液相色譜法測定大米中芐嘧磺隆不確定度的評定

◎ 李 璟，申 瑤

（江蘇省無錫市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)院，江蘇 無錫 214101）

芐嘧磺隆是一種選擇性內(nèi)吸傳導(dǎo)型除草劑，對小麥、水稻等作物安全性好。在麥田使用，能有效防除豬殃殃、繁縷、碎米薺、播娘蒿、薺菜、大巢菜、藜和稻槎菜等闊葉雜草。對眼睛、皮膚和黏膜有刺激作用，沒有專門的解毒藥，需用水沖洗皮膚和黏膜，如攝入需催吐。

本文參照行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T 2212-2008《進(jìn)出口糧谷中芐嘧磺隆殘留量檢測方法 液相色譜法》[1]測定大米中芐嘧磺隆，并參照J(rèn)JF1059.1-2012《測量不確定度評定與表示》[2]對其測定進(jìn)行了不確定度評定。對于檢測結(jié)果達(dá)到標(biāo)準(zhǔn)要求，給出定量的分析，檢測的最終結(jié)果有效、可靠，作為化驗(yàn)室芐嘧磺隆檢測結(jié)果準(zhǔn)確性評價(jià)的一個(gè)重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)對進(jìn)一步完善大米中芐嘧磺隆的質(zhì)量控制體系和實(shí)驗(yàn)室管理具重要意義。

1 試驗(yàn)部分

1.1 儀器及試劑

美國Agilent 1200液相色譜儀，配置DAD檢測器。芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品：由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所提供，具有溯源性，其濃度為100 μg/mL，不確定度為 ±0.11 μg/mL。

乙腈（色譜純）；甲醇（分析純）；二氯甲烷（分析純）；正己烷（分析純）；4%氯化鈉水溶液（分析純）；氟羅里硅土固相萃取柱（6 mL）；C18固相萃取柱（3 mL）。

芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)工作液：取適量芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)溶液，用乙腈配制成1 μg/mL。

1.2 測量條件

流動(dòng)相：乙腈+水（40+60）；柱溫：30 ℃；流速：1.0 mL/min；進(jìn)樣量：10 μL；檢測器：DAD檢測器；色譜柱：Agilent XDB-C18，4.6 mm×150 mm，5 μm；檢測波長：238 nm。

1.3 樣品處理

在規(guī)定的環(huán)境條件下，取10 g（精確到0.01 g）大米置于錐形瓶中，加入二氯甲烷溶液振蕩提取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用4%氯化鈉水溶液溶解提取物，再用正己烷溶液萃取，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干，用水溶解，過C18固相萃取和氟羅里硅土固相萃取柱凈化，用甲醇洗脫，氮吹，加1.0 mL流動(dòng)相溶解提取物過0.45μm膜，上液相色譜測定。

1.4 數(shù)學(xué)模型

大米中芐嘧磺隆檢測是用液相色譜外標(biāo)法確定，其數(shù)學(xué)模型為：

其中：X為樣品中芐嘧磺隆殘留量，單位為mg/kg；C為基準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)溶液中待測物的濃度，單位為μg/mL；V為樣品溶液最終定容體積，單位為mL；m為樣品溶液所代表的樣品質(zhì)量，單位為g；Ai為樣液中待測物的峰面積；AS為基準(zhǔn)標(biāo)液中待測物的峰面積。

1.5 方差和傳播系數(shù)

為不確定度合成的計(jì)算方便，用相對不確定度表示各分量的標(biāo)準(zhǔn)不確定度，合成后再換算成絕對不確定度。

2 確定度主要來源

本測量結(jié)果不確定度主要來源于以下分量：①測量結(jié)果的重復(fù)性urel(X)。②由標(biāo)準(zhǔn)使用液濃度引入的不確定度ucrel(C)。③樣品稱量引入的不確定度ucrel(m)。④樣品定容不確定度ucrel(V)。

3 逐項(xiàng)評定標(biāo)準(zhǔn)不確定度

3.1 A類不確定度評定

測量結(jié)果的重復(fù)性分量評定。在相同條件下，同一試樣重復(fù)測量8次，結(jié)果見表1。

表1 樣品測定結(jié)果表

測量結(jié)果重復(fù)性引入的不確定度為：

代入數(shù)據(jù)得：

3.2 B類不確定度評定

3.2.1 標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液產(chǎn)生的不確定度

標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液產(chǎn)生的不確定度包含了標(biāo)準(zhǔn)品不確定度和配制標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液產(chǎn)生不確定度。

3.2.1.1 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的不確定度

芐嘧磺隆標(biāo)準(zhǔn)品由農(nóng)業(yè)部環(huán)境保護(hù)科研檢測所提供，具有溯源性，其濃度為100 μg/mL，不確定度為±0.11 μg/mL。因此，標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度為：

3.2.1.2 標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液的不確定度

按JJG l96-2006《常用玻璃量器》[3]規(guī)定，配制儲(chǔ)備液及標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液中各容器引入的不確定度如表

2， 20 ℃時(shí)取均勻分布。

表2 各容器產(chǎn)生的不確定度表

配制儲(chǔ)備液及標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液產(chǎn)生不確定度：

實(shí)驗(yàn)室溫度變化介于18～22 ℃，由溫度的變動(dòng)引入的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度的相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度完全可以忽略不計(jì)。

故標(biāo)準(zhǔn)基準(zhǔn)使用液產(chǎn)生的不確定度為：

3.2.2 由樣品質(zhì)量（m）引入的不確定度

用精確至0.01 g天平準(zhǔn)確稱取大米樣品10.00 g，所用天平最大允許誤差為±0.05 g，屬均勻分布，即：

3.2.3 樣品定容體積（V）不確定度

本方法最終樣液體積為1.0 mL，依據(jù)JJG 196-2006《常用玻璃量器檢定規(guī)程》[3]規(guī)定，標(biāo)稱容量為1 mL、分離量為0.01 mL的移液管的允差為±0.008 mL，正態(tài)分布，以99%概率計(jì)，樣品定容不確定度為：

3.3 合成相對標(biāo)準(zhǔn)不確定度的計(jì)算

3.4 擴(kuò)展不確定度的計(jì)算

大米中芐嘧磺隆殘留量測定測量結(jié)果擴(kuò)展不確定度計(jì)算結(jié)果如下，

3.5 含量結(jié)果表示

X=0.011 3 mg/kg±0.000 5 mg/kg，則大米中芐嘧磺隆殘留測量結(jié)果為（0.011 3±0.000 5）mg/kg。

4 結(jié)果與討論

從各不確定度分量值可以看出，液相色譜儀測量結(jié)果重復(fù)性urel(x)占總不確定度比例最大，其次是標(biāo)準(zhǔn)溶液引入的不確定度和定容體積的不確定度，樣品稱樣量的不確定度所占比例小，幾乎可以忽略。由此可以看出，在做大米中芐嘧磺隆分析測定時(shí)，對其分析檢測結(jié)果準(zhǔn)確性影響最大的是液相色譜DAD檢測器的準(zhǔn)確性（包括色譜條件、色譜柱、檢測器的靈敏度等）、檢驗(yàn)人員對其前處理過程平行性的熟練的控制。該法的擴(kuò)展相對不確定度能控制在比較低即4.06%，完全滿足檢測要求。本文為本實(shí)驗(yàn)室今后在該類項(xiàng)目檢測過程控制提供了參照，同時(shí)也指出了保證檢測結(jié)果準(zhǔn)確的關(guān)鍵點(diǎn)，為以后的檢測工作提供一定的技術(shù)基礎(chǔ)。