幸娟霞 張麟燕 劉琪 彭軍容 羅國霞 施迎春 王村建(通訊作者)
(1重慶市涪陵中心醫院醫學檢驗科 重慶 408000)
(2重慶市涪陵中心醫院耳鼻喉科 重慶 408000;3重慶市涪陵區疾控中心 重慶 408000)
SysmexXE-2100為普遍使用的血細胞分析儀,具有CBC、CBC+DIFF、RET等通道模式。它與很多血細胞分析儀同樣雖不能很正確識別異常細胞,但能提示較可靠的報警信息,檢驗者可據信息推片復檢,核對其準確性。我科對300例儀器提示嗜酸增高樣本中發現4例報警信息與鏡檢結果不一致,最后分析散點圖特征,并結合儀器原理和鏡下紅細胞形態,最終發現瘧原蟲感染。
1.1.1 儀器和試劑
(1)血細胞分析儀:日本Sysmex XE-2100血細胞分析儀,采用核酸熒光染色技術(DIFF通道)和激光流式分析技術(WBC/BASO通道)雙方法檢測WBC總數和分類,該儀器用側向散射光(SSC,細胞內容物復雜程度)和側向熒光強度(SFL,細胞內RNA和DNA含量)行WBC分類計數。同時在溶血素中加入大分子有機酸,讓有機酸特異性結合到EO顆粒上,以增加EO內容物的復雜性,從而達到區分EO的目的[1]。
試劑、校準品、質控品:Sysmex公司原裝配套產品。
(2)顯微鏡Olympus BX41;BASO劉氏染色液。制片按《全國臨床檢驗操作規程》第4版執行[2]。
1.1.2 病例及樣本 2016年1月—2017年6月,EO異常的門診和住院患者300例;其中瘧原蟲感染者:男4例,45~49歲,平均年齡46.5歲,均為重慶本地人,均有境外工作或居住史,因發熱、寒戰、畏寒等就診。
(1)血細胞分析儀檢測 用乙二胺四乙酸二鉀(EDTA—K2)抗凝真空管,采集2mL靜脈血充分混勻,于抽血后1h內用XE-2100上機檢測。儀器按期校正,每日室內質控,雙水平;運行良好。
(2)鏡檢 儀器示EO增高或異常報警的樣本,制備合格的血涂片,用劉氏染液染色鏡檢復核。若出現鏡檢與儀器結果不一致時,觀察RBC形態查找瘧原蟲。
XE-2100檢測300例EO增高樣本中,4例鏡檢與儀器不符,占1.3%,查看WBC散點圖,發現異常,細看散點圖上EO與中性粒細胞間距變小,緊密連接,表現為EO假性增高(瘧疾感染者)。
4例瘧疾感染者鏡檢示EO均正常,同時RBC內見瘧原蟲裂殖體、配子體或滋養體。檢測結果見表。

表 4例瘧原蟲樣本血液學檢測結果
Sysmex XE-2100血液分析儀功能齊全,應用廣泛,能對異常信息提示,在總300例EO增高患者中,4例瘧原蟲感染樣本的儀器信息提示與鏡檢不一致,其散點圖示EO與中性粒細胞間緊密連接,而余296例散點圖無明顯異常。分析原因可能為:該XE-2100 WBC分類計數原理是利用SSC和SFL,而瘧原蟲感染的主要發病原因在于紅細胞內瘧原蟲裂解增值,瘧原蟲感染RBC消化Hb后產生瘧色素,為一種雙折光晶體,當RBC破裂,瘧色素釋放出來被WBC所吞噬[3-5],吞噬了瘧色素的WBC側射光強度發生改變,顯示在EO散點圖區域略左側,故儀器上此類樣本被誤認EO增高,造成EO+比值增高假象;而現實正常EO增高與假性EO增高的散點位置有差異,余296例為真性EO增多,顯示為正常散點圖。
回顧總結,雖然此類瘧原蟲標本僅占標本總量的1.3%,工作中在儀器報警提示與鏡檢不符時,不能就輕易認可報警信息而不查找真正原因,應嚴格認真執行復檢流程。其次需要對儀器工作原理掌握,重視各種報警信息含義,才能明確引起異常報警的真正原因。所以在工作中使用SysmexXE-2100時,認識“特征性”的散點圖篩檢瘧原蟲有很好的臨床價值,但僅用于過篩并不能確認瘧原蟲類別,需進一步鏡下確認。鑒于病例數有限,仍待進一步累積病例,證實感染瘧原蟲的“特征性”散點圖。