溫度對茶發酵葉色澤及茶色素含量的影響

滑金杰，袁海波，姚月鳳，江用文，王近近

（中國農業科學院茶葉研究所，國家茶產業工程技術研究中心，農業部茶樹生物學與資源利用重點實驗室，浙江省茶葉加工工程重點實驗室，杭州 310008）

0 引 言

紅茶，作為世界上消費量最大的茶類，具有其獨特的湯色、滋味和香氣等內質，外形和湯色是評判紅茶質量優劣及市場價格體現的重要指標之一[1-2]，也是判斷紅茶發酵適度的重要參數之一[3-6]。發酵是紅茶品質形成的關鍵工序[7-8]，鮮葉內多酚類物質與多酚氧化酶、過氧化物酶等發生酶促氧化聚合反應，葉色逐漸由綠向黃綠→黃→橙黃→紅等依次轉變，同時生成茶黃素、茶紅素、茶褐素等（統稱茶色素）品質成分和功能物質[9-11]，TFs（theaflavins，即茶黃素）和TRs（thearubigins，即茶紅素）亦是紅茶關鍵的呈味、呈色物質[12-16]。溫度是發酵工序的關鍵參數之一，直接影響葉內茶黃素和茶紅素等紅茶品質物質的形成?，F有研究多集中于發酵溫度對滋味物質、香氣成分、紅茶品質影響等方面[17-20]，而有關發酵溫度對發酵在制品湯色和外形變化影響的研究甚少。發酵適度的判斷仍以制茶人員的主觀評判為主，通過觀葉色、聞葉香進行人為評判，客觀性差。有學者利用電子鼻技術[21-24]、漫反射光譜和可見遠紅外光譜技術[25-26]、電荷耦合器件（charge-coupled device，CCD）色澤檢測技術[27]等技術，客觀判斷發酵的進程和適度，研究表明DL（亮度色差值）、Da（紅度色差值）、Db（黃度色差值）、DE（總色差值）等湯色指標與茶湯的感官評審得分呈極顯著相關性[28-29]。但發酵過程中外形和湯色的色相指標的變化規律，發酵溫度對其影響，以及外形色相與品質成分相關性等方面仍未進行研究。本文應用新型便攜式光學測色儀，旨在通過探究不同發酵溫度對發酵葉外形色澤和湯色L（亮度）、a（紅度）、b（黃度）等色相指標變化規律，同時結合發酵溫度對茶黃素、茶紅素等品質成分變化的影響，探討三者的相關性，建立評價紅茶發酵適度的客觀方法，同時獲得適度發酵下的外形和湯色色相指標，為確定紅茶發酵適度和改進傳統工藝提供理論支持和技術指導。

1 材料與方法

1.1 試驗材料與儀器

“福鼎大白茶”品種鮮葉原料，嫩度為一芽一葉至一芽二葉初展，杭州市茶葉試驗場，采摘日期為2016年5月。

PRX-450D型人工氣候箱（上海谷寧實業有限公司）；6CR-45型揉捻機（浙江上洋機械有限公司）；JY-6CHZ-7B型茶葉烘焙提香機（福建佳友機械有限公司）；CM-5型臺式分光測色儀，CM-600d型便攜式分光測色儀（柯尼卡美能達（中國）投資有限公司）；LGJ-50C型真空冷凍干燥機（北京四環科學儀器廠有限公司）；Sartorius Quintix224-1CN型分析天平（賽多利斯科學儀器（北京）有限公司）；島津UV-3600型紫外-可見近紅外分光光度計（日本島津公司）；DK-S26型電熱恒溫水浴鍋（上海精宏實驗設備有限公司）；JW-B型分液漏斗振蕩器（常州市頂新實驗儀器有限公司）。

1.2 制茶流程

1.2.1 制茶流程及處理

1）萎凋。在人工氣候箱內進行，設置溫度28℃、光照強度6 000 lx、相對濕度70%，鮮葉總處理量為20.0kg，將鮮葉混勻、薄攤，攤放厚度5 cm，至鮮葉含水率達62%～64%進行揉捻。

2）揉捻。以空揉20 min→輕揉15 min→重揉10 min→輕揉15 min→重揉10 min→輕揉5 min進行，總計75 min，后進行解塊。

3）發酵。在人工氣候箱內進行，設置25、30、35、40℃等4個溫度處理，設置相對濕度95%，發酵時間3.0 h。

4）干燥。在提香機內進行，120℃初烘15 min后，進行適當攤涼，而后85℃烘至足干（約30 min）。

1.2.2 取樣方法

不同發酵溫度處理每隔0.5 h進行取樣，取樣時將發酵葉混勻，取60 g樣置于液氮冷凍固樣，后經低溫冷凍干燥獲凍干樣，置于-20℃冰柜待測，檢測生化成分；同時取樣進行外形色澤數據采集。

1.3 檢測方法

1.3.1 茶在制品外形色澤屬性檢測

在發酵過程中取樣的同時，使用便攜式色差儀對樣品的外形色澤進行三角測定，以獲得可反映發酵葉和發酵程度的各色差屬性。采用L*a*b色差系統進行測定，其中L值代表明度；a代表紅色度，“+”代表紅色程度，“-”代表綠色程度，b代表黃藍色度，“+”代表黃色程度，“-”代表藍色程度。DL、Da、Db均表示色差值，DE表示總色差值[30-31]。每次取樣時用測色儀進行三角測定即時色差，5次重復。

式中LM為發酵樣的L值，L0為揉捻樣的L值；aM為發酵樣的a值，a0為揉捻樣的a值；bM為發酵樣的b值，b0為揉捻樣的b值。

1.3.2 茶在制品湯色色澤屬性檢測

取未研磨的在制品凍干樣3 g放入審評杯中，加入150 mL沸水，沖泡5 min，后用茶漏和濾紙過濾，取茶湯作為待測母液。取母液茶湯置于比色皿，在CM-5型臺式分光測色儀進行色差測定。每個樣品重復測定3次。

式中LLM為發酵樣的湯色的L值，LL0為揉捻樣湯色的L值；LaM為發酵樣湯色的a值，La0為揉捻樣湯色的a值；LbM為發酵樣湯色的b值，Lb0為揉捻樣湯色的b值；DLE為湯色總色差值。

1.3.3 茶在制品總湯色值測定

參照Obanda等[17]的方法，取上述待測母液5 mL，加入5 mL純水，充分震蕩混勻，以純水為空白對照，在460 nm下進行吸光值測定。

LC為發酵樣的總湯色值，DM是干物重質量分數。

1.3.4 茶黃素、茶紅素、茶褐素等質量分數檢測

參照Roberts等[32]的系統分析法，室溫下取3.0 g未研磨茶樣溶于125 mL沸純水，100℃水浴鍋中浸提10 min，抽濾、冷卻待測。茶色素分離提取：取30 mL茶湯于60 mL分液漏斗中，加入30 mL乙酸乙酯，振蕩5 min靜置待分層后放出水層（下層）、倒出乙酸乙酯層（上層）。吸取上層2 mL加25 mL95%乙醇定容至25 mL，得到溶液A；吸取下層2 mL加2 mL飽和草酸溶液和6mL蒸餾水，加95%乙醇定容至25 mL，得到溶液B；吸取上層15 mL于30 mL分液漏斗中，加15 mL2.5%碳酸氫鈉溶液，振蕩30s靜置分層后，棄去上層，吸取下層4 mL，加95%乙醇定容至25 mL，得到溶液C；取茶湯15 mL于30 mL分液漏斗中，加15 mL正丁醇，振蕩3 min，靜置分層后吸取水層2 mL加2 mL飽和草酸溶液和6 mL蒸餾水，加95%乙醇定容至25 mL，得到溶液D。將得到的4種溶液于380 nm處測定吸光值并記錄為EA、EB、EC、ED。按照式（10）～（14）計算。

式中TFs為茶黃素質量分數，TRs為茶紅素質量分數，TBs為茶褐素質量分數，EA為溶液A的吸光值，EB為溶液B的吸光值，EC為溶液C的吸光值，ED為溶液D的吸光值，DM是干物質量比例，TRF是茶紅素與茶黃素的比值，TFRB為茶黃素和茶紅素之和與茶褐素的比值。

1.4 數據處理

試驗重復3次，每次試驗結果以3個重復的平均值表示。采用SAS9.1軟件進行數據分析，不同發酵處理間平均值的比較用單方面分類的方差分析，相關分析應用于品質生化成分、外形色相指標、湯色色相指標等三者的相關性分析?；貧w分析應用于生化成分與色相指標之間的模型建立，其中，TFs、TRs、TFRB等為因變量，LL、LC、La、Lb、L、a、b等為自變量。

2 結果與分析

2.1 發酵溫度對茶在制品外形色澤屬性變化規律和色差值的影響

發酵溫度對發酵葉外形色澤指標L值、a值和b值變化規律影響的結果如表1所示。隨著發酵時間的延長，不同發酵溫度下發酵葉的亮度L值均呈降低的趨勢，在90 min有所回升，且30℃以上的處理在發酵前60 min呈急速下降趨勢，25℃處理呈較均勻的下降趨勢，不同溫度比較，整體以25℃處理下發酵葉的L值顯著（P<0.05）高于其他處理，且L值隨著溫度的上升呈下降趨勢，即低溫發酵有利于發酵葉亮度、鮮活度的提升。紅度a值隨著發酵的進行呈先增加而后波動平穩的趨勢，這與發酵葉由綠變黃的表觀特征一致，a值的劇變期發生在發酵前60 min，這點與L值變化一致，不同溫度比較以35℃處理下發酵葉紅度顯著最高，40℃下顯著最低，即溫度的適度增加有利于茶紅素等顯紅性物質的生成，但溫度過高則不佳。黃藍度b值在發酵起始點即為最高，即揉捻葉的黃度最強，隨著發酵的進行呈下降趨勢，除25℃處理呈較平穩下降，其他3個處理呈現前60 min劇烈下降，而后緩慢下降的趨勢，且隨著發酵的進行，溫度越高，b值降低的越快，并呈顯著性差異，以25℃發酵溫度處理發酵葉的黃度最高，即低溫發酵有利于茶黃素等顯黃性物質的累積，溫度的增加會導致其轉化降解，發酵葉的黃度值下降。

不同溫度下發酵葉色澤相對值DL、Da、Db、DE的變化規律如圖1所示。DL在整個發酵過程中呈現先降→回升→平穩的趨勢，在發酵90 min有所回升（圖1a），相對于揉捻葉，發酵葉的DL呈負值，即發酵會導致茶在制品亮度下降，適度發酵有利于亮度的回升，過度發酵會導致亮度持續下降，不同溫度比較以低溫下DL的降幅最低，更有利于茶在制品亮度的保持。Da在發酵期間均呈正值，即發酵下茶在制品紅色屬性呈上升趨勢，Da呈現先增后平穩的趨勢（圖1b），在發酵90 min達到峰值，不同溫度比較以35℃處理Da增幅最大，即此溫度下茶在制品紅度最高。Db在發酵過程中呈現負值，即伴隨著在制品紅度的上升，黃度下降（圖1c），且發酵時間和溫度對Db呈負影響，即發酵時間越長、溫度越高，在制品黃色特性越低。DE是綜合了DL、Da和Db的綜合色差變化屬性，在發酵過程呈現前60 min迅速增加，而后緩慢上升的趨勢（圖1d），且溫度越高，DE越大，與DL和Db的變化規律相反，這與其計算公式對應。整體上，茶在制品外形色澤的劇變期發生在前90 min，后達到較為平穩的變化趨勢，低溫有利于亮度和黃度的保持，高溫有利于紅度的提升。

2.2 發酵溫度對茶在制品湯色色相屬性變化規律和色差值的影響

發酵溫度和時間對茶在制品湯色的總湯色LC值、亮度LL值、紅度La值和黃藍度Lb值影響顯著不同（表2）。

表1 發酵溫度對發酵葉L值、a值和b值變化規律的影響Table 1 Effects of fermentation temperature on L value,a value and b value of fermented leaves

注：Mean代表同一參數同一溫度下不同發酵時間的均值，大寫字母表示同一時間不同溫度的同一參數在0.05水平上的差異性。Note:“Mean”represents the mean value of different fermentation time at the same parameter.The capital letter indicates the difference of the same parameter at the same time and different temperature on the 0.05 level.

圖1 發酵溫度對發酵葉色澤相對值變化規律的影響Fig.1 Effects of fermentation temperature on color property of fermented leaves

表2 發酵溫度對發酵葉湯色LC值、LL值、La值和Lb值變化規律的影響Table 2 Effects of fermentation temperature on LC value,LL value,La value and Lb value of fermented leaves liquor

整體上，發酵時間越長，湯色亮度LL值整體呈下降趨勢，總湯色LC值、紅度La值和黃度Lb值除25℃處理呈逐漸提升外，則隨著發酵時間的延長呈現先升后降的趨勢；相同發酵溫度不同湯色指標峰值點出現的時候較一致，如30℃處理下LC值、La值和Lb值峰值均出現在90～120 min，即此3個參數具有協同效應；不同溫度下LC值、La值和Lb值峰值點的高度和出現時間不同，以Lb值為例，30℃處理峰值點出現在120 min，35℃處理峰值點出現在90min，40℃處理峰值點出現在150min。不同發酵溫度比較，以30℃ 處理下茶在制品湯色的LC值和黃度Lb值（P<0.05）顯著高于其他3組處理，溫度過高會導致此3個湯色屬性值下降，即發酵溫度適當的增加有利于總湯色、紅黃度的提升；紅度La值以低溫（25或30℃）處理顯著最優，亮度LL值以35℃處理相對最優，40℃處理顯著最差（均以mean值比較）。與外形色澤指標比較（表1）可以看出，發酵溫度對兩者的影響不同，即外形色澤指標的變化不僅受水溶性物質的湯色指標影響，還受非水溶性指標的影響。

茶在制品的湯色指標DLL、DLa、DLb、DLE等在不同發酵溫度和發酵時間的變化規律如圖2所示。

圖2 發酵溫度對發酵葉湯色色澤相對值變化規律的影響Fig.2 Effects of fermentation temperature on color property of fermented leaves liquor

圖中DLL在發酵過程中在負值的狀態下呈整體下降趨勢（圖2a），變化幅度在6.0以內，在90 min有所回升，這點與外形DLL值的結果較一致（圖1a），即發酵會導致葉湯色透亮度下降，不同溫度比較以35℃顯著較優。湯色DLa和DLb在發酵180 min內均呈現逐步上升而后有所下降的趨勢（圖2b和圖2c），且值均為正值，湯色DLa值的變化幅度在8.0以內，而湯色DLb值的變化幅度較大，在5.0～20.0內，即發酵會促使湯色向黃、向紅轉變，但發酵過度會導致湯色變渾、變暗，即湯色DLa和DLb的下降，不同溫度比較以20、30℃較優。湯色DLE的變化趨勢與湯色DLa和DLb一致，整體呈先升后降的趨勢（圖2d），其中湯色DLb對DLE的貢獻率最大，變化的劇烈期在發酵前60 min，即茶黃素和茶紅素快速形成的時期，不同發酵溫度比較，35℃有利于湯色亮度的保持，而20和30℃的低溫則有利于湯色紅度和黃度，以及整體色澤的提升。

2.3 發酵溫度對茶在制品茶黃素、茶紅素、茶褐素等轉化生成的影響

發酵溫度和時間對茶黃素、茶紅素、茶褐素等含量及變化規律的影響如圖3所示。

由圖可以看出，不同溫度對茶黃素（TFs）變化規律的影響不同（圖3a），40℃下呈下降趨勢，其他3個處理呈先升后降的趨勢，且不同溫度下TFs的峰值即峰值時間不同，25℃在發酵90 min達到峰值，30和35℃在發酵30 min達到峰值，且以30峰值（0.515%）顯著（P<0.05）大于其他處理的峰值，25℃處理次之，即發酵溫度和時間對茶黃素的形成存在顯著交互作用，兒茶素在酶促氧化下轉化形成茶黃素，溫度的增加可加速茶黃素的生成，但同時催化茶黃素的轉化，進而導致時間的增長導致茶黃素含量的下降，且溫度過高（40℃）會導致茶黃素轉化量大于形成量，進而形成發酵過程中茶黃素的含量下降，低溫（25℃）更有利于茶黃素的持續形成。不同發酵溫度下茶紅素均呈先增加后下降的趨勢，不同點在于峰值高度和峰值時間（圖3b），其中25和40℃處理峰值點在發酵30 min，35℃處理峰值點在發酵60 min，30℃處理峰值點在發酵90～120 min，且以35℃峰值點顯著最高（7.008%），但峰值點后TRs迅速下降，30℃峰值點高度次之，且保持峰值的時間較長，在發酵60～150 min，均在6.0%以上，25和40℃均在發酵前30 min有所增加，而后下降，其中40℃發酵處理降速更快，結合茶黃素變化（圖3a），茶黃素的轉化促進了茶紅素的形成，且溫度的增加會加速其轉化過程，進而導致隨著發酵時間的延長茶黃素含量的下降，茶紅素含量的上升，但時間過長、溫度過高則會導致茶紅素進一步氧化聚合形成茶褐素等酚類高聚物，茶紅素含量的下降，至發酵末期（150～180 min）達到均衡點，即茶紅素的形成和進一步轉化較一致。圖3c可以看出，茶褐素整體呈現增加趨勢，不同溫度下具體規律不同，25和30℃處理下發酵前120 min呈勻速低量增加，120～150 min急速增加，后30 min平穩的趨勢，這點與茶黃素和茶紅素的變化規律相對應，低溫下發酵TFs和TRs可持續形成，且長時間內可保持較高的含量（圖3a和圖3b），整體上顯著高于35和40℃處理，進而導致低溫發酵前期TBs含量的緩慢增加，而35和40℃處理TBs含量則呈現在發酵前90 min迅速增加，后期平緩的趨勢，這與TFs和TRs在發酵前30 min（35℃下的TFs和40℃下的TRs）或60 min（35℃下的TRs）達到最高值后迅速下降的現象對應，其中以40℃發酵下茶褐素的形成量顯著最大，最不利于發酵品質的形成。

總體上看，TFs、TRs、TBs間存在形成競爭關系，等量兒茶素底物條件下，低溫（25℃）利于TFs和TRs的持續形成，且兩者的進一步轉化聚合量較低，TBs量較少，但TFs和TRs達到峰值的時間較長，且峰值高度較低，適當的提高發酵溫度（30和35℃）利于TFs和TRs的快速高量形成，同時TBs量不會快速增加，然溫度過高（40℃）則會導致TFs和TRs量迅速轉化消耗，TBs量的快速形成。為此引出TFRB值（the ratio of the sum of theaflavins and thearubigins to theabrownins），即茶黃素和茶紅素加和值與茶褐素比值，可以看出（圖3d）在發酵過程TFRB值呈先升后降的趨勢，不同溫度比較以30℃處理顯著最優，這點與外形a值（表1）和湯色LC值、La值和Lb值（表2）相一致且保持高值的能力最強，35℃次之，這與茶紅素量（圖3b）對應，40℃處理顯著最低，在發酵60 min后值即小于0.8。

圖3 發酵溫度對發酵葉茶黃素、茶紅素、茶褐素生成規律的影響Fig.3 Effects of fermentation temperature on theaflavins,thearubigins and theabrownins formation of fermented leaves

2.4 茶在制品色澤屬性和色差值與茶色素生成轉化的相關性分析

相關性分析用于分析茶色素與茶外形色相屬性、茶湯色色澤屬性的之間內在聯系（表3），可以看出，TFs和TRs間呈顯著正相關，TFs和TRs兩者均與TFRB呈極顯著正相關（P<0.01），即茶黃素和茶紅素均對TFRB值具有等值貢獻，TBs對TFRB呈極顯著負相關（P<0.01）。TRF即TRs/TFs，是現有衡量紅茶品質的重要指標，從表中可以看出TRF與TFs呈顯著負相關，但與TRs無顯著相關性，即TRF不能有效的代表TFs和TRs在葉內的貢獻表征。

表3 發酵葉茶黃素、茶紅素、茶褐素間的相關性分析Table 3 Correlation analysis between TFs,TRs and TBs of fermented leaves

由表4可以看出，茶樣湯色色澤屬性間LC、La、Lb三者間呈極顯著正相關（P<0.01），且R2>0.90，即茶湯總湯色值、湯色紅度與湯色黃度三者相互影響，對湯色品質具有協同作用，而LL則均與LC、La、Lb呈極顯著負相關（P<0.01，R2>0.90），這與傳統感官認知一致，水色越透亮，則透射率越高，反射率越低，吸光值越低，進而紅黃度和總湯色越低，這點與表2獲得的數據結果一致，即LC值的上升，伴隨著LL值的下降、La和Lb值的增加。外形色澤屬性則有所不同，a值與L值、b值呈極顯著負相關（P>0.01），L值與b值呈極顯著正相關（P<0.01，R2>0.90），外形L值為茶樣條索的反光性體現，人工感官評審紅茶時黃色出現，即金毫，對應茶樣的亮度L值會隨之提高，紅度a值因黃度掩蓋而值有所下降，這點與表1的研究結果相一致，L值和b值在發酵中的變化規律一致，與a值的規律相反。

表4 發酵樣湯色色澤屬性和外形色澤屬性的相關性分析Table 4 Correlation analysis between fermented leaves color property and fermented leaves liquor color property

外形色澤屬性與湯色色澤屬性間呈極顯著相關性，其中外形L值和b值與湯色LC、La、Lb值呈極顯著負相關（P<0.01，R2>0.64），與湯色LL值呈極顯著正相關（P<0.01，R2>0.71），外形a值與湯色色相屬性相關性則相反，與湯色LC、La、Lb值呈極顯著正相關，與湯色LL值呈極顯著負相關，這與表1和表2獲得的結果相吻合，隨著發酵進行，茶在制品逐漸由黃變紅，葉亮度L值和黃度b值下降、紅度a值上升，紅色物質的增加導致湯色的LC、La、Lb值則隨之上升，湯內物質的增加導致透光度的下降，湯色的LL值亦下降，即外形色澤表征與湯色色澤表征存在顯著相關性，可以通過外形色澤表征來獲得對應的湯色特性，進而為獲得優化的湯色品質提供快速判別的方法。

TFs、TRs、TBs等顯色內質與茶樣外形和湯色表征的相關關系如表5所示，可以看出，TFs與L值、b值、Lb值呈極顯著正相關（P<0.01），其中與外形黃度b值相關性最強，R2達到0.724，與LC值、La值呈顯著正相關，表明茶黃素含量直接影響茶樣外形的亮度和黃度，同時對總湯色值、湯色黃度和紅度均有重要的正相關影響，有利于湯色和外形優異品質的形成。TRs僅與a值和Lb值呈顯著正相關（P<0.05），與L值和b值呈顯著負相關（P<0.05），表明茶紅素主要對茶樣外形色相屬性起關鍵影響，直接顯著影響外形紅度，對湯色內質的影響相對較小。TBs則與7個色澤屬性均呈極顯著相關性，其中與L值、b值、LL值呈極顯著負相關，與a值、LC值、La值、Lb值呈極顯著正相關，對應表1、表2和圖3的色相表征和茶褐素的變化規律，可以看出與相關性結果較一致，即發酵的進行，外形紅度a值逐漸增加，茶褐素含量的增加，湯色紅黃度亦會增加，但湯色透亮度則會下降。TFRB值與7個色澤屬性的相關性關系則與TBs相反，其中與LL值和b值相關性最強，呈極顯著正相關，R2>0.60。

表5 發酵樣色澤屬性與茶色素生成轉化的相關性分析Table 5 Correlation analysis between color property and colour aberration and tea pigment generation of fermented leaves

茶黃素和茶紅素作為紅茶關鍵的品質和功能成分，也是判斷紅茶發酵適度的重要指標，但現有檢測TFs和TRs的方法較復雜、且重復性和精準性差，從相關性分析可以看出，外形色澤屬性和湯色色相屬性與TFs和TRs的相關性顯著，為此進行以TFs和TRs為目標值的回歸分析。結果表明，直接線性回歸模型最適合該組樣本數據，具體結果見表6。

表6 以茶黃素、茶紅素、TFRB值為目標值的回歸分析Table 6 Regression analysis of theaflavins,thearubigins and TFRB value as target value

以TFs為目標值時，模型達到極顯著（P<0.01），即該回歸模型可行，多重決定系數R2達到0.804（表6），該系數預測模型中自變量對因變量的貢獻比例，即外形和湯色色澤屬性自變量解釋了80.4%的TFs因變量的總變化，即用該模型預測TFs含量可行，由表7可以看出，湯色LL、湯色Lb和外形b值對TFs影響顯著，且均呈顯著正相關，即湯色和外形黃度b值的增加對應樣品高含量的TFs值，隨著發酵的進行，在制品逐漸變黃，對應黃度b值和湯色Lb值增加，TFs值亦隨之增加，發酵進一步進行則在制品逐漸由黃變紅，對應黃度b值下降、紅度a值增加，TFs值隨之下降。其他色澤屬性無顯著影響，其中以外形黃度b值對TFs影響最大，湯色亮度LL值影響次之，為此獲得TFs的多元線性回歸預測模型，見式（1）。

式中VLL為湯色亮度LL值，VLb為湯色黃度Lb值，Vb為外形黃度b值。

以TRs為目標值時，誤差對因變量影響所占比例過大，導致模型未達到顯著（P=0.097），7個色澤屬性僅LL值對TRs呈顯著影響（P<0.05），即以外形和湯色色澤屬性為自變量建立用于預測茶紅素含量的線性回歸模型不可行。為此選擇與7個色澤屬性呈顯著相關（表5），且同時可代表葉內TFs和TRs含量（表3）的TFRB值作為因變量，進行線性回歸模型分析（表6），模型F值為3.47，達到顯著，即用該線性模型預測TFRB值可行，后進行7個色澤屬性自變量的多元線性向后回歸分析（表7），其中僅外形b值達到極顯著正相關，其他6個色澤屬性未對因變量TFRB值產生顯著影響，為此獲得TFRB的線性回歸預測模型，見式（2）。

表7 以茶黃素和TFRB值為目標值時各變量的顯著性和參數估計Table 7 Significance and parameter estimation of variables while theaflavins and TFRB value as target value

對應表7可以看出，外形b值同時對TFs和TFRB產生顯著影響，即外形b值是外形和湯色色澤屬性中最為關鍵的色相屬性，可作為判斷發酵適度和評判品質成分茶黃素含量的重要指標。

3 結論

1）發酵時間的延長會導致外形色澤L值、b值的下降，a值的增加，湯色LC值、La值和Lb值的先升后降，LL值的下降；各色澤屬性的劇變期均發生在前90 min。

2）不同溫度比較，低溫（20或30℃）有利于外形亮度L值、外形黃度b值、總湯色LC值、湯色黃度Lb值和湯色紅度La的值的保持，高溫（35℃）有利于外形紅度a值和湯色透亮度LL值的增加。

3）隨著發酵進行，品質成分TFs（茶黃素）和TRs（茶紅素）均呈先增后降的趨勢，然茶紅素峰值點出現時間晚于茶黃素，且不同溫度峰值點出現時間和峰值高度不同，整體上，以25℃發酵有利于TFs的形成和累積，而30℃發酵有利于TRs累積，40℃則高聚物TBs形成量最大。

4）相關性分析可以看出，茶黃素含量對外形和湯色色澤屬性均呈顯著正相關影響，有利于湯色和外形優異品質的形成。茶紅素主要對茶樣外形色相屬性起關鍵影響，對湯色內質的影響相對較小。TFRB值較TFR值更可有效代表茶黃素和茶紅素在葉內的貢獻表征。

5）通過線性回歸分析獲得了以LL值、Lb值和b值為變量的茶黃素回歸模型，R2達到0.804，結合TFRB值的回歸模型可以看出外形黃度b值是色澤指標中最為關鍵的，可作為判斷發酵適度和評判茶黃素含量的關鍵因子。

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