鹽酸克林霉素棕櫚酸酯制劑的一致性評價研究

陳洪波

摘 要：建立反相高效液相色譜法測定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。方法：采用奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm），0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動相，檢測波長為280nm，流速為1.0ml/min，柱溫為30℃。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯平均回收率分別為99.2%。結論：本法簡便、準確，可用于鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度測定。

關鍵詞：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片；含量；測定

鹽酸克林霉素棕櫚酸酯為克林霉素的衍生物，體外無抗菌活性，在體內經酯酶水解形成克林霉素而發揮抗菌活性。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯用于革蘭陽性菌引起的下列各種感染性疾病，如扁桃體炎、慢性支氣管炎急性發作、前列腺炎、敗血癥、腹膜炎、肺炎、蜂窩組織炎、創傷、急性腎盂腎炎、化膿性中耳炎、口腔感染等。本實驗采用反相高效液相色譜法測定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的體外溶出度并繪制溶出曲線。

1儀器與試藥

1.1儀器：C806溶出試驗儀（北京中西遠大科技有限公司）；恒信C-1000柱溫箱（武漢恒信世紀科技有限公司）；IKA RV10數顯型旋轉蒸發儀（上海泰坦科技股份有限公司）； 721數顯分光光度計（上海壘固儀器有限公司）；600220液相保護柱（天津琛航科苑科技發展有限公司）；BT-V20A/B高精度恒溫水槽（上海百典儀器設備有限公司）；LU230四元低壓梯度液相色譜分析系統（大連依利特分析儀器有限公司）；電子天平FA1004型（南京華欣分析儀器制造有限公司）；優普ULUP-I微量分析型超純水器（四川優普超純科技有限公司）；Edwards nXDS10i渦旋式干泵（北京帥恩科技有限責任公司）。

1.2色譜柱：奧泰公司 C18 色譜柱（284 mm×4.6mm，5μm）。

1.3對照品：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯 購自中國藥品生物制品檢定所。

1.4試劑：三乙胺（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、磷酸二氫銨（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）、乙腈（杭州蕭山創益化工儀器有限公司）、甲醇（昆山諾普森實驗室用品科技有限公司）。

1.5試藥：鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片

2測定方法確定

2.1色譜條件

依據查閱文獻及考查的結果，確定色譜條件如下[1-6]。流動相：0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動相，檢測波長：280nm，流速：1.0m·min-1。柱溫：30℃。

2.2對照品溶液的制備

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對照品適量，置容量瓶中，加流動相制成每1mL含0.5mg的溶液，即得。

2.3鹽酸克林霉素棕櫚酸酯溶出度測定方法

取本品，照溶出度測定法（中國藥典2015版附錄），分別以四種溶劑900毫升為溶出介質，轉速為55r/min，依法操作，經5分鐘時，取溶液2mL，置10mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，過濾，按2.1項下的色譜條件，取續濾液10μl，注入液相色譜儀。

2.4精密度試驗

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對照品適量，加流動相使溶解，制成濃度為0.5mg·mL-1的供試品溶液。照上述色譜條件，精密吸取10μl，連續進樣6次，記錄峰面積。結果，RSD=0.82%，表明本方法精密度良好。

2.5對照品的線性考察

精密稱取鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對照品85mg，置5ml容量瓶中，加入流動相使溶解并稀釋至刻度，搖勻，分別精密吸取0.5、1.5、2.0、2.5、3.0、3.5、4.0、4.5、5.0mL，置于5mL量瓶中，加流動相稀釋至刻度，搖勻。分別精密上述溶液吸取10μL，注人液相色譜儀，依照2.1項下的色譜條件測定，記錄色譜峰。以峰面積（Y）為縱坐標，對照品進樣量（X）為橫坐標，繪制標準曲線，計算回歸方程。結果表明，鹽酸克林霉素棕櫚酸酯在0.17～1.7mg·mL-1范圍內呈良好的線性關系。

2.6重現性試驗

稱取同一批的鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片樣品6份，按測定方法項下的方法溶出度測定方法并計算樣品的RSD值，結果RSD為0.81%，結果表明此方法的重現性良好。

2.7準確度試驗

采用加樣回收試驗，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的鹽酸克林霉素棕櫚酸酯對照品，測定含量（同時測定樣品含量），計算回收率。6次測定的平均回收率為99.2%，RSD為0.91%。

3討論

分別考察

0.01 mol/L磷酸氫二鈉-磷酸緩沖液（p H=2.2）-水（80：20）；乙腈-水（體積比為65∶35）；甲醇-0.4%磷酸（47：53）；甲醇∶水∶冰乙酸（172∶27∶1）；0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動相，0.05mol/L磷酸二氫鉀—乙腈—三乙胺（60∶40：0.01）不同比例的流動相，結果以0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動相為流動相，供試品各峰分離效果最好，故選用0.1mol/L磷酸二氫鉀（85%的磷酸調pH3.5）∶乙腈∶甲醇（700∶150∶150）為流動相為流動相。本實驗表明此方法可用于鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度測定。鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯的溶出度與參比制劑相當，溶出曲線相似。本法操作簡便，結果準確可靠，可用于本品中鹽酸克林霉素棕櫚酸酯一致性評價。

參考文獻：

[1]朱衛民，王其南，劉之龍，蔣玉富，李崇智，張潤蒼，唐利平，胡大榮.鹽酸克林霉素棕櫚酸酯顆粒劑治療細菌性感染臨床療效觀察[J].中國抗生素雜志.1997（02）

[2]車寧，殷琦，李可欣，孫春華.鹽酸克林霉素棕櫚酸酯分散片在健康人體的藥代動力學和生物等效性[J].中國臨床藥理學雜志.2005（04）

[3]王建，王紅波，孟磊，洪利婭.梯度洗脫HPLC法測定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯及制劑的有關物質[J].藥物分析雜志.2012（02）

[4]鄭曦孜，亓連軍.反相高效液相色譜法測定鹽酸克林霉素棕櫚酸酯顆粒的含量[J].兒科藥學雜志.2007（06）

[5]趙樹藩，任進民，王淑梅，楊秀嶺，劉愛英，蔣俊康.克林霉素磷酸酯膠囊的人體藥代動力學與相對生物利用度研究[J].中國藥房.2001（11）

[6]石小鵬，王志睿，楊志福，吳寅，陳蘇寧，金鑫，文愛東.鹽酸克林霉素棕櫚酸酯咀嚼片人體生物等效性研究[J].中國臨床藥理學與治療學.2008（05）