乳腺癌粗針穿刺與術后活檢標本病理分級及免疫組化比較

魏穎

醫學中所指的惡性腫瘤常被人們稱之為癌癥，臨床實踐中，乳腺癌的發病率和致死率較高，是最為常見的也是對女性健康和生命威脅最大的惡性腫瘤之一[1]。最近幾年，我國女性乳腺癌患者數量極速增加，據權威機構統計，年平均增長速度高達27.6%[2]。乳腺癌有著比較明顯的特點，如病患人群一般在42周歲以上；發病初期癥狀不易被覺察，大部分病患被確診時已接近晚期；不宜采取外科手術方法治療，多采用介入手段，如放化療等[3]。臨床實踐中，化療方法能夠有效延緩病患生存時間，提升病患生存質量，是比較有效的治療手段。但是，因化療使用細胞毒藥物，會給病患帶來嚴重的副作用和并發癥，面對副作用和并發癥帶來的巨大痛苦，相當一部分病患不能堅持進行化療，延誤了治療時機[4]。這兩年隨著醫學技術逐漸發展，一些疾病的治療技術不斷在更新，乳腺癌的治療手段也在發展，乳腺粗針穿刺活檢逐漸應用于臨床乳腺癌的診斷，并且臨床數據顯示其診斷效果較好，在逐漸取代細針穿刺細胞學，優點比較明顯[5]。臨床上采取化療方法后雌激素受體（ER）、孕激素受體（PR）、人表皮生長因子受體2（HER2）狀態有誤差不宜采取。針對這種問題，本文選取2014年1月-2016年1月本院收治的未經化療的乳腺浸潤性導管癌根治術患者120例，探討乳腺癌粗針穿刺與術后活檢標本病理分級及免疫組化的差異?，F報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2014年1月-2016年1月本院收治的未經化療的乳腺浸潤性導管癌根治術患者120例，年齡29～73歲，平均（47.5±1.2）歲。納入標準：經過西醫和傳統中醫診斷，并均已通過病理切片和影像檢查手段確診；年齡≥25歲；對本文治療無相關禁忌；卡氏功能狀態評分（KPS）＞70分；預計生存期＞3個月。排除標準：心臟等臟器嚴重受損或者患有出血性相關病癥的患者；已經采取過手術和放療手段治療過的乳腺癌患者；在本研究過程中出現感染，并且沒有得到控制的患者；藥物性過敏體質的患者?；颊呔橥獗狙芯浚⒔涍^醫院倫理委員會批準。

1.2 方法

1.2.1 病理檢查和分級工作 （1）檢測方法：手術前對患者進行粗針穿刺，獲得病灶組織，將獲得的組織放入甲醛溶液中，常規石蠟包埋，制備4 μm切片，對制備好的切片進行HE染色。（2）分級：乳腺癌患者診斷分級采取WH02012乳腺癌分級標準來進行，分級主要從以下三方面進行評估：腺管形成的程度、細胞核的多形性、核分裂計數[6]。

1.2.2 免疫組織化學 （1）檢測方法：采用免疫組織化學法測定ER、PR、HER2、Ki67表達水平。取手術過程中的病灶組織，向不同組織中加入蒸餾水與濃度為30.0%的H2O2，常溫下加入內源性酶并進行10 min滅活，PBS連續進行3次洗滌。將最終獲得的切片放置在0.01 M枸櫞酸鹽緩沖液中，加入生理鹽水控制溶液pH最終為6。電爐加熱直到煮沸，間隔5 min后再次進行煮沸，常溫下冷卻，采用PBS完成2次洗滌，洗滌5 min/次，最后加入5%BSA封閉液并加入ER、PR、HER2、Ki67蛋白（稀釋濃度為1∶100）一抗一滴。滴加完畢后進行3次PBS洗滌；在1 mL底物中加入ER、PR、HER2、Ki67蛋白二抗一滴，充分混合后常溫下顯色，蘇木素復染后封片，倒置顯微鏡下觀察細胞數量，每份標本測定三次，取平均值。（2）判斷方法。參考奧爾雷德評分標準分別從細胞的陽性數量（1～4分）、染色強度（0～12分）完成免疫組化染色評分，總分16分，總分越高陽性率越高。

1.3 觀察指標及判定標準 （1）粗針穿刺標本與手術切除標本病理分級。記錄粗針穿刺標本與手術切除標本病理分級情況，分級標本參考WH02012乳腺癌分級標準進行[6]。（2）ER、PR、HER2、Ki67陽性率表達。記錄粗針穿刺標本與手術切除標本ER、PR及HER2的陽性表達率。（3）Ki67蛋白表達。記錄并統計粗針穿刺標本與手術切除標本Ki67表達情況，由于Ki67在乳腺癌組織中表達水平較低，研究中以20.0%為限進行分析，對于陽性率＞20.0%者視為異常。

1.4 統計學處理 使用SPSS 18.0軟件對所得數據進行統計分析，計數資料以率（%）表示，比較采用χ2檢驗；一致性采用Kappa檢驗，0～0.20極低的一致性、0.21～0.40一般的一致性、0.41～0.60中等的一致性、0.61～0.80高度的一致性和0.81～1.00幾乎完全一致。以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 粗針穿刺標本與手術切除標本病理分級比較 粗針穿刺標本檢測病理分級與手術切除標本比較，一致性一般，差異無統計學意義（Kappa=0.38，P=0.04）。見表 1。

表1 粗針穿刺與手術切除標本病理分級的一致性分析 例

2.2 粗針穿刺與手術切除標本ER、PR及HER2的陽性表達率比較 粗針穿刺標本ER、PR及HER2蛋白陽性率與手術切除標本比較差異均無統計學意義（P＞0.05），一致性均較高（Kappa=0.89、0.70、0.69，P=0.00、0.01、0.01）。見表 2。

表2 粗針穿刺與手術切除標本ER、PR及HER2的陽性表達情況比較 例（%）

2.3 粗針穿刺標本與手術切除標本Ki67表達分析比較 120例乳腺癌患者中88例免疫組化檢測呈陽性，陽性率為73.33%；兩種檢測方法的Ki67表達比較差異無統計學意義，一致性中等（Kappa=0.49，P=0.03）。見表 3。

表3 粗針穿刺標本與手術切除標本Ki67表達分析比較 例

3 討論

隨著醫療技術的逐漸發展，臨床上對于癌癥的治療方法不斷在更新，傳統治療癌癥方法為化療加放療或者采用手術治療方法，但這些治療手段副作用大且治療效果并不理想[8]。近幾年，輔助性全身療法逐漸應用于臨床治療癌癥。特別對于乳腺癌患者，這種方法可以大大降低乳腺癌的復發率與死亡率，臨床效果較好。一般乳腺癌患者為ER、PR均陽性患者，最佳治療方法是調節內分泌，選擇內分泌療法[9]。但是對于HER2陽性患者，內分泌療法并不適合，最佳治療方法為曲妥單抗。還有一些ER陰性及HER2陽性患者，最好是采用傳統治療方法[10]。粗針穿刺活檢臨床診斷時精度相對較高，但是該診斷方法所需時間較長、可重復性較差，并且檢查具有較高的風險性、創傷性，導致臨床診斷依從性較差[11]。

對于惡性腫瘤的治療一般是通過以下幾個方面，一是能夠有效控制腫瘤的產生和增長，進而致使癌細胞死亡[12]；二是能夠有效控制癌細胞轉移，遲滯腫瘤生成，以此實現阻礙腫瘤生成和擴散的目的；三是提高人體免疫功能，全面提升病患免疫能力；四是減輕化療副作用，特別對人體造成的骨髓抑制作用，增強細胞功能，提升病患白細胞數量[13]；五是明顯改善病患消化道功能，增強胃壁厚度，以此降低病患等不良反應[14-15]。

隨著分子生物學的發展，目前對于癌癥的治療已經從原來的細胞水平逐漸發展到分子水平[16]。所以對乳腺癌患者的腫瘤進行分子水平分析是非常必要的，研究患者腫瘤的生物學特性可以作為臨床指標進行檢驗。因為粗針穿刺活檢越來越流行成為乳腺癌的首選診斷方法，進而其準確性逐漸在臨床上倍加重視。從理論上說，粗針穿刺活檢標本和手術標本腫瘤指標的不一致率應該較低。乳腺癌有明顯的病理現象，例如泥沙樣鈣化，這種比例現象一般在X線下即可觀察到，但是泥沙樣鈣化也存在良性腫瘤中[17]。一般情況下，泥沙樣鈣化具有一定特殊的形態，并且可以應用于診斷。一般的形態有圓圈狀、原點狀、條狀以及片狀，這樣的形態清晰，一般都是良性腫瘤。而形態不清晰的混合性的腫瘤，就像出現條狀、叉狀同時具備的患者，幾乎可以確診為惡性腫瘤即乳腺癌[18]。

本文進行粗針穿刺標本與手術病理標本的病理分級及免疫組化分析，結果顯示，粗針穿刺標本檢測病理分級與手術切除標本比較差異無統計學意義（Kappa=0.38，P=0.04）；粗針穿刺標本ER、PR及HER2蛋白陽性率與手術切除標本比較差異無統計學意義，一致性均較高（Kappa=0.89、0.70、0.69，P=0.00、0.01、0.01）；120例乳腺癌患者中88例免疫組化檢測呈陽性，陽性率為73.33%；兩種檢測方法的Ki67表達比較差異無統計學意義，一致性中等（Kappa=0.49，P=0.03）。該結果與文獻[19]相符，而且醫學研究顯示，腫瘤特別是惡性腫瘤的產生、轉移和人體免疫功能特別是細胞的免疫功能聯系密切，在人體的諸多細胞中，淋巴系統細胞有著十分重要的作用[20]，是人體的效應細胞和免疫監控的重要參與者。

綜上所述，乳腺癌粗針穿刺與術后活檢標本ER、PR、HER2檢測的一致性均較高，但是乳腺癌粗針穿刺與術后活檢標本病理分級和Ki67表達一致性相對較差，均需要進一步研究與探討，臨床應結合實際選擇合適的方法。