鹽酸阿拉莫林固有溶出度及體外溶出研究

劉婧

摘 要 選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，采用光纖固有溶出度實時測定系統測定了鹽酸阿拉莫林在4種介質中的固有溶出度。并制備了鹽酸阿拉莫林片劑，進行了4種介質中的溶出試驗。結果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的介質和水中，鹽酸阿拉莫林的固有溶出度分別為25.27、23.48、25.58、27.30 mg/（cm2·min），>1 mg/（cm2·min），提示溶出不會成為藥物吸收的限速過程。阿拉莫林片在4種介質中均為快速溶出，溶出速度：水>pH 6.8介質>pH 1.2介質>pH 4.5介質，與固有溶出度測定大小順序相同。結果顯示，固有溶出度能夠在一定程度上預測藥物從片劑中溶出的行為，為藥物的劑型選擇和處方設計提供參考。

關鍵詞 鹽酸阿拉莫林 固有溶出度 轉盤法 溶出

中圖分類號：R927.11 文獻標志碼：A 文章編號：1006-1533（2018）11-0093-05

Intrinsic dissolution of anamorelin hydrochloride and its dissolution study

LIU Jing

（Research Institute， Shanghai Pharmaceuticals Holding Co.， Ltd.， Shanghai 201203， China）

ABSTRACT Anamorelin hydrochloride was selected as a model drug and its intrinsic dissolution in four media was determined by an optical fiber intrinsic dissolution real-time measurement system. The dissolution test of home-made anamorelin hydrochloride tablets was performed in four media. The results showed that its intrinsic dissolution was 25.27， 23.48， 25.58， 27.30 mg/（cm2·min） in pH 1.2， pH 4.5， pH 6.8 media and water， respectively， suggesting that the dissolution would not be the limit in drug absorption. Anamorelin tablets could be rapidly dissolved in all four media and its dissolution rate was the fastest in water following by in pH 6.8， pH 1.2 and pH 4.5 media with the same rank as the measurement of intrinsic dissolution， which suggested that intrinsic dissolution test could predict the dissolution of drug from tablets to some extent and could provide a reference for the formulation selection and prescription design of drugs.

KEy WORDS anamorelin hydrochloride； intrinsic dissolution； rotating disk system； dissolution

傳統的溶解度測定方法直接測定不同溶劑中藥物的飽和濃度，這些方法能夠比較直觀地測得藥物的溶解度，但在評價藥物的生物利用度方面，存在一定的局限[1]。固有溶出度（intrinsic dissolution rate，IDR）通常表述為單位時間內單位面積的溶質在特定介質中出現的溶質的量，能夠動態地反映藥物在溶出介質中的溶解行為，可用于藥物的生物藥劑分類系統（biopharmaceutics classification system， BCS）中溶解性判斷[2]，為新藥的研發提供參考[3]，也可作為控制藥物質量的手段用于藥物生產過程中[4]。目前美國藥典收載的IDR測定法包括轉盤法（rotating disk system）和定盤法（stationary disk system）。測定時需要定時取出部分溶出介質檢測藥物濃度，由于取樣檢測需要一定的操作時間，對于快速溶出的藥物，可能不能準確地測定其固有溶出曲線。光纖固有溶出度測定系統采用光纖探頭直接測定溶出杯內藥物濃度，采樣時間可縮短至5 s并能實時顯示測定數值，能夠更準確地測得藥物在較短的溶出過程中的實時溶出速率變化[5]。鹽酸阿拉莫林為口服饑餓素的類似物，用于增加癌癥晚期惡病質患者的體重[6-7]。該藥物在水中具有較大的溶解度，適合采用光纖實時測定法測定IDR。本實驗選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，進行不同介質中的IDR測定，并制備片劑，進行體外溶出度測定，考察IDR與溶出度的相關性，評價IDR作為處方前研究手段預測藥物溶出情況的可行性。

1 材料與方法1.1 材料與設備

鹽酸阿拉莫林（自制，批號543-12）；微晶纖維素（FMC Corporation，PH102）；乳糖（DFE Pharma，GR30）；羥丙纖維素（信越化學工業株式會社，LH-21）；硬脂酸鎂（海鹽六和藥業有限公司）；Focs Fodt-101G光纖藥物固有溶出度實時測定系統（上海富科思分析儀器有限公司）；Focs Favd-25智能真空脫氣儀（上海富科思分析儀器有限公司）；UV1700 UV-Vis Spectrophotometer（Shimadzu Corporation）；DP30A單沖壓片機（國藥龍立科技有限公司）；YD-35片劑硬度儀（天大天發科技有限公司）；AT 7-Smart溶出儀（Sotax AG）；CPA225D電子天平（Sartorius Corporate）；BSA4020SCW電子天平（Sartorius Corporate）。

1.2 方法

1.2.1 溶出介質配制

pH 1.2介質：量取鹽酸7.65 ml，加水稀釋至1 000 ml；pH 4.5介質：稱取乙酸鈉18 g，加入冰醋酸9.8 ml，加水稀釋至1 000 ml；pH 6.8介質：稱取磷酸二氫鉀6.8 g，氫氧化鈉0.94 g，加水稀釋至1 000 ml。以上介質所用的純水經真空脫氣30 min。

1.2.2 鹽酸阿拉莫林IDR測定

1.2.2.1 測定波長的選擇

稱取鹽酸阿拉莫林10 mg，置100 ml量瓶中，分別用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的介質和水定容，制成100μg/ml的對照溶液。光纖藥物固有溶出度測定儀選擇標準曲線測定模式，選用2 mm探頭，將探頭裝入光纖傳感器下端，分別采用相應的空白溶劑作為空白對照，掃描220～600 nm波長吸收光譜。

1.2.2.2 IDR測定

采用1.2.2.1中的對照溶液，光纖藥物固有溶出度測定儀選擇標準曲線測定模式，選用2 mm探頭，以相應的溶劑為空白對照，選用550 nm為參比波長，在1.2.2.1選定的波長下測定吸收度，使用系統自帶軟件按照單點法計算標準曲線。將700 ml溶出介質裝入溶出杯中，并加熱至37 ℃。稱取阿拉莫林100 mg，置8 mm壓片模具中，采用測定系統配置的壓片裝置將粉末壓片，壓力 150 kg，時間3 min，重復3次，將壓成片的藥物連同模具裝入連接套，并將連接套裝在轉軸下端，使壓制成片的藥物僅有一面可以接觸溶出介質，并使探頭位置與藥物表面位于同一高度，儀器選用溶出測定模式，將模具及探頭浸入溶出杯中，轉軸轉速300 r/min，選用550 nm為參比波長，在1.2.2.1中選定的波長下測定實時吸光度，系統自動代入標準曲線計算溶出量，待藥物完全溶出后停止試驗。試驗中藥物應從片面逐漸溶出，不應有藥物呈塊狀或片狀進入溶出介質中。分別在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質中進行測定。

1.2.3 鹽酸阿拉莫林片溶出

1.2.3.1 鹽酸阿拉莫林片制備

按表1處方制備50 mg規格的鹽酸阿拉莫林片，共制成100片。將藥物與輔料混合后過50目篩3次，袋混5 min，制成總混物料。總混物料采用直接壓片法，使用單沖壓片機壓成直徑8.5 mm淺圓片。

1.2.3.2 鹽酸阿拉莫林片溶出

標準曲線測定：稱取鹽酸阿拉莫林100 mg，置100 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，作為母液，取5.0 ml，置50 ml量瓶中，分別用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8的溶出介質和水稀釋至刻度，分別取1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml，置10 ml量瓶中，用相應的緩沖液稀釋至刻度，制成濃度為0.01、0.02、0.04、0.06和0.08 mg/ml的供試液，于1.2.2.1選定波長處測定吸收度，以吸光度A對濃度C（mg/ml）繪制標準曲線，計算相關系數。

精密度考察：取標準曲線測定所配制0.06 mg/ml溶液作為樣品，重復測定吸收度6次，計算RSD。

穩定性考察：取精密度測定樣品，分別于0、2、4、6 h測定吸收度，考察藥物含量的變化情況。

回收率考察：分別選用pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8溶出介質和水為溶劑，每個溶劑下精密稱定按處方配制的空白輔料6份，分別置100 ml量瓶中，加入適量相應溶劑，超聲5 min后，分別加入鹽酸阿拉莫林50 mg，加入相應溶劑稀釋至刻度，過4.5 μm水系濾膜，并棄去初濾液約2 ml，精密量取續濾液1.0 ml，置10 ml量瓶中，加相應溶劑稀釋至刻度，配制成相當于溶出濃度100%的供試品，于1.2.2.1選定的波長處測定紫外吸收度，計算回收率。

含量測定：取鹽酸阿拉莫林片10片，研磨后稱取適量粉末，使其含有標示量的鹽酸阿拉莫林，置100 ml量瓶中，加入適量水，超聲5 min后，加水稀釋至刻度，過4.5 μm水系濾膜，并棄去初濾液約2 ml，精密量取續濾液1 ml，置10 ml量瓶中，加水稀釋至刻度，于選定波長處測定紫外吸收度，計算含量。

溶出度測定：采用《中華人民共和國藥典（2015版）》溶出度測定法第二法，轉速50 r/min，分別在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8介質和水中測定溶出度。于第5、10、15、20、30、45、60、90 min取樣10 ml，補液10 ml，樣品進行紫外分光光度法測定。

2 結果

2.1 固有溶出度測定

2.1.1 測定波長的選擇

根據掃描結果，在4種溶出介質中，鹽酸阿拉莫林均在280 nm處有最大吸收，故選擇280 nm為測定波長。

2.1.2 IDR測定

在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8介質和水中，鹽酸阿拉莫林片在7～9 min完全溶出，溶出過程中無藥物散落的現象，選用1～7 min的數據計算平均溶出速率。

2.2 溶出度測定

2.2.1 片劑制備

按照1.2.3.1方法制備片劑，并進行含量和硬度測定，鹽酸阿拉莫林片含量99.2%（按50 mg標示量計算），平均硬度（7.38±0.41）kg。

2.2.2 溶出度測定

2.2.2.1 測定方法學考察

標準曲線相關性良好，方法精密度良好，樣品放置6 h吸收度RSD在2%以內，顯示在6 h內，溶液穩定性良好，回收率在95%～105%之間。標準曲線、精密度、穩定性及回收率結果見表3～表6。

2.2.2.2 溶出度測定結果

鹽酸阿拉莫林在4種溶出介質中的溶出曲線如圖2所示。

3 討論

本試驗選用鹽酸阿拉莫林為模型藥物，進行了IDR的測定，選用光纖實時測定系統，在測定過程中能夠實時觀測藥物的溶出情況，對于快速溶出的藥物，能夠在短時間內更精確地測出溶出量的變化。結果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質中，藥物的IDR分別達到 25.27、23.48、25.58和27.30 mg/（cm2·min），在不同的介質中略有差異，水>pH 6.8>pH 1.2>pH 4.5，4種介質中IDR均>1 mg/（cm2·min），表明藥物的溶出一般不會成為吸收的限速過程。另外，本試驗還制備了50 mg規格的片劑，進行了體外溶出試驗。制備片劑選用常用輔料，輔料用量均在常規范圍內，采用直接壓片方法，未對處方工藝進行加快或減慢溶出的設計。體外溶出結果表明，在pH 1.2、pH 4.5、pH 6.8和水這4種介質中，藥物均能較快地溶出，30 min內溶出>85%，且4條曲線差異較小，第二點起RSD<10%，溶出速率水>pH 6.8>pH 1.2>pH 4.5，與IDR順序相同，表明在本試驗中，IDR能夠反映在常規的處方工藝下制備的片劑的體外溶出行為。IDR能夠動態地反映藥物從固體狀態溶出的過程，比溶解度試驗能夠提供更多的信息，在處方前研究階段能夠在一定程度上預測藥物的溶出行為，為藥物的劑型選擇和處方設計提供參考。

參考文獻

[1] Li S， Wong S， Sethia S， et al. Investigation of solubility and dissolution of a free base and two different salt forms as a function of pH[J]. Pharm Res， 2005， 22（4）： 628-635.

[2] Zakeri-Milani P， Barzegar-Jalali M， Azimi M， et al. Biopharmaceutical classification of drugs using intrinsic dissolution rate （IDR） and rat intestinal permeability[J]. Eur J Pharm Biopharm， 2009， 73（1）： 102-106.

[3] Shekunov B， Montgomery ER. Theoretical analysis of srug sissolution： I. Solubility and intrinsic dissolution rate[J]. J Pharm Sci， 2016， 105（9）： 2685-2697.

[4] ？ehi？ S， Betz G， ？eherzada Had？idedi？， et al. Investigation of intrinsic dissolution behavior of different carbamazepine samples[J]. Inter J Pharm， 2010， 386（1-2）： 77.

[5] 耿晶， 張字城， 張海波， 等. 光纖傳感過程分析測定蒜氨酸固有溶出速率[J]. 藥學學報， 2014， 49（10）： 1475-1478.

[6] Currow D， Temel JS， Abernethy A， et al. ROMANA 3： a phase 3 safety extension study of anamorelin in advanced nonsmall-cell lung cancer （NSCLC） patients with cachexia[J]. Ann Oncol， 2017， 28（8）： 1949-1956.

[7] Garcia JM. Therapeutic potential of anamorelin， a novel， oral ghrelin mimetic， in patients with cancer-related cachexia： a multicenter， randomized， double-blind， crossover， pilot study[J]. Support Care Cance， 2013， 21（1）： 129-137.