Capn4和Ki-67在宮頸癌中的表達及意義

楊 帆，李東豫，袁 藝

(河南省第二人民醫院 1.婦產科；2.病理科， 河南 新鄭451191)

宮頸癌是女性生殖系統最常見的惡性腫瘤，占據女性惡性腫瘤死亡率第二位，而腫瘤細胞的浸潤是其致死的主要因素，早診斷、早治療是提高宮頸癌遠期生存率的重要方法[1]。已有研究證實Capn4和Ki-67與結腸癌等惡性腫瘤的侵襲、發展密切相關[2]。本研究通過檢測Capn4和Ki-67在宮頸癌中的表達及其臨床意義，進一步探討宮頸癌的發生、發展、浸潤、轉移等過程的具體機制[3]。

1 資料與方法

1.1一般資料

于2015年6月-2016年12月，選擇我院擇期行宮頸癌根治術患者的癌組織病理蠟塊70例作為實驗組，選取因子宮脫垂等其它良性病變行子宮切除術的正常宮頸組織病理蠟塊35例作為對照組，所有蠟塊均經術后病理確診。納入標準：患者臨床資料完整；TNM分期Ⅰ-Ⅳ期；術前未接受過任何針對宮頸癌的治療。實驗組年齡在28-85歲之間，中位數是60歲；淋巴結轉移者40例，未轉移者30例；分化級別高分化31例，中分化28例，低分化11例；TNM分期Ⅰ期和Ⅱ期29例；Ⅲ期和Ⅳ期41例。TNM分期遵循國際婦產科協會(FIGO)及國際婦產腫瘤協會(IGCS)制定的最新《婦科惡性腫瘤分期及臨床實踐指南》。

1.2方法

實驗組所有病理蠟塊均采用免疫組織化學S-P法，蠟塊切片水化后，使用蒸餾水和PBS分別沖洗，甩掉多余的血清后分別滴加一抗：濃度為1∶300的兔抗人Capn4多克隆抗體(大連微生物庫存所)、濃度為1∶100的鼠抗人Ki-67單克隆抗體(大連市金宇生物技術有限公司，)孵育過夜，PBS沖洗后滴加二抗，蘇木素染色后顯微鏡下觀察。對照組使用PBS代替所有其他試劑。

1.3觀察指標

Capn4蛋白主要在細胞質中表達，Ki-67蛋白主要在細胞核中表達。細胞質陽性表達標準是：5個400倍視野中陽性細胞的數目所占百分率≤5%記0分，6%-25%記1分，26%-50%記2分，51%-75%記3分，>75%記4分；顯色強度中未著色者記0分，淡黃色記1分，深黃色記2分，深褐色記3分。數目+顯色記分≥3即為陽性。細胞核陽性表達標準是：5個高倍鏡視野陽性細胞占百分率≥10%。

1.4統計學分析

應用 SPSS20.0 軟件進行數據統計分析。計數資料采用卡方檢驗及秩和檢驗；數據間相關性采用Spearman分析，P<0.05即有統計學差異。

2 結果

2.12組患者Capn4和Ki-67的表達

宮頸癌組織中Capn4和Ki-67的表達率分別是72.9%(51/70)、85.7%(60/70)顯著高于正常宮頸組織(P<0.05)，見表1。

表1 2組患者Capn4蛋白和Ki-67蛋白的表達

注：*P<0.05與對照組比較，差異有統計學意義

2.2宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達水平與其臨床病理特點的相關性

浸潤范圍方面，侵及漿膜層組宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為85.2%和96.3%，顯著高于未侵及漿膜層組(P<0.05)；TNM分期方面，Ⅲ-Ⅳ期宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為95.1%和97.6%，顯著高于Ⅰ-Ⅱ期組(P<0.05)；淋巴結轉移方面，淋巴結轉移的宮頸癌組織中Capn4和Ki-67蛋白的表達陽性率分別為95.0%和90.7%，顯著高于淋巴結未轉移組(P<0.05)，而兩者的表達水平在患者的年齡及腫瘤分化程度分級中無明顯差異(P>0.05)，見表2。

表2 Capn4蛋白、Ki-67蛋白表達與宮頸癌臨床特點的相關性

3 討論

Capn4是Calpains家族中的一個小亞基，目前研究證實，Capn4在維持細胞的正常功能中起到重要作用[4]，對細胞的凋亡起到促進和抑制的雙向作用，近幾年研究證實Capn4在肝癌、腎透明細胞癌、鼻咽癌、直腸癌等惡性腫瘤的發生、發展、浸潤、轉移等過程中發揮重要作用[5]。本研究經免疫組化檢測結果提示宮頸癌組織中Capn4的表達率高達72.9%顯著高于正常宮頸組織(P<0.05)，且其表達水平與宮頸癌的浸潤深度(侵及漿膜層者85.2%)、TNM分期(Ⅲ-Ⅳ期95.1%)、有無淋巴結轉移(淋巴結轉移者95.0%)密切相關。細胞核增殖指數(Ki-67)是細胞的分裂及增殖活性的標志物，其表達水平越高，提示細胞的分裂及增殖活性越高[6]，目前已有研究證實Ki-67在胃癌、結腸癌、直腸癌中表達明顯升高且其表達水平與惡性腫瘤的浸潤范圍、TNM分期及淋巴結是否轉移密切相關。本研究中，宮頸癌組織中Ki-67的表達率高達85.7%顯著高于正常宮頸組織(P<0.05)，且其表達水平與宮頸癌的浸潤深度(侵及漿膜層者96.3%)、TNM分期(Ⅲ-Ⅳ期97.6%)、有無淋巴結轉移(淋巴結轉移者90.7%)密切相關，驗證了以往研究的結果，也進一步證明了Ki-67在預測宮頸癌中的重要價值。

綜上所述，宮頸癌組織中Capn4和Ki-67的陽性表達率較正常宮頸組織顯著升高且與宮頸癌組織的浸潤范圍、TNM分期及淋巴結轉移有關，分期越晚、浸潤范圍越廣、淋巴結轉移陽性者其表達水平越高，提示兩者可能成為預測宮頸癌的敏感指標且能起到評估宮頸癌惡性程度的作用，為宮頸癌的早期診斷及治療提供了新的臨床思路。

作者簡介：楊帆(1982-),女,河南新鄭人，本科學歷，河南省第二人民醫院婦產科主治醫師。