雷貝拉唑鈉對Beagle犬臟器毒性的研究

趙蕾，韓雪蓮，許德義，卜曉東，沈傳陸

(東南大學醫學院 藥理學系，江蘇 南京 210009)

1 材料和方法

1.1 動物

1.2 藥品和試劑

注射用雷貝拉唑鈉，白色粉末(南京海光應用化學研究所與揚州奧賽康藥業有限公司)；0.9%氯化鈉注射液(南京小營制藥有限公司)。用0.9%氯化鈉注射液將雷貝拉唑鈉配制成2.5%、0.5%和0.1%雷貝拉唑鈉氯化鈉注射液，消毒滅菌處理，不含防腐劑等其他成分，注射液每周配制1次。

1.3 實驗分組

本實驗設靜脈注射雷貝拉唑鈉高(25 mg·kg-1·d-1)、中(5 mg·kg-1·d-1)、低(1 mg·kg-1·d-1)3個劑量組和等體積生理鹽水對照組，每組Beagle犬雌雄各3只。前肢頭靜脈注射給藥4周，給藥體積1 ml·kg-1。觀察各組Beagle犬的生命體征、體質量變化和飲食飲水情況，檢測血細胞及血生化改變，行尿常規檢測，給藥結束后動物麻醉、放血、解剖取臟器，測定內臟質量以及標本送組織病理學檢查。

1.4 統計學處理

采用SPSS 17.0統計軟件進行數據分析，計量數據描述用均數±標準差，兩組間比較采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 毒性癥狀

雷貝拉唑鈉25 mg·kg-1·d-1高劑量組注射藥物過程中雌雄犬均出現掙扎，注射結束后犬立即出現惡心嘔吐癥狀；回籠后2 h內側臥，四肢肌張力下降，活動減少，反應遲鈍；給藥次日起可見雌雄犬出現流涎癥狀，給藥2周后進食量減少，糞便松散、不成形，可見眼結膜廣泛充血，瞳孔未見明顯縮小，無結膜潰瘍，且上述癥狀持續到給藥結束。靜脈注射雷貝拉唑鈉5 mg·kg-1·d-1中劑量組，雌雄犬也出現短暫的肌張力下降，活動減少，但很快恢復，未見惡心嘔吐癥狀；大便成形，無進食量減少現象，各犬出現結膜充血，但不及高劑量組明顯。雷貝拉唑鈉1 mg·kg-1·d-1低劑量組在注射過程中和注射后犬均未出現任何毒性癥狀。對照組與給藥組犬在給藥4周內未出現死亡，高劑量組雌雄犬在給藥2周后進食量減少，但結合給藥前與給藥后每周稱質量數據，雄犬體質量減低，但雌犬未見與給藥有關的體質量改變。停藥10 d后高劑量組雌雄犬結膜充血消失。各組犬給藥前后心電圖均未見異常。

2.2 血液、血生化和尿常規檢查

雷貝拉唑鈉給藥各組和生理鹽水對照組比較，低、中劑量組犬給藥前后的血液學指標、血生化指標和尿常規檢查均無明顯差異。高劑量組雌雄犬的血液學指標紅細胞[(5.86±1.27)×1012L-1]、白細胞[(7.3±2.7)×109L-1]和血小板[(290±37)×109L-1]計數較其他組減少，但差異無統計學意義。

2.3 臟器質量和臟器系數

肝、腎、肺等器官的臟器質量和系數，僅見雷貝拉唑鈉高劑量組與對照組比較有顯著差異。其中雌犬腎質量、雌雄犬肺質量和雄犬腎上腺質量增加，但臟器系數無顯著差異。雷貝拉唑高劑量組雌犬肝臟質量與對照組雌犬比重94%，臟器系數大49%，雷貝拉唑高劑量組雄犬肝臟與對照組雄犬比重99.56%，臟器系數大97%。見表1、2。

2.4 組織病理學觀察

鏡下觀察心、肝、脾、肺、腎、腦、食管、胃、小腸、大腸、垂體、脊髓、骨髓、淋巴結、膀胱、睪丸、附睪、子宮、卵巢、胸腺、腎上腺、視神經、甲狀腺、甲狀旁腺、唾液腺、膽囊、胰腺、氣管、主動脈、前列腺、乳腺、坐骨神經、眼及給藥局部等器官和組織。對照組與雷貝拉唑鈉各劑量組組織病理學比較，僅有雷貝拉唑鈉高劑量組雌雄犬可見甲狀腺濾泡上皮呈扁平狀，略有增生；可見不同程度的胃內腺體改變，腺體排列稀疏，壁細胞數量減少；其中有1雄犬小腸黏膜內出現小出血灶。其他器官和組織未見異常。見圖1。

3 討 論

本研究使用的注射用雷貝拉唑鈉的劑量主要參考重復給藥毒性實驗技術指導原則[10]，結合實驗室前期的雷貝拉唑鈉急性毒性試驗，依據5倍劑量的比值設定為1、5、25 mg·kg-1·d-1。

連續4周給予Beagle犬注射用雷貝拉唑鈉后，低劑量組未發現任何毒性癥狀，重要實驗室檢查指標，如血、尿常規，心電圖，血清生物化學，出凝血時間，臟器標本質量和系數以及組織病理學觀察，與生理鹽水對照組比較差異均無統計學意義，提示其為臨床可用參考安全劑量。中劑量組出現短暫的肌張力下降，活動減少，并于給藥2周后出現輕度的眼結膜充血，停藥很快恢復，實驗室檢查、臟器標本巨檢和組織病理學觀察未發現異常。高劑量組在給藥早期就出現流涎，行走無力、喜臥，惡心嘔吐，大便稀軟不成形，雄犬體質量逐漸降低，可能與藥物引起犬食欲降低有關；血常規檢查可見紅細胞、白細胞和血小板減少，雖與其他組無顯著性差異，亦提示用藥中應注意檢測血液學改變；臟器標本巨檢可見腎、肺、腎上腺和肝質量以及肝臟器系數明顯升高，雖未見組織病理學改變，亦提示臟器損害可能；甲狀腺濾泡上皮呈扁平狀，略有增生，膠質減少，胃內腺體排列疏松，壁細胞減少，提示注射高劑量雷貝拉唑鈉損害的靶器官為甲狀腺和胃腺體；因僅有1雄犬出現腸黏膜小出血灶，無法判斷是否為藥物毒性。

表1雌犬靜脈注射雷貝拉唑鈉25mg·kg-1·d-1對臟器質量及臟器系數的影響

臟 器臟器質量/g臟器系數對照組(n=3)高劑量組(n=3)對照組(n=3)高劑量組(n=3)心63.2±5.369.3±5.50.88±0.030.747±0.03腦76.9±3.974.8±8.71.08±0.070.802±0.08肝218±12.5423±53a3.06±0.284.56±0.37a腎34.1±1.340.7±3.3a0.48±0.040.439±0.019脾18.3±221.7±20.25±0.0120.234±0.012肺63.7±3.976.2±3a0.9±0.080.82±0.009腎上腺1±0.20.5±0.10.014±0.00.005 4±0.0胸腺5.7±0.36.7±10.079±0.0050.072±0.008卵巢1.37±0.262.07±0.50.05±0.030.022±0.005子宮1.70±0.261.78±0.050.023±0.001 60.019±0.002

與對照組比較，aP<0.05

表2雄犬靜脈注射雷貝拉唑鈉25mg·kg-1·d-1對臟器質量及臟器系數的影響

臟 器臟器質量/g臟器系數對照組(n=3)高劑量組(n=3)對照組(n=3)高劑量組(n=3)心63.8±3.666.7±3.40.736±0.050.73±0.01腦79.5±9.572.7±7.60.95±0.070.89±0.04肝230±13.6459±14.4a2.64±0.125.21±0.11a腎35.1±2.136.2±2.30.4±0.0140.41±0.03脾24±123.9±3.20.28±0.040.27±0.02肺73.1±3.688.9±9.5a0.84±0.051.0±0.09腎上腺0.96±0.111.4±0.05a0.010 1±0.0020.015±0.005胸腺8.8±6.77.4±1.150.10±0.030.08±0.01睪丸12.1±5.615.5±1.70.139±0.050.18±0.012附睪2.4±0.053.4±0.550.032±0.0060.038±0.005

與對照組比較，aP<0.05

圖1對照組與雷貝拉唑鈉高中低劑量組胃和甲狀腺組織病理學的改變

綜上所述，本實驗依據4組Beagle犬4周連續用藥，證實靜脈注射25 mg·kg-1·d-1雷貝拉唑鈉的臨床毒性靶器官為甲狀腺和胃腺體，無任何毒性癥狀和臟器損害的安全劑量為1 mg·kg-1·d-1。