彌勒市種公豬精液攜帶6種病毒現狀調查

李冬艷

摘要：為全面了解彌勒市種公豬健康狀況及精液品質，有效預防在公、母豬之間發生重要疫病的水平及垂直傳播，確保人工授精所用精液品質，促進地方生豬養殖健康發展，我們對彌勒市養豬場和散養戶種公豬攜帶豬瘟病毒（CSFV）、豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）、豬圓環病毒2型（PCV2）、偽狂犬病病毒（PRV）、豬細小病毒（PPV）、乙型腦炎病毒（JEV）等繁殖障礙性疾病進行了調查。分3個批次采集了143份樣品送往實驗室進行DNA（或RNA）的提前及PCR（或R-PCR）擴增，通過瓊脂糖凝膠電泳鑒定[1]，從105份規模飼養種公豬精液樣品中未檢出上述6種病毒核酸；從38份散養種公豬精液中檢出PRV和PCV2核酸陽性各1份（來自不同個體），病毒總攜帶率為5.3%。應用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）回顧檢測以帶毒精液人工授精所獲子代的血清抗體，評估種公豬精液帶毒對繁育子代（被檢樣本n=35）健康的影響，其中被測20日齡仔豬血清PRV抗體和PCV2抗體呈陽性的比例分別為20%和8.5%。針對種公豬帶毒現狀提出相應的疫病防控建議。

關鍵詞：種公豬；精液；繁殖障礙相關病毒；PCR擴增

中圖分類號：S855.3 文獻標識碼：B doi：10.3969/j.issn.2096-3637.2018.04.010

本調查通過建立和應用PCR或RT-PCR方法，對彌勒市種公豬精液中可能攜帶的常見繁殖障礙性病毒進行靈敏檢測，全面摸底調查當地種豬精液帶毒狀況，了解當地種公豬精液品質及健康狀況，分析和評估養殖方式對精液品質及精液帶毒對繁育仔豬的影響，確定當地生豬繁育管理的薄弱環節，為彌勒市生豬健康養殖的可持續發展提供種質保障，為進一步完善當地種公豬的養殖和防疫體系建立提供必要的科學依據。

PCR檢測本次所采集到的樣品總共143份，其中規模養殖的105份種公豬精液樣品中未檢出上述6種病毒核酸；分散養殖的38份種公豬精液中檢出PRV和PCV2核酸陽性各1份（來自不同個體），病毒總攜帶率為5.3%。針對本次檢出病毒核酸陽性數量不多的情況，回顧檢查操作方法、試驗材料、實驗步驟等，沒有發現任何錯誤之處，整個的實驗檢測過程科學合理，沒有出現因實驗不當造成檢測結果異常的情況，因此本試驗所獲檢測結果真實可信，能夠真實反映當前彌勒市種公豬養殖種公豬攜帶繁殖障礙病毒的基本情況和疾病預防效果。

遂寧縣檢測的種公豬精液樣品中也未檢出陽性[2]，這和我市本次規模養殖種公豬精液檢出結果基本接近，出現這樣的結果，可能由于大環境免疫、管理措施得當，致使檢出病毒陽性率較低甚至無。四川省精液樣品，JEV陽性率也為0，跟我們檢測結果一致，說明JEV在種公豬養殖中威脅較小。但血清學調查研究發現，豬可存在一定程度的JEV感染，這提示JEV感染不一定引起病毒分布于精液，可能與個體免疫力有差異、存在血睪屏障等因素有關。該報道中PCV2陽性率為2.38%，和我市分散養殖檢出陽性率2.9%接近，表明PCV2的發生率相對較低，但陽性樣品來自散養戶，提示應加強對散養戶的防疫監督力度。在防疫措施比較到位、管理規范的區域或規模養殖場，這6種病毒的攜帶率低，是正常現象。

本調查應用PCR技術檢測種公豬精液，發現PRV和PCV2陽性各1例，但因受條件限制，未對PCR擴增產物進行克隆、測序及比對分析，以致不能確認病毒來源及變異的情況，也不能確定種公豬何時攜帶或感染相應的病毒。若能擴大樣本數以及采樣的區域范圍，并應用檢測靈敏度更高的實時熒光定量PCR，結果會更具說服力。

從應用ELISA對帶毒精液配種產生的子代檢測結果來看，20日齡仔豬血清存在一定程度的PRV和PCV2抗體陽性率，表明帶毒精液有可能通過自然交配乃至人工受精方式對子代健康產生重要影響。筆者根據對帶毒仔豬的母豬進行追蹤了解，發現有3頭母豬出現過流產情況，另有1頭母豬出現不育癥狀，這4頭母豬在產下帶毒仔豬前未出現過流產、不育癥狀。這4頭母豬此次受精前身體狀況良好，受精后出現繁殖障礙，與本試驗檢測到所用精液陽性結果的情況基本一致。

本調查未發現規模養殖戶種公豬攜帶6種繁殖障礙相關病毒，表明規模養殖戶對生豬養殖防疫意識較高，按規定把疫苗接種和生物安全防護預防措施落實到位。規模養殖戶從選址、圈舍建造、飼料使用、疾病預防措施到日常管理，都比較規范、科學，建議逐步減少種公豬的分散養殖。從檢測結果來看，測出病毒攜帶的樣品來自散養戶。應該加強對農村散養種公豬的管理和規范養殖[3]。彌勒市仍有部分地區散養種公豬，雖可為農村發展生豬養殖提供一定便利，但難以實現對種公豬疫病的監控，建議在進行春秋“兩防”豬瘟、藍耳病及口蹄疫強制免疫時，加入對PRV和PCV2等其他繁殖障礙相關疾病的預防工作。

參考文獻

[1] 張志，劉爽，張燕霞，等.豬精液中五種病毒的初步檢測[J].動物醫學進展，2012，33（7）： 112-115.

[2] 吳永剛.四川省部分地區公豬精液6種病毒性疾病的分子檢測[D]，雅安：四川農業大學，2014.

[3] 李剛.豬精液冷凍保存技術研究[D].西安：西北農林科技大學，2005.