微生物潔凈實驗室的質量控制

劉庭琨，普茺蔚，李學興

（云南省玉溪市食品藥品檢驗所，云南 玉溪 653100）

0 引言

微生物檢驗是食品藥品檢驗過程的重要環節，微生物檢驗結果受很多因素的影響，為保證實驗室操作環境的穩定性、檢驗過程的快捷性、檢驗結果的有效性、可靠性和準確性，避免偏差的產生，須對微生物潔凈實驗室進行科學的監測、合理的驗證，對潔凈實驗室進行微生物監測和質量控制，使受控環境維持可接受的風險水平[1]。現就如何對微生物潔凈實驗室進行質量控制做如下分析。

1 人員要求

實驗人員應接受無菌操作、培養基制備、消毒、滅菌、注平板、菌落計數、菌種的轉種、傳代和保藏、微生物檢查方法和鑒定技術、生物安全等培訓，經考核合格方可上崗，并接受繼續教育。檢驗人員所有操作須遵守操作規程和操作規范的要求。

2 潔凈實驗室參數確認

定期進行空氣懸浮粒子、浮游菌和沉降菌、關鍵檢測臺面、人員操作服表面及五指手套的監測。每2年檢測高效空氣過濾器的完整性；每2年監測單向流氣流組織；每年監測A級平均風速：設備 0.25～0.50m/s，設施 0.36～0.54m/s；每年監測B級單向流平均風速：0.25～0.50m/s；每年監測B級、C級、D級換氣次數；每周監測一次壓差：潔凈區與非潔凈區之間壓差不小于10Pa，不同級別潔凈區之間的壓差不小于10Pa；每周監測照度＞300lx、噪音≤65dB；每次實驗監測溫度：18～26℃、相對濕度：45%～65%。

3 監測方法

懸浮粒子的監測按照《醫藥工業潔凈室（區）懸浮粒子的測試方法》[2]的現行國家標準進行；沉降菌的監測按照《醫藥工業潔凈室（區）沉降菌的測試方法》[3]的現行國家標準進行；浮游菌的監測按照《醫藥工業潔凈室（區）浮游菌的測試方法》[4]的現行國家標準進行；表面微生物用接觸碟法和擦拭法進行監測。

4 監測項目及監測頻次

A級空氣懸浮粒子每季度一次、浮游菌每月一次、沉降菌及表面微生物每次實驗進行監測；B級空氣懸浮粒子每半年一次、浮游菌每季度一次、沉降菌及表面微生物每周一次，進行監測：C級空氣懸浮粒子每半年一次、浮游菌每半年一次、沉降菌及表面微生物每季度一次進行監測；D級空氣懸浮粒子、浮游菌、沉降菌及表面微生物均為每半年一次進行監測。

5 監測標準

見表1、表2。

表1 各潔凈級別空氣懸浮粒子的標準

表2 各潔凈級別環境微生物監測的動態標準

6 警戒限和糾偏限

微生物潔凈實驗室根據不同潔凈區域的標準，制定微生物監測警戒限和糾偏限。A級環境應無微生物污染。

7 偏差處理

當微生物監測結果超出糾偏限度時，應當按照偏差處理規程進行報告、記錄、調查、處理以及采取糾正措施，并對糾正措施的有效性進行評估。

8 微生物潔凈實驗室

所使用的儀器和設備須經撿定或校準合格，有狀態標識。儀器和設備建立操作規程、使用記錄和監控記錄。并長期進行使用監測、維護和保養。

所使用的培養基須經適用性檢查、pH值檢查合格，定期進行穩定性檢查，并按標準制備、貯藏[5-7]。培養基應采用經驗證的滅菌程序滅菌。潔凈實驗室環境監控的培養基采用終端滅菌，在使用前進行100%預培養。

微生物潔凈實驗室在使用前和使用后應進行消毒，所使用的清潔劑和消毒劑既能殺死廣泛的微生物、無毒害、無腐蝕性，又應性能穩定、作用快、殘留少。定期更換消毒劑以防止產生耐受菌株。A級和B級潔凈區使用無菌或經無菌處理的消毒劑和清潔劑。所使用的紫外消毒燈管應定期監測輻射強度，輻射強度不合格的燈管及時更換[8-9]。

微生物潔凈實驗室每次使用前潔凈服須清洗、滅菌，工鞋須消毒，防止對實驗室造成污染[10]。

9 陽性對照室和生物安全柜

若有帶菌培養物溢出，必須就地處理，不能使帶菌培養物污染擴散。所有帶菌物須滅菌。

生物安全柜和層流超凈工作臺應符合安全要求，由有資質的人員進行安裝及配件的更換，并定期進行再驗證。

為維持微生物潔凈實驗室環境的穩定性，應減少人員干預，減少人和物品的移動，減少人員干預比監測更有效。

10 結語

做好微生物潔凈實驗室的質量控制是保證實驗室良好運行，保證微生物檢驗有效、可靠、準確、快捷的前提和條件，微生物潔凈實驗室的質量控制應是一長期、持續的過程，我們應為之不懈努力，持之以恒。實驗室全體人員應遵守操作規程和操作規范、不斷提升檢驗技術和操作能力，切實做好質量控制。