiàn)為金屬基質(zhì)蛋白酶-9(MMP-9)表達(dá)上升[7]。川崎病患兒血管內(nèi)皮細(xì)胞MMP-9大量表達(dá)，增加血管彈性蛋白的分解和炎性細(xì)胞浸潤，從而促進(jìn)血管炎發(fā)生。一氧化氮在心血管生理學(xué)中起抗炎劑的作用，能抑制血小板聚集和炎性細(xì)胞黏附，TSP-1通過調(diào)控一氧化氮水平抑制心血管的炎癥反應(yīng)[6]。T細(xì)胞異常活化是川崎病免疫系統(tǒng)激活并最終導(dǎo)致以小血管炎為主的全身炎癥反應(yīng)的開始環(huán)節(jié)，TSP-1通過其受體CD47可有效抑制T細(xì)胞活化[8]。因此推測TSP-1通過抑制免疫反應(yīng)和調(diào)控淋巴細(xì)胞、MMP-9、一氧化氮等多種途徑減輕川崎病炎癥反應(yīng)。

血管內(nèi)皮功能障礙和血小板代謝異常活躍與川崎病冠狀動(dòng)脈損傷有非常緊密的聯(lián)系[9]。近年發(fā)現(xiàn)，PAF是一種具有多種生物效應(yīng)的脂類物質(zhì)，不僅是最有效的血小板聚集誘導(dǎo)劑，還是重要的炎癥因子，在血管炎癥性疾病的發(fā)病機(jī)制中起關(guān)鍵作用[10]。PAF通過與血小板表面的相應(yīng)受體結(jié)合，誘導(dǎo)血小板激活，使血小板變形、聚集和釋放炎性遞質(zhì)[11]。PAF可引起血管內(nèi)皮細(xì)胞損傷和血管的通透性增加，促進(jìn)血管炎的發(fā)生[12]，內(nèi)皮細(xì)胞損傷可促進(jìn)血小板激活，進(jìn)而引起PAF大量合成與釋放。PAF大量釋放進(jìn)一步促進(jìn)血小板聚集、釋放。血小板聚集、血管炎性反應(yīng)和血管內(nèi)皮嚴(yán)重受損可使冠狀動(dòng)脈全層受到嚴(yán)重?fù)p害，動(dòng)脈壁完整性被破壞，進(jìn)而導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈擴(kuò)張或冠狀動(dòng)脈瘤[13]。本研究結(jié)果顯示，川崎病患兒PAF含量明顯高于健康兒童，且急性期冠狀動(dòng)脈損傷組PAF含量高于非損傷組，提示PAF不僅與川崎病的病理變化有關(guān)，還與川崎病的冠狀動(dòng)脈損傷相關(guān)。

綜上所述，血漿TSP-1和PAF含量改變與川崎病急性期炎癥反應(yīng)有關(guān)，PAF可作為川崎病患兒冠狀動(dòng)脈早期損傷的一項(xiàng)預(yù)測指標(biāo)，對此尚需在臨床上通過更大樣本的分析和通過基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)研究進(jìn)一步驗(yàn)證。