MTHFR和MTRR基因多態性與寧夏高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平的相關性分析

田進海 李璞 張旭 黃琦 姜敏

【摘要】目的 研究MTHFR和MTRR基因多態性對高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平的影響。方法 選擇2016年1月至2017年12月寧夏醫科大學總醫院高血壓患者798 例作為研究對象，檢測血漿同型半胱氨酸（Hcy），采用高分辨率溶解曲線法（HRM）檢測MTHFR（rs1801133、rs1801131）和MTRR（rs1801394）基因型。結果 rs1801133、rs1801131和rs1801394不同基因型間同型半胱氨酸水平具有統計學差異（P<0.05）；Hcy正常組和異常組在rs1801133、rs1801131基因型存在統計學差異（P<0.05），在rs1801394基因型不存在統計學差異（P>0.05）。結論 MTHFR和MTRR不同基因型對寧夏人群高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平有影響，對高血壓預防和臨床治療具有積極意義。

【關鍵詞】MTHFR；MTRR；高血壓；同型半胱氨酸；基因型

【中圖分類號】R541_4 【文獻標識碼】B 【文章編號】ISSN.2095.6681.2018.05.14..02

亞甲基四氫葉酸還原酶（MTHFR）是甲硫氨酸-葉酸代謝通路中的關鍵酶，與甲硫氨酸合成還原酶（MTRR）一起，維持機體內葉酸正常代謝。另外，它們還參與維持體內正常的同型半胱氨酸（Hcy）水平。MTHFR C677T（rs1801133）、A1298C（rs1801131）和MTRR A66G（rs1801394）位點的不同基因型對這兩種酶活性影響比較大，使得葉酸代謝關鍵酶活性降低，引起葉酸代謝障礙，造成葉酸水平降低及高同型半胱氨酸血癥[1]。對于MTHFR基因異常的人，MTHFR酶活性明顯降低，造成葉酸代謝障礙，導致新生兒神經管畸形、唐氏綜合癥、唇腭裂及心血管等疾病的發病風險明顯增高[2]，這類人需要補充更多的葉酸才能達到預期的效果。高同型半胱氨酸是高血、腦卒中及冠心病等心血管疾病的危險因素[3]，因此研究MTHFR和MTRR在高血壓人群的分布特征及對血漿同型半胱酸水平的影響對預防心血管疾病具有重要意義。

1 材料與方法

1.1 一般資料

選擇2016年1月至2017年12月寧夏醫科大學總醫院高血壓患者798作為研究對象。高血壓診斷按照《中國高血壓防治指南2010》的診斷標準，收縮壓≥ 140 mmHg或舒張壓≥90 mmHg。排除肝腎功能異常、患有其他心血管疾病的及其他嚴重疾病史的患者。

1.2 同型半胱氨酸測定

選用歐普蘭公司OP-162 微量熒光檢測儀檢測血漿同型半胱氨酸水平。

1.3 基因分型

采用Promega試劑盒（Wizard，Genomic DNA Purification Kit）提取DNA，針對MTHFR和MTRR位點設計特異性引物rs1801133（F：5-TGAAGGAGAAGGTGTCT GCGGA-3，R：5-AGGACGGTGCGGTGAGAGTG-3）、rs1801131（F：5-CTTTGGGGAGCTGAAGGACTACTA-3，R：5-CACTTTGTGGACCATTCCGGTTTG-3）和rs1801394（F：5-GCAAAGGCCATCGCA GAAGACAT -3，R：5-GTGAAGATCTGCAGAAAATCCATGTA-3），利用Roche480儀器，采用高分辨率溶解曲線（high-resolution melting，HRM）法檢測三個位點的基因型。

1.4 統計分析方法

采用SPSS 23.0統計學軟件對數據進行分析。計量資料以“x±s”表示，應用t檢驗，計數資料以百分數（%）表示，采用x2檢驗。以P<0.05為差異有統計學有意義。

2 結 果

2.1 MTHFR和MTRR基因型對血漿同型半胱氨酸水平的影響

結果顯示，rs1801133 TT基因型Hcy水平最高，其次是CT基因型，CC基因型Hcy水平最低。rs1801131 CC基因型Hcy水平最高，AC基因型次之，AA基因型較低。Hcy水平在各基因型間差異具有統計學意義（P<0.05）。rs1801394位點AG和GG基因型Hcy水平相對較高，差異具有統計學意義（P<0.05）。見表1。

2.2 同型半胱氨酸水平正常組和異常組的基因型差異比較

rs1801133和rs1801131的基因型在Hcy正常組和異常組差異具有統計學差異（P<0.05），rs1801394在Hcy正常組和異常組間沒有統計學差異（P>0.05）。見表2。

3 討 論

血液中Hcy濃度的升高受遺傳、環境、飲食等多因素影響，在忽略環境等外部因素的影響下，相關代謝酶的基因突變引起該酶缺陷或活性下降，進而導致Hcy升高可能是發病的主要原因之一。高同型半胱氨酸是眾多心血管疾病發生的危險因素之一，對人類健康產生嚴重的威脅，高同型半胱氨酸可能與動脈粥樣硬化、腦卒中及冠心病的發生密切相關[4]，高血壓是這些疾病的病理基礎。研究高血壓患者血漿同型半胱氨酸水平對預防心血管疾病至關重要，MTHFR 和MTRR 基因突變造成酶活性降低是血漿同型半胱氨酸積累的遺傳因素，搞清楚它們之間的這種內在關系對預防和治療心血管疾病有很大幫助。我們研究發現寧夏人群高血壓患者的rs1801133位點CT 和TT 基因型，rs1801131位點的CC和AC基因型是血漿高同型半胱氨酸主要影響因素，此外rs1801394位點的GG和AG基因型同樣對血漿同型半胱氨酸的積累產生影響，這三個位點對高血壓患者的Hcy水平的影響是顯著的。

綜上，MTHFR和MTRR基因多態性對高血壓患者血液Hcy水平的影響是顯著的，對包括高血壓在內的心血管疾病的預防及治療具有重要意義。

參考文獻

[1] 鄧穎芳，王麗麗，田萌萌，等.高同型半胱氨酸（Hcy）血癥患者的葉酸缺乏與MTHFR、MTRR基因多態性情況分析[J].中國分子心臟病學雜志，2015，（5）：1463-1465.

[2] 侯書寧.葉酸基因多態性和唐氏綜合征高危風險之間的相關性研究[J].國際檢驗醫學雜志，2016，37（22）.

[3] 劉小艷，劉 濤.同型半胱氨酸及其代謝酶基因多態性與冠心病的關系[J].中國動脈硬化雜志， 2018（1）.

[4] Zhang R，Huo C，Wang X，et al.Two Common MTHFR Gene Polymorphisms （C677T and A1298C） and Fetal Congenital Heart Disease Risk：An Updated Meta-Analysis with Trial Sequential Analysis[J].Cell Physiol Biochem，2018，45：2483-2496.

本文編輯：吳宏艷