高效液相色譜分析中污染峰的分析

陳志會(huì)

高效液相色譜分析法是現(xiàn)在藥品檢驗(yàn)含量有關(guān)物質(zhì)的常用方法，在色譜圖中出現(xiàn)異常峰的情況比較多，下面我就拿就高效液相色譜分析中出現(xiàn)的污染峰這一情況來談一下其出現(xiàn)的原因和應(yīng)對方法。

1.概念及工作原理

高效液相色譜法是采用高壓輸液泵將特定的流動(dòng)相泵入裝有填充劑的色譜柱然后對供試品溶液進(jìn)行分析測定的色譜方法。注入的供試品溶液經(jīng)流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱，在色譜柱中實(shí)現(xiàn)其各組分的分離，分離的各組分在依次進(jìn)入檢測器，由數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)將其處理成為色譜信號(hào)，所以高效液相色譜儀一般由儲(chǔ)液器、高壓泵、進(jìn)樣器、色譜分離柱、檢測器、記錄儀等幾部分組成（如圖一所示）。

2.引進(jìn)污染的途徑

藥品的質(zhì)量控制一般包含五個(gè)方面：人員、機(jī)器、原料、方法、環(huán)境。所以如果高效液相色譜分析中所檢驗(yàn)的藥品溶液出現(xiàn)了污染峰，引入污染的途徑就可以從檢驗(yàn)員的理論素質(zhì)、高效液相色譜的運(yùn)行狀態(tài)、物料的清潔程度、人員操作的規(guī)范以及實(shí)驗(yàn)環(huán)境的清潔這五大方面入手，抓到引進(jìn)污染的病灶。

3.原因

3.1高效液相色譜儀引進(jìn)的污染

若高效液相色譜儀出現(xiàn)污染從而導(dǎo)致檢驗(yàn)的藥品溶液出現(xiàn)了污染峰，我們就必須從其組成結(jié)構(gòu)出發(fā)，考慮是否是管路污染、色譜柱污染、進(jìn)樣器污染、進(jìn)樣墊污染或者是檢測器污染。

3.2 人員操作過程中引進(jìn)的污染

說到人員操作引進(jìn)的污染我們就不是不把高效液相色譜分析藥品的檢驗(yàn)過程做一下簡單回顧：配制供試品溶液所需溶劑的配制→樣品處理→樣品稱量→供試品溶液的配制→供試品溶液倒入進(jìn)入高效液相色譜儀所需的進(jìn)樣小瓶→高效液相色譜儀分析。

人員操作過程中引進(jìn)的污染，最終環(huán)節(jié)就是導(dǎo)致供試品溶液的污染，如果供試品溶液出現(xiàn)污染我們就必須反推到整個(gè)配制過程，分析得出的引入污染原因如下：

3.2.1配制樣品所需的溶劑出現(xiàn)了問題

配制樣品所需的溶劑一般都需要用試液、試藥、超純水來配置，所以如果是溶劑出現(xiàn)問題，首先要排查的就是上述三個(gè)物質(zhì)，另外要考慮的就是溶劑配制過程中引進(jìn)了污染，如配制過程中與試藥接觸的工具以及配制溶劑過程中所需的器皿，是否是他們的污染導(dǎo)致溶劑的問題。還有就是排查是否是溶劑在濾過裝置以及最終的溶劑存放裝置中出現(xiàn)了的污染。

3.2.2樣品處理和稱量過程出現(xiàn)了問題

樣品的處理最常見的就是研細(xì)，所以研細(xì)所用的研缽就是我們關(guān)注的重點(diǎn)。另外就是稱樣過程中引進(jìn)的污染，如稱樣勺、稱量紙、手套、天平托盤等的污染，造成了稱樣的樣品的污染，最終導(dǎo)致供試品溶液污染，高效液相色譜分析中污染峰的出現(xiàn)。

3.2.3供試品溶液的配制過程出現(xiàn)了問題

存放樣品的稱量瓶、盛放溶劑的燒杯、定容配制供試品溶液的滴管、需要轉(zhuǎn)溶時(shí)所用的移液管，哪個(gè)環(huán)節(jié)出現(xiàn)污染都可以導(dǎo)致配制的供試品溶液的污染。

3.2.4其他

此外，我們所檢驗(yàn)的樣品一般都需要部分取樣才來送檢，取樣工具的潔凈度以及存放樣品的包裝也是引進(jìn)污染的風(fēng)險(xiǎn)因素。此外，存放供試品溶液的進(jìn)樣小瓶及其瓶蓋這兩者的污染也可以在高效液相色譜的分析實(shí)驗(yàn)過程中引入污染峰。

4.應(yīng)對方法

4.1針對高效液相色譜污染采取的措施有：

沖洗高效液相色譜整個(gè)管路系統(tǒng)；沖洗或者更換色譜柱；沖洗進(jìn)樣器；更換進(jìn)樣墊；以及清洗檢測器。

4.2針對人員操作過程中引進(jìn)的污染采取的措施有：

規(guī)范各類器皿的清洗操作，確保器皿的清潔性；可采用一次性產(chǎn)品盡量用一次性產(chǎn)品如進(jìn)樣小瓶、瓶蓋還有滴管，避免因清潔不干凈而引進(jìn)污染；規(guī)范實(shí)驗(yàn)員的操作：如試藥稱取時(shí)多稱出來的試藥不可以放回原瓶；大瓶試液使用時(shí)要倒出一部分，不可以直接用滴管等取用，倒出的溶劑仍然不可以倒回原瓶等；還有定期清理天平以及實(shí)驗(yàn)室，確保實(shí)驗(yàn)環(huán)境的整潔。

5.總結(jié)

質(zhì)檢工作是一項(xiàng)繁瑣而精準(zhǔn)的工作，需要我們時(shí)刻保持謹(jǐn)慎、細(xì)致，認(rèn)真分析和排查出現(xiàn)問題的原因，保證實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行，確保數(shù)據(jù)能的真實(shí)反應(yīng)藥品的狀態(tài)，最終保障藥品的質(zhì)量。

（作者單位：天津藥物研究院藥業(yè)有限責(zé)任公司）