雙氯芬酸鈉殘留溶劑的GC法測定

王留國，田 靖

(天方藥業有限公司，河南 駐馬店 463000)

雙氯芬酸鈉(Diclofenac sodium)為解熱鎮痛、非甾體類抗炎藥，起效較快，主要通過抑制前列腺素的合成而產生鎮痛、抗炎、解熱作用，用于緩解類風濕關節炎、骨關節炎、脊柱關節病、痛風性關節炎、風濕性關節炎等各種關節炎的關節腫痛癥狀，用于治療非關節性的各種軟組織風濕性疼痛、如肩痛、腱鞘炎、滑囊炎、肌痛及運動后損傷性疼痛等，它常作為醫藥原料用于生產雙氯芬酸鈉腸溶片、雙氯芬酸鈉腸溶膠囊、雙氯芬酸鈉栓、雙氯芬酸鈉搽劑和雙氯芬酸鈉滴眼液[1]。國內對雙氯芬酸鈉研究已不少見[2-4]。在雙氯芬酸鈉的生產過程中常用到甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷等，這些有機溶劑有的是第一類溶劑、屬應該避免使用的如二氯乙烷，有的屬第二類、第三類溶劑也是應該限制使用和藥品GMP或其他質量要求限制使用的[5]。為保證產品質量、控制殘留溶劑在法規要求的限度內、需對溶劑殘留進行檢測控制。《中國藥典》未收載該品種溶劑殘留檢測方法。本研究在參考中國藥典和相關文獻基礎上[6-8]，采用GC法檢查雙氯芬酸鈉中的殘留溶劑。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

氣相色譜儀(Agilent6890N)，頂空進樣器(AgilentG1888)，Mettler Toledo MS204S電子天平(十萬之一)。

1.2 試劑

雙氯芬酸鈉樣品(寧波斯邁克藥業有限公司生產，批號分別為DOSR-1703031、DOSR-1705011、DOSR-1707016)，甲醇(分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號20170306)，丙酮(分析純，洛陽市化學試劑廠，批號150508)，二氯乙烷(分析純，山東西亞化學工業有限公司，批號H40516),乙酸乙酯(分析純，西隴科學有限公司，批號1705031)，甲苯(分析純，國藥集團化學試劑有限公司，批號20161225)，二甲基亞砜(色譜純，國藥集團化學試劑有限公司，批號16110352)。

2 方法與結果

2.1 色譜條件

色譜柱為6%氰丙基苯-94%二甲基聚硅氧烷毛細管柱(DB-624，規格：30m×0.320mm，1.8μm)；柱箱初始溫度100℃，保留6min；汽化溫度150℃；檢測溫度250℃；載氣為氮氣；流量1.0mL/min；氫氣40 mL/min；空氣400 mL/min；分流比5∶1；頂空瓶溫度(爐溫)100℃；定量環溫度105℃；傳輸線溫度110℃；樣品瓶恒溫30min；加壓時間0.2min；定量環定量時間0.2min；定量環平衡時間0.2min；進樣時間1min。

2.2 溶液配制

對照品溶液：取甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷適量，精密稱定，置同一100 mL量瓶中，用二甲基亞砜制成每1 mL中約含甲醇3.0 mg、丙酮5.0 mg、甲苯0.89 mg、乙酸乙酯5.0 mg、二氯乙烷0.005 mg的混合溶液，精密量取1mL置頂空瓶中，壓蓋密封作為對照溶液。

供試品溶液：取雙氯芬酸鈉約1.0 g, 置10 mL頂空瓶中，精密加二甲基亞砜1mL，壓蓋密封，超聲處理使樣品溶解作為供試溶液。

2.3 專屬性試驗

取空白溶劑、對照溶液、供試溶液分別進樣，記錄色譜圖。空白溶劑無干擾，對照溶液、樣品溶液色譜圖中色譜峰均可完全分離，所有峰基線分離，色譜峰彼此無干擾，分離度最低10.47，見圖1。說明該方法專屬性強，滿足檢測要求。

圖1 甲醇、丙酮、乙酸乙酯、甲苯、二氯乙烷典型色譜圖

2.4 線性試驗和檢測限(LOD)

精密稱定甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷適量，加二甲基亞砜制成每1 mL中各約含5 mg、1 mg、0.5 mg、0.1 mg、0.05 mg甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷的混合溶液，頂空進樣分析，以c濃度為橫坐標，峰面積A為縱坐標，進行線性回歸。同時計算檢測限(LOD)和定量限(LOQ)，結果見表1。甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷在5～5000 ppm范圍線性關系良好。

表1 甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷的回歸方程及LOD、LOQ

2.5 精密度試驗

取對照品溶液，連續進樣6次，測定峰面積，計算甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷的峰面積RSD分別為0.97%、0.63%、0.62%、1.23%、0.86%結果見表2。表明本方法測定甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷含量精密度良好。

表2 甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷峰面積及RSD

2.6 穩定性試驗

取同一份供試品溶液，室溫放置，于0、2、4、6和10 h分別進樣測定，計算甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷峰面積的RSD為1.07%、0.93%、1.28%、0.79%、1.19%。表明供試品溶液室溫放置10 h內相對穩定。

2.7 重復性試驗

取同批次雙氯芬酸鈉6份,每份約1.0 g，分別置10 mL頂空瓶中,另取對照品甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷適量，精密稱定，加二甲基亞砜2 mL，制成每份中每1 mL中約含甲醇0.5 mg、丙酮0.5 mg、甲苯0.5 mg、乙酸乙酯0.5 mg和二氯乙烷0.5μg的6份溶液，壓蓋密封，超聲處理使樣品溶解作為供試溶液，進樣測定，按外標法以峰面積計算含量。結果甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷含量的RSD分別為2.82%、3.93%、1.97%、2.77%和3.6%。

2.8 回收率試驗

取樣品雙氯芬酸鈉1.0 g 9份，精密稱定，置10 mL頂空瓶中，精密量取對照溶液0.8 mL、1 mL、1.2 mL加入頂空瓶中，壓蓋密封，超聲處理使樣品溶解，制成相當于80%、100%、120%濃度的樣品溶液各3份。按照殘留溶劑測定方法，頂空進樣，計算回收率。結果加樣平均回收率為：甲醇100.7%、丙酮99.1%、甲苯98.8%、乙酸乙酯101.3%、二氯乙烷98.3%，RSD分別為1.78%、2.16%和3.01%、1.96%、2.37%。

2.9 樣品測定

取3批雙氯芬鈉樣品，按“2.2”項下方法制備供試品溶液和對照品溶液，按“2.1”項下色譜條件分別頂空進樣，記錄色譜圖，計算甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷的殘留量，結果見表3。

表3 殘留溶劑測定結果/%(n=3)

3 討論

3.1 耐用性試驗考察

用丙酮進樣，通過改變進樣溫度，汽化溫度和流速，理論塔板數最低69733、檢測結果變化不大，重現性較好，說明本方法耐用性好，對色譜條件要求不苛刻，結果見表4。

表4 耐用性試驗結果

3.2 溶劑選擇

分別采用水和二甲基亞砜作為溶劑，結果顯示二氯乙烷難溶于水，甲苯極微溶于水，乙酸乙酯微溶于水，甲醇、丙酮溶于水。在二甲基亞砜中甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷有較好的溶解性，且二甲基亞砜溶劑峰對甲醇、丙酮、甲苯、乙酸乙酯和二氯乙烷的峰無干擾，故選用二甲基亞砜作為溶劑。