不同生育期噴施禾稼春(含ALA肥料)對鳳丹果實發育及膨大的影響

曹 婧，吉 茹，何 冉，李俊達，王明珊，郭 源，祝有為，徐迎春

(南京農業大學 園藝學院，江蘇 南京 210095)

近年來研究發現，牡丹類植物的種子可以加工牡丹籽油，是一種富含不飽和脂肪酸的高營養價值和保健作用的食用油，其多項指標超過了“液體黃金”之稱的橄欖油[1-2]，具有較高的保健、營養價值和廣闊的市場前景。由此，生產中將以采收牡丹籽為目的的牡丹品種稱為油用牡丹。目前牡丹籽油生產原料的市場缺口很大，急需研究促進油用牡丹種子增產的技術。鳳丹(Paeoniaostii)為芍藥科芍藥屬多年生小灌木，其根系發達，抗逆性強，是目前油用牡丹的主栽品種，在全國多個省區均有種植[3]。由于鳳丹原來的生產目的為收獲根皮作為中藥材，生產上缺少種子豐產的栽培技術。

肥料已被證實是作物重要的增產措施，葉面肥因發揮肥效快，施用方法簡便、省工，是經濟作物生產上常用的施肥方法。禾稼春(含ALA肥料)是一種新興的氨基酸水溶性肥料，在多種園藝作物上已被證明可以促進作物增產和品質的提高。如：菠菜噴施60 mg/L的ALA可增加其葉長葉寬，提高總產量、單株重[4]；用300 mg/L的ALA處理兔眼藍莓，可提高葉片葉綠素含量，增加果實縱徑、橫徑、單果重和單株產量[5]。ALA的施用也可以使油麥菜[6]、番茄[7]產量增加，改善品質；增加棗果縱徑和橫徑，提高產量[8]；使辣椒[9]、大蒜[10]產量有所增加。由此可推測禾稼春的施用對鳳丹果實的產量和品質可能也有一定的效果，但具體噴施濃度以及施用效果尚未見報道。

因此，本試驗以五年生鳳丹植株為試材，2015年在鳳丹盛花期葉面噴施不同濃度的禾稼春(稀釋2000倍液、3000倍液、4000倍液)，觀測其果實膨大、敗育等變化情況。2016年繼續優化實驗處理，分別在鳳丹初花期、盛花期、坐果期3個不同時期葉面噴施不同濃度的禾稼春(稀釋2000倍液、3000倍液、4000倍液、5000倍液)，研究其對鳳丹果實發育及蓇葖果膨大的影響，以篩選出在鳳丹上施用禾稼春的適宜時期和濃度。

1 材料與方法

1.1 試驗地點

試驗設置在江蘇省南京市高淳區漆橋鎮雙牌石村南京市高淳區康之源牡丹科技有限公司油用牡丹基地。該地區地勢西低東高，西部為水網平原區，東部為低山丘陵區。屬北亞熱帶和中亞熱帶過渡季風氣候區，年降水量1157 mm，年平均氣溫15.9 ℃，四季分明，雨量充沛，光照充足，水源較好，農業資源豐富。

1.2 試驗材料

以五年生鳳丹植株為試材。試驗進行了兩年。禾稼春購于南京禾稼春生物科技有限公司。禾稼春氨基酸水溶性肥料是將微量ALA與植物生長發育所必需的多種營養元素組合在一起的水溶性葉面肥，由南京農業大學研發，其主要成分及含量：游離氨基酸≥10 g/L，微量營養元素≥20 g/L。

1.3 試驗處理

2015年在盛花期(2015年4月10日開始)進行禾稼春葉面噴施，施用濃度設置為：稀釋2000倍、3000倍、4000倍，以噴清水為對照(CK)。每隔7 d施用1次，共噴施2次。選株方式為：在田間隨機抽取一行中的10株作為對照組，隔行選取1組，共選取4組，共40株鳳丹，對每組進行編號，以供試驗。

2016年根據上一年的試驗結果，對試驗進行進一步的改善，分別于初花期(2016年3月23日～4月10日)、盛花期(2016年4月13日～4月30日)、坐果期(2016年5月7日～5月25日)3個時期，分別噴施禾稼春2000倍、3000倍、4000倍、5000倍液，以噴清水為對照(CK)。各時期選株方式同上，每個時期均噴施3次，噴施間隔約為一周。并且，對鳳丹葉片的部分生理生化特性進行測定，具體測定內容及方法如1.4所述。

1.4 取樣方法及測定內容

于2015年5月下旬鳳丹坐果期，每個處理隨機抽取3株，調查鳳丹的膨大情況(以照片為證)、蓇葖果的數量。于2016年5月下旬坐果期觀察鳳丹果實變化情況，2016年5月下旬調查各處理株果實的膨大情況(以照片為證)。

2015年統計了蓇葖果膨大的比率、敗育的比率。蓇葖果膨大比率采用隨機選株方式(3株)進行統計(相對于對照組果實更為膨大者計為膨大果實)，即所有測定的膨大果實占總測定果實數量比。果實敗育比率采用隨機選株方式(3株)進行統計，即所有測定的敗育果實數量占總測定果實數量比。

2016年6月16日分別對3個噴施時期每個處理中，隨機抽取3株采取葉片樣品，分別測定比葉重、葉綠體色素含量、葉片糖含量、葉片可溶性蛋白質含量。

比葉重的測定方法：選取各植株上生長優良的葉片進行相同數量打孔稱重，放入烘箱內24 h后，測得干重。計算比葉重(SLW)=葉干重/葉面積；葉綠體色素含量采用乙醇浸提法[10]，分光光度法測定；可溶性蛋白質含量采用考馬斯亮藍法測定[11]；糖含量采用蒽酮比色法測定[12]。

1.5 數據處理

采用Excel 2007和SPSS 20.0統計分析軟件進行數據處理、方差分析，平均值之間多重比較采用Duncan新復極差測驗，比較同一測定項目下，不同處理之間的差異。

2 實驗結果

2.1 鳳丹果實形態變化

由圖1可以看出：2015年盛花期葉面噴施2000倍的禾稼春，其果實直徑較對照組增大，蓇葖果變得更加飽滿；葉面噴施3000倍的果實直徑增加比較明顯，部分蓇葖果膨大效果較為突出；葉面噴施4000倍的果實直徑增加最大，蓇葖果的膨大效果最好。總體看出，盛花期噴施禾稼春對鳳丹果實的直徑有明顯的增加作用，其果實也有較為顯著的膨大。因此，在2015年試驗的基礎上，2016年對試驗進行優化。

由圖2可以看出，葉面噴施2000倍的禾稼春其果實直徑較對照組有了一定提升，但在蓇葖果膨大方面效果不明顯。噴施3000倍液的禾稼春果實直徑增加明顯，而且可以看出蓇葖果有明顯的膨大現象。葉面噴施4000倍禾稼春蓇葖果膨大最為明顯，其直徑也增加最多。在2016年的盛花期較2015年增加了5000倍液的葉面噴施，從圖2-E中可以看出其膨大效果與圖2-D中葉面噴施4000倍禾稼春的效果相似，果實直徑增加量相當。

通過兩年的盛花期葉面噴施試驗結果得出：葉面噴施禾稼春對鳳丹果實直徑和膨大有一定增加作用。葉面噴施稀釋2000倍～4000倍禾稼春中，促進作用按照稀釋倍數的增加呈現遞增趨勢，禾稼春稀釋5000倍液對果實的膨大和直徑的增加效果與稀釋4000倍液基本相同。因此可以說明在本實驗范圍(盛花期噴施)內，葉面噴施4000倍、5000倍禾稼春效果最佳。

A：對照組CK； B：稀釋2000倍液； C：稀釋3000倍液； D：稀釋4000倍液

除禾稼春盛花期噴施外，2016年還進行了鳳丹初花期以及坐果期的葉面噴施，以進一步篩選出最佳的噴施時期。

根據圖3初花期噴施效果看出：噴施2000倍禾稼春的果實直徑、膨大與對照組無明顯差異。葉面噴施3000倍禾稼春的果實直徑有一定增加，蓇葖果稍有膨大；葉面噴施4000倍禾稼春的果實直徑增加量與2000倍液效果相似；葉面噴施5000倍禾稼春的果實直徑增加量最大，但蓇葖果膨大效果依然不明顯。初花期噴施的整體效果不如盛花期。

A：對照組CK；B：稀釋2000倍液；C：稀釋3000倍液；D：稀釋4000倍液；E：稀釋5000倍液；

A：對照組CK；B：稀釋2000倍液；C：稀釋3000倍液；D：稀釋4000倍液；E：稀釋5000倍液

坐果期噴施效果如圖4所示：葉面噴施稀釋2000倍禾稼春的果實直徑增加量較多，且果實有明顯的膨大；葉面噴施稀釋3000倍液的蓇葖果膨大效果也十分明顯，果實直徑增加量與稀釋2000倍液基本持平；葉面噴施稀釋4000倍液與5000倍液的禾稼春使果實直徑有明顯的增加，但稀釋4000倍液的禾稼春蓇葖果膨大效果不如3000倍液的。

A：對照組CK；B：稀釋2000倍液；C：稀釋3000倍液；D：稀釋4000倍液；E：稀釋5000倍液

因此可以得出，葉面噴施禾稼春對鳳丹果實直徑和膨大有增加的效果。初花期最好的噴施濃度為稀釋5000倍的禾稼春，與對照組相比，果實直徑有一定的增加量，但蓇葖果膨大效果一般。盛花期與坐果期的噴施效果較初花期更好，相比于對照組，坐果期果實直徑增加量較大，其中葉面噴施稀釋2000倍液、3000倍液、5000倍液的禾稼春使蓇葖果膨大效果明顯。盛花期噴施的效果也較好，果實直徑的增加也很明顯，且每個噴施濃度下的果實均有較突出的膨大。所以，可以推測出，噴施和稼春后蓇葖果內種子變大。隨機抽取禾稼春處理過的鳳丹蓇葖果，剝開后發現其內部種子明顯變大，顆粒更加飽滿。

2.2 鳳丹果實發育狀況

2.2.1 鳳丹蓇葖果膨大比率及敗育比率 2015年分別對不同噴施濃度下鳳丹蓇葖果的膨大比率、敗育比率進行統計。通過數據統計(圖5)看出，與對照組相比，鳳丹蓇葖果膨大率均有所增加，同時，鳳丹果實的膨大比率隨著稀釋倍數的增加而降低，說明葉面噴施較高濃度的禾稼春促進蓇葖果膨大的概率較大。如圖6所示，葉面噴施不同濃度的禾稼春均降低了鳳丹果實的敗育比率，且隨著稀釋倍數的增加敗育比率降低，噴施稀釋3000倍液與4000倍液的禾稼春效果基本持平。由此可以得出，噴施較高濃度的禾稼春雖然在促進蓇葖果膨大率方面有更好的效果，但敗育果實的比例也較高。

圖5 2015年盛花期噴施不同濃度的禾稼春鳳丹的蓇葖果膨大比率情況

圖6 2015年盛花期噴施不同濃度的禾稼春鳳丹的蓇葖果敗育比率情況

通過對2015年鳳丹果實的敗育比率和膨大比率進行統計，發現葉面噴施禾稼春能明顯降低鳳丹果實的敗育比率，增加蓇葖果的膨大比率。所以，2016年未對鳳丹果實的敗育比率以及膨大比率進行統計。

2.2.2 鳳丹果實直徑變化情況 對2015年盛花期、2016年初花期、盛花期、坐果期噴施禾稼春對鳳丹果實直徑的變化情況進行了統計。由圖7得出，2015年鳳丹盛花期葉面噴施禾稼春能明顯促進鳳丹果實直徑增大，且隨稀釋倍數增加果實直徑增加量增加(相對于對照組)。由圖8看出，2016年葉面噴施禾稼春對鳳丹果實的直徑有不同程度的增加；盛花期果實直徑增長量為1.0～3.0 cm，且隨著稀釋倍數的增加，果實直徑增加量增大，與2015年試驗結果相似；坐果期噴施使果實直徑增加量為1.5～3.5 cm，其中稀釋4000倍液與5000倍液效果顯著。相較而言，圖8中初花期的果實直徑增長量較小，為0.5～2.0 cm，僅在稀釋5000倍液時效果較好。

圖7 2015年盛花期噴施禾稼春對鳳丹果實直徑的影響

2.3 噴施禾稼春對鳳丹植株生理生化特性的影響

由圖9看出，初花期噴施隨著稀釋倍數的增加，葉片比葉重隨之增加；盛花期噴施稀釋5000倍液禾稼春對葉片比葉重增加量影響較大；坐果期噴施禾稼春葉片比葉重增加較多，稀釋5000倍液與對照組有顯著性差異(P<0.05)。整體來看，噴施禾稼春對比葉重含量的增加以坐果期最為顯著。

從圖10看出，不同濃度以及不同時期噴施禾稼春后葉片葉綠素含量均有增加，但增加量各有不同。具體表現為：初花期噴施隨著稀釋倍數的增加葉綠體色素含量隨之增加；盛花期和坐果期噴施禾稼春后葉綠素含量的增加量(相對于對照組)均是先增加后減少。其中，盛花期噴施稀釋2000倍液、3000倍液、5000倍液和坐果期噴施5000倍液效果較好，均與對照組有顯著性差異(P<0.05)。

根據圖11葉片糖含量分析可以得出，噴施禾稼春后鳳丹葉片糖含量無明顯變化，說明噴施禾稼春對鳳丹葉片糖含量幾乎無影響。

如圖12所示，坐果期噴施不同濃度的禾稼春均使得葉片可溶性蛋白質含量增加，且與對照組相比有顯著性差異(P<0.05)。而初花期和盛花期的噴施，未使葉片的可溶性蛋白質含量有明顯的增加。

A：初花期處理；B：盛花期處理；C：坐果期處理

A：初花期處理；B：盛花期處理；C：坐果期處理

A：初花期處理；B：盛花期處理；C：坐果期處理

A：初花期處理；B：盛花期處理；C：坐果期處理

A：初花期處理；B：盛花期處理；C：坐果期處理

3 討論

禾稼春(含ALA肥料)作為一種具有多種生理活性的新型植物生長調節物質[13-14]，天然、無毒、可生物降解、對環境友好，可以滿足食品質量安全的要求。

2015年在鳳丹盛花期噴施禾稼春的試驗表明，2000～4000倍液均可明顯減少鳳丹果實的敗育率(圖6)，可能是由于肥料的噴施及時補充了受精后胚發育所需的營養，使果實能夠正常發育，降低了因養分不足而導致的果實敗育。

2015和2016年連續兩年噴施禾稼春的試驗結果表明，盛花期、坐果期噴施禾稼春均可促進鳳丹蓇葖果膨大，其中坐果期噴施效果最好，表現為果實直徑增加(圖4、圖8)、膨大比率增加(圖5)，并且葉片比葉重(圖9)、葉綠素含量增加(圖10)，可能由于禾稼春內的ALA提高了光合速率，使光合產物更多地流向果實，最終促進果實膨大。該結論與丁恒毅得出的結論“葉面噴施禾稼春使大蒜葉片葉綠素含量增加，鱗莖粗度和平均蒜頭質量提高”[10]相似。這可能與植物貯存的養分已在開花期消耗殆盡，坐果期處于養分較為缺乏的狀態，此時補充葉面肥，可以快速彌補養分的匱缺。相比而言，初花期葉面噴施效果不佳，可能是由于外源補充的養分主要用于當時開花、授粉受精，對后續的果實生長及膨大所起的作用較小。

比較噴施不同濃度禾稼春的效果可以看出，低濃度禾稼春(稀釋5000倍液)促進果實膨大的效果最好(圖1～圖4)，說明鳳丹對葉面噴施禾稼春的反應較為敏感。與丁恒毅在大蒜上施用禾稼春的濃度為稀釋2000、1000、500倍液[10]，謝荔等在葡萄施用ALA的濃度為稀釋1000、800、600倍液[15]相比，本試驗所選取的禾稼春濃度整體較低(稀釋5000、4000、3000、2000倍)，可能原因是鳳丹新生枝葉數較少，生長量較小，對葉面肥的吸收量有限，高濃度的ALA可能造成肥害。

綜上所述，盛花期、坐果期的禾稼春噴施明顯增加了鳳丹果實直徑、促進果實膨大，以坐果期噴施稀釋5000倍液效果最為明顯，可以將此結果作為鳳丹增產的技術手段用于鳳丹生產。