可吸收防粘連液的生物安全性評價

（1廣西壯族自治區(qū)醫(yī)療器械檢測中心 廣西 南寧 530022）（2廣西壯族自治區(qū)食品藥品審評查驗中心 廣西 南寧 530029）（3廣西壯族自治區(qū)醫(yī)療器械檢測中心 廣西 南寧 530022）

方珍文1 熊釗2 李旻（通訊作者）3

近年來隨著醫(yī)療技術(shù)的發(fā)展和人們對醫(yī)療服務(wù)質(zhì)量的需求不斷提升，藥品的安全問題也逐漸得到人們的關(guān)注和重視。可吸收防粘連液是臨床常用的抗腫瘤、抑菌和增強(qiáng)免疫功能的制劑，其中含有的褐藻在應(yīng)用后能夠被生物酶解反應(yīng)提取出海藻酸鈉和褐藻寡糖等有效成分，進(jìn)而發(fā)揮多種生物學(xué)作用。但是可吸收防粘連液的生物安全性仍需要進(jìn)一步探討，以期能夠為臨床推廣和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。鑒于此，本研究參照《醫(yī)療器械生物學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)匯編》[1]展開實驗，評價其生物安全性，詳情報道如下。

1.資料與方法

1.1 一般資料

取50只昆明小鼠，雌雄各半，購自廣東省醫(yī)學(xué)動物實驗中心，動物合格證號：No44007200047175，生產(chǎn)許可證號：SCXK(粵)2013-0002，SPF級喂養(yǎng)。可吸收防粘連液購自中英阿諾康生物科技有限公司，批號：201712045。

1.2 方法

熱原試驗、急性全身毒性試驗、遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗、遺傳毒性試驗：將待檢測樣品與生理鹽水按照1∶2比例稀釋并混合均勻，配置終濃度設(shè)定為0.1g/ml，在36～38℃條件下浸提72h，將無菌無熱原的生理鹽水作為浸提介質(zhì)，參照文獻(xiàn)[1]進(jìn)行熱原試驗、急性全身毒性試驗、遲發(fā)型超敏反應(yīng)試驗、遺傳毒性試驗，觀察結(jié)果。

細(xì)胞毒性試驗：參照上述操作制作試驗溶液，取稀釋溶液采用完全培養(yǎng)基在36～38℃條件下浸提24h，參照MTT方法進(jìn)行細(xì)胞毒性實驗。

溶血試驗、植入試驗：參照文獻(xiàn)[1]進(jìn)行溶血試驗，將溶血率＜5%者記為無溶血反應(yīng)；植入試驗需要將PE軟管作為載體，表面附著待檢測樣品，觀察是否有局部生物學(xué)反應(yīng)。

亞慢性毒性試驗：將實驗小鼠分為兩組（每組15只小鼠），試驗組腹腔注射液藥品稀釋液（濃度為0.1g/ml），劑量為0.1ml/kg，連續(xù)90d，對照組腹腔注射等劑量的無菌生理鹽水。檢測注射后兩組小鼠體質(zhì)量、血常規(guī)、血清堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血鉀和肝臟質(zhì)量指數(shù)等指標(biāo)。

1.3 觀察指標(biāo)

觀察各種生物安全性實驗結(jié)果；

對比試驗組和對照組上述指標(biāo)間差異。

1.4 統(tǒng)計學(xué)分析

本研究統(tǒng)計學(xué)分析工具為SPSS19.0，利用其中的t檢驗計量（±s）資料，P＜0.05可認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2.結(jié)果

2.1 各種生物安全性實驗結(jié)果

該材料無致熱性，細(xì)胞毒性1級，無急性全身毒性反應(yīng)，無遲發(fā)型超敏反應(yīng)，無遺傳毒性，樣品溶血率為3.2%，皮下植入后局部無異常生物學(xué)反應(yīng)。

2.2 亞慢性毒性試驗結(jié)果

試驗組堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血鉀和均低于對照組，肝臟質(zhì)量指數(shù)高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；試驗組血常規(guī)檢查和體質(zhì)量與對照組均無顯著性差異（P＞0.05），見表1。

表1 試驗組和對照組亞慢性毒性試驗結(jié)果對比（±s）

表1 試驗組和對照組亞慢性毒性試驗結(jié)果對比（±s）

組別 n 堿性磷酸酶（U/L） 丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（U/L） 血鉀（mmol/L） 肝臟質(zhì)量指數(shù)試驗組 15 81.2±7.4 31.0±3.0 5.2±0.4 2.6±0.4對照組 15 113.8±8.2 45.2±3.2 5.8±0.4 2.3±0.3 t 11.431 12.538 4.108 2.324 P 0.000 0.000 0.000 0.028續(xù)表：組別 n 血紅蛋白（g/L） 紅細(xì)胞計數(shù)（×1012/L）紅細(xì)胞比容（L/L）平均紅細(xì)胞容積（fl）平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（g/L）網(wǎng)織紅細(xì)胞計數(shù)（×1010/L）白細(xì)胞計數(shù)（×109/L） 體質(zhì)量（g）試驗組 15 142.3±10.1 8.4±0.4 40.8±2.6 48.2±3.2 36.3±3.0 26.2±2.8 7.7±1.5 23.2±2.6對照組 15 142.0±10.4 8.5±0.4 40.7±2.3 48.0±3.3 36.4±3.1 26.4±2.7 7.5±1.4 23.0±2.5 t 0.080 0.685 33.360 0.169 0.036 0.199 0.378 0.215 P 0.937 0.499 0.000 0.867 0.972 0.844 0.709 0.832

3.討論

可吸收防粘連液具有廣泛的生物學(xué)作用，經(jīng)過機(jī)體吸收和分解后可出現(xiàn)海藻酸鈉和褐藻寡糖，其中前者屬于一種天然的高分子聚合物，具有良好的生物相容性，且毒性較低，來源廣泛，常被用作輔料在生物制藥行業(yè)應(yīng)用；后者具有多種生物學(xué)作用，不僅能夠發(fā)揮抗腫瘤的效應(yīng)，并且還可增強(qiáng)機(jī)體免疫功能[2-3]。但是關(guān)于該藥物的生物安全性的認(rèn)識和研究仍尚淺，需要進(jìn)一步探討才能為生物制藥和臨床用藥提高良好的保證，具有重要的現(xiàn)實意義。

本研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)，該材料無致熱性，細(xì)胞毒性1級，無急性全身毒性反應(yīng)，無遲發(fā)型超敏反應(yīng)，無遺傳毒性，樣品溶血率為3.2%，皮下植入后局部無異常生物學(xué)反應(yīng)，可知可吸收防粘連液生物安全性理想；此外，試驗組堿性磷酸酶、丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶、血鉀和均低于對照組，肝臟質(zhì)量指數(shù)高于對照組，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）；試驗組血常規(guī)檢查和體質(zhì)量與對照組均無顯著性差異（P＞0.05），可知可吸收防粘連液可能會損傷肝臟功能，造成肝臟異常增生或者腫大，但是對血常規(guī)和體質(zhì)量均無明顯的不良影響。在生物制藥的過程中需要考慮采用其他輔料中和可吸收防粘連液的肝臟毒性，在臨床中應(yīng)用的過程中需要對患者加強(qiáng)肝臟功能監(jiān)測，定期檢測肝功能指標(biāo)，定期進(jìn)行影像學(xué)檢查觀察肝臟的形態(tài)和結(jié)構(gòu)是否出現(xiàn)嚴(yán)重改變，必要時給予保肝護(hù)肝治療[4-5]。此外，本研究結(jié)果還提示，對于存在肝臟損害或者肝功能障礙的患者建議盡量避免使用可吸收防粘連液，以免導(dǎo)致肝臟出現(xiàn)不可逆損傷。由此可知，可吸收防粘連液雖然具有良好的生物安全性，但是有可能會損害肝臟的結(jié)構(gòu)和功能，對生物制藥和臨床應(yīng)用均具有良好的指導(dǎo)作用。

綜上所述，可吸收防粘連液具有良好的生物安全性，但是可能會造成肝功能損害，并且導(dǎo)致肝臟的結(jié)構(gòu)和功能出現(xiàn)異常，因此在生物制藥和臨床治療過程中均需要引起高度的重視，才能保證藥品的安全性。

[1]中國標(biāo)準(zhǔn)出版社第一編輯室.醫(yī)療器械生物學(xué)評價標(biāo)準(zhǔn)匯編[M].中國標(biāo)準(zhǔn)出版社，2003:107-109.

[2]張巖，鄭紫燕，張曉敏.可吸收防粘連液的生物安全性評價[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志，2017，39(11):1025-1027.

[3]李安雪.褐藻膠裂解酶基因工程菌的高密度培養(yǎng)與褐藻水解產(chǎn)物的應(yīng)用研究[D].上海海洋大學(xué)，2013.

[4]吳奧麗，鄭利強(qiáng).羧甲基纖維素鈉凝膠載體的制備及其控制釋放作用的研究[J].中國洗滌用品工業(yè)，2016，16(2):66-70.

[5]付凌云，劉小紅，文波，等.可吸收防粘連液對大鼠實驗性腹壁粘連的抑制作用[J].貴州醫(yī)科大學(xué)學(xué)報,2015,40(3):237-240.