◎ 朱建恩
(廣東產品質量監督檢驗研究院,廣東 佛山 528300)
我國是一個農業大國,隨著人們生活水平的不斷提升,食品安全問題逐漸成為普遍關注的話題。近年來,我國人口持續增長,農業種植面積也得到擴張,隨之而來的便是果蔬質量問題。農業生產中,農藥是必不可少的化學藥品,其使用程度的增加,嚴重危害了蔬菜質量、糧食產量。農藥的過度使用,導致其在蔬菜中形成殘留,繼而引發中毒的現象,這是當前非常嚴重的問題,必須應用農藥殘留快速檢測技術加以解決。
當前農藥殘留最為嚴重的是蔬果殘留,比較常見的農藥有有機磷農藥、氨基甲酸酯農藥等。其中,有機磷農藥若在種植中使用不規范或者頻率過高,會影響蔬果質量,因此農藥殘留檢測的重點便是有機磷、氨基甲酸酯這兩類農藥。
一般檢測時比較常用方法包括酶抑制法、免疫分析法、生物傳感器法、酶抑制分光光度法。酶抑制通過是通過有機磷與氨基甲酸酯農藥本身所帶有的可特異性,抑制昆蟲中樞神經系統中的乙酰膽堿酯酶活性,使其無法正常傳導,最終中毒而死。一般實驗過程中,通過堿酯酶、有機磷(氨基甲酸酯農藥)之間的反應抑制酶活性,使用膽堿酯酶將靛酚乙酸酯進行水解,使其在催化作用下成為乙酸、靛酚,從而對樣品內是否有農藥殘留進行判斷[1]。
常用的農藥殘留速測儀以多通道光路設備為主,該設備可以同時檢測若干個樣品,且操作簡單、成本低,檢測完畢之后可以直接顯示出檢測結果,并且具備數據接口。此外,農藥殘留檢測實驗過程中,比較常用的設備也包括安鑫寶WT-51A、歐達科儀PR-202、CNY-817C等。試劑以酶為主,如乙酰膽堿酯酶(AChE),底物則多使用硫代乙酰膽堿、碘化代丁酰膽堿、碘化硫代乙酰膽堿。顯色劑主要是二硫代二硝基苯甲酸、2,6-二氯靛酚。經過一段反應時間之后通過分光光度法,按照吸光值的變化,計算ChE抑制率,根據最終計算結果判斷有機磷氨基甲酸酯農藥的殘留量[2]。抑制率如果≥50%,且呈陽性,則可以判定其超標。如果檢驗時使用比色法,也就是分光光度法,其檢出限時間以3 min為準。
蔬菜中一旦有農藥殘留,必然會影響人們的身體健康,必須使用可行的檢測技術展開農藥殘留檢測,檢驗蔬菜是否符合食品安全標準,從根本上解決食品安全問題。現如今,農藥檢測所使用的方法主要有生物測定法、化學分析法、生物與化學相融合的綜合檢測法,這3種方法可以更加準確且全面地檢測、分析蔬菜中農藥殘留。所選擇的檢測技術不同,操作方式也不盡相同。為了快速、準確的完成蔬菜農藥殘留檢測,檢測人員必須選擇最合適的快速檢測技術。同時,實際選擇過程中,必須要對蔬菜特性進行考慮[3]。蔬菜的儲存時間較短,檢測期間務必要提高效率,在有限的時間內快速、高效地完成檢測。所以,此次分析中主要圍繞酶法快速檢測技術展開分析。實際檢測時,農藥殘留快速檢測流程分為采樣、提取液、選擇實驗試劑、明確靜置時間、確定檢測時間這幾個步驟。
所選擇的葉類蔬菜主要選取葉尖部分,果菜選取果皮,使用剪刀將其剪為1 cm左右的試樣,重量以2 g為最佳。針對汁液內包含酶破壞性、深色物質褪色元素的果蔬(如辣椒、蘿卜、番茄)以及可以使最終結果呈現假陽性的蔬菜(如芹菜),取樣時需要將整株浸泡于器皿中,或者采用淋噴的方式。
使用提取液來提取樣品內農藥溶解,提取時間以2~10 min為最佳。
蔬菜農藥殘留快速檢測中比較常用的快速檢測試劑有提取液、酶底物以及顯色劑。一般所采用的試劑均是從儀器的生產廠家直接選購、配送[4]。
靜置時間是摻入酶與顯色劑之后到摻入底物中的時間。實驗過程中發現,靜置時間如果維持在6~12 min,最終獲得的檢測結果并不明顯差異。
檢測時間是比色皿放置于比色池中,將蓋板蓋在上方,按下啟動鍵直到顯示最終檢測結果的這一段時間,一般設置為3 min。
使用酶法進行蔬菜農藥殘留快速檢測,其適用范圍包括葉菜類、果菜類、瓜菜類等,這些種類的蔬菜中含有有機磷類以及氨基甲酸酯類農藥殘留,有機磷類農藥主要包括倍硫磷、氧化樂果和辛硫磷,而氨基甲酸酯類農藥則包括殘殺威、克百威、速滅威以及滅多威。
檢測設備包括GDYN-110SB型農藥殘毒快速檢測儀、天平、振蕩器、魄力器皿、檢測酶、移液槍、緩沖液、底物與顯示器等。當完成設備的準備工作之后,必須處理實驗所需樣品,將準備好的蔬菜樣品稱取1 g放置于燒杯內,并且在燒杯中注入5 mL緩沖液,以濕震蕩法持續60~120 s,將提取液倒出之后靜置3~5 min即可。
在干試管內放入容量為2.5 mL的樣品提取液,選擇相對應的對照液,分別在樣品提取液和對照液中注入0.1 mL的酶液與顯色劑,將試管搖晃均勻之后,放置在溫度為37 ℃的恒溫箱內15 min,隨后在試管內注入容量為0.1 mL的底物,隨后觀察顯色是否出現反應,放置到快速檢測儀器內,根據儀器操作要求完成蔬菜農藥殘留快速檢測工作。
最終所得出的結果判斷可以通過抑制率進行判斷:

公式中,Δ0代表對照液反應3 min之后,吸光度所呈現的變化值,Δt是3 min之后樣品所呈現的吸光度變化值。
對最終檢測結果進行分析,以抑制率為最終結果,設置50%為界限。若蔬菜樣品計算后的抑制率<50%,證明蔬菜農藥殘留率滿足食品安全要求,即蔬菜樣品安全;若≥50%且多次試驗之后結果依然不變,則證明蔬菜樣品農藥殘留超標,即蔬菜本身不安全。為了深入展開殘留超標樣品,建議試驗氣相色譜儀以及高效液相儀這兩個設備展開詳細檢測,如此便可以得知蔬菜內農藥殘留含量。
通過上述分析可知,使用酶法可以快速且高效地完成蔬菜農藥殘留快速檢測,試驗所消耗的時間小于20 min,且經過驗證最終試驗準確性較高,可以保證檢測后蔬菜安全性。
蔬菜農藥殘留快速檢測是保證蔬菜食品安全以及人體健康的重要舉措,應用可行的蔬菜農藥殘留快速檢測技術,有利于解決市場上蔬菜農藥殘留問題,并且推動我國農業發展。