高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯原料和制劑中有關物質探討

鄭朝武

（海南皇隆制藥股份有限公司 海南 海口 570311）

就我國現行的鹽酸黃酮哌酯質量標準檢測手段來說，主要是依照《中國藥典(二部)》的相關內容，針對鹽酸黃酮哌酯原料和制劑中有關物質進行檢定，主要運用TLC法。但是隨著我國藥物技術的不斷發展，通過高效液相色譜的手段也能夠詳細的針對鹽酸黃酮哌酯的質量以及物質含量進行分析，并且結合我國相關的藥物檢測標準進行對照，檢測出鹽酸黃酮哌酯的含量。客觀來說，傳統TLC相比HPLC檢測手段來說，更加繁瑣，其靈活度也相對較低。據筆者的親身統計與觀察總結出，傳統TLC檢測手段，僅控制雜質3－甲基黃酮－8－羧酸，對其他雜質不能進行有效的檢測。本文將針對高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯原料和制劑中有關物質進行詳細的探討。

1.鹽酸黃酮哌酯試藥

鹽酸黃酮哌酯主要用于尿頻、尿急、尿痛、排尿困難及尿失禁等泌尿疾病的治療中。作為一中國產的口服藥物，我國不同制藥廠針對鹽酸黃酮哌酯的大多檢查項目與原研藥品的差異并不大，但是藥物的溶解與溶出的情況，不同制藥廠會存在一定程度上的差異，但是此類差異對鹽酸黃酮哌酯的療效并沒有產生直接的影響[1]。107批樣品按照現行質量標準檢驗，僅有30批樣品檢出已知雜質，很難針對鹽酸黃酮哌酯中出現的其他雜質與未知物質進行檢測，說明現行藥典有關物質測定方法專屬性和靈敏度均較差，檢查結果不能反映藥品中雜質的真實含量。

2.高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯的策略

2.1 合理的選擇色譜條件

針對鹽酸黃酮哌酯來說，其極性相對較強，很容易被洗脫。所以在色譜條件的選擇上，必須積極的結合鹽酸黃酮哌酯的實際特性進行選擇。嚴格的按照英國以及美國的藥典針對鹽酸黃酮哌酯的原料測定色譜的條件[2]。與此同時，還需要積極的針對藥典和實際鹽酸黃酮哌酯檢測的內容進行有機的結合。由于美國針對鹽酸黃酮哌酯增加檢測的雜質并未進行明確的規定，使得在高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯的過程中，很可能出現雜質并不明確的現象。所以為了保障高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯的質量，就必須針美國藥典的片劑色譜進行不斷的優化和創新[3]。積極的采用了相等梯度洗鹽酸黃酮哌酯，并且針對乙腈比例的手段，針對極性相對較弱的雜質進行洗脫，這樣不僅能夠有效的縮短雜質分離的時間，而且達到了分離的效果。USP39原料和片劑分別采用240nm及293nm作為檢測波長，并且針對片劑中不同雜質的個數進行了詳細的分析。與此同時，為了保基線更加的穩定所以積極的利用了293nm作為鹽酸黃酮哌酯的檢測波長，并對市場上不同企業所生產的鹽酸黃酮哌酯的進行檢測。由于不同鹽酸黃酮哌酯所運用的輔料也存在不同，所選流動相可避免輔料干擾，切實的滿足雜質分離的相關要求。

2.2 嚴格的進行破壞實驗

我國針對鹽酸黃酮哌酯的合成工藝主要是利用3－甲基黃酮－8－羧酸。針對此項合成工藝來說，其中主要的雜質主要有3－甲基黃酮－8－羧酸。由于3－甲基黃酮－8－羧酸是最初的合成工藝材料，使得3－甲基黃酮－8－羧酸是可以降解的物質，更是降解的主要物質。與此同時，在開展破壞實驗的過程中，很有可能在原料精制工序與精制溶劑發生反映，還有可能與溶質產生反應。由于鹽酸黃酮哌酯具有強大的穩定性，在光照、氧化、酸性環境下，對于鹽酸黃酮哌酯的影響并不明顯[4]。但是需要注意的是在堿性環境對鹽酸黃酮哌酯的影響。

2.3 高效的確定雜質譜及雜質限度

在開展鹽酸黃酮哌酯檢定的過程中，必須嚴格的按照我國和國外的藥典進行對照，并針對高效液相色譜－質譜的各個環節進行明確把握。筆者針對6（A、B、C、D、E、F）個廠家所生產的鹽酸黃酮哌酯的有關物質，利用高校色相普法進行有效的檢定，其結果見表。在確認出鹽酸黃酮哌酯的主要雜質為3－甲基黃酮－8－羧酸（雜質A）、3－甲基黃酮－8－羧酸甲酯（雜質B）、3－甲基黃酮－8－羧酸乙酯（雜質C），應該積極的保障檢驗過程與推論出的雜質一致。嚴格的結合我國相關的藥典以及檢測的要求，總結出產生雜質的原因。就我國當前制藥工作來看，導致出現雜質的原因，主要便是在制藥的工序中，各個制藥環節原料和生產工藝而導致的雜質。筆者結合我國藥典規定和樣品檢驗結果，總結出鹽酸黃酮哌酯中3－甲基黃酮－8－羧酸雜質不應該超出總的0.5%；3－甲基黃酮－8－羧酸甲酯不應該超過總和的0.1%；3－甲基黃酮－8－羧酸乙酯不應該超過總和的0.1%。

表 各廠家樣品有關物質測定結果

3.結語

總而言之，在鹽酸黃酮哌酯檢測的過程中，高效液相色譜法測定比傳統TLC檢測手段更加具有高效性。在高效液相色譜法測定的過程中，必須要合理的選擇色譜條件，結合檢驗的實際情況，嚴格的進行破壞實驗，并確定雜質譜及雜質限度，切實的檢測出鹽酸黃酮哌酯中的含量以及雜質，保障鹽酸黃酮哌酯的質量。

[1]沈丹丹，曾杰，梁涵雁，等.高效液相色譜法測定鹽酸黃酮哌酯原料和制劑中有關物質[J].中國藥業，2018(5).

[2]謝沐風.高效液相色譜法測定含量時關于確立色譜條件與溶液濃度的討論[J].中國藥品標準，2008，9(4):288-289.

[3]曾杰.鹽酸黃酮哌酯片有關物質考察[J].醫藥導報，2017，36(s1):104-105.

[4]許潔，周長朋，鄭文鳳，等.高效液相色譜-四極桿/線性離子阱質譜儀測定鹽酸黃酮哌酯中的1-(2-羥乙基)哌啶殘留[J].分析測試學報，2017(7):906-910.