黎先偉 譯
By M. BOZKURT, I. GIANNENAS 1 , K. K–––KYILMAZ, E. CHRISTAKI 1 AND P. FLOROU-PANERI
球蟲病是一個世界性的難題,而且由于其較高的死亡率,輕微的亞臨床癥狀以及較差的增長率和飼料利用率,對肉雞生產者造成嚴重的經濟損失。廣泛使用的抗球蟲飼料添加劑可有效的控制球蟲的感染,尤其適用于大型養殖生產系統。雖然抗球蟲藥具有一定的功效,但是長期使用這類藥物已導致在美國和南美,亞洲和歐洲出現對所有抗球蟲藥均產生耐藥性的菌株。
因此,家禽生產者會在不同的時期選擇性地使用不同的抗球蟲藥,以避免耐藥性的產生。除了耐藥性問題以外,家禽產品中獸藥殘留問題也是食品安全和公眾健康所關注的重點,這也促使科研工作者積極尋找其他替代措施。植物產品,所謂的植物性藥物,可為球蟲的控制提供一種有效的替代手段,因為病原菌還未對這些藥物產生耐藥性。
在過去的十年中,一些特定芳香類植物的非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)被用作為傳統抗球蟲藥的替代品。這類提取物可從芳香類植物中獲得。這些EX中含有揮發性和非揮發性的植物成分。香精油(EO),是從植物材料(花、芽、種子、果實或樹根)中提取的芳香油狀液體。香精油含有多種由低沸點的苯丙烯類和萜烯類組成的植物次生代謝物。這些物質可使用多種不同的蒸餾方法進行提取,特別是蒸汽蒸餾法最為常用。它們主要包括環狀烴類(單萜烯)及其醇類、醛類或酯類衍生物。生物活性最高的香精油主要來自唇形科、菊科和傘形科的芳香類植物。初步研究結果表明,飼料中補充植物源性物質可以有效減輕疾病的嚴重程度。
然而,除了抑制蟲卵的脫落以外,很少有研究調查來自藥用植物的香精油對腸道生態環境的影響。目前,人們并不了解這些香精油對宿主和寄生蟲的作用,因此需要進一步的研究,以確定最有效的植物活性物質及其最佳的使用劑量。本文的主要目的是,展示目前在家禽飼料中使用植物性香精油(EO)和非水溶劑提取物(EX),以預防和控制球蟲感染及其相關機能障礙的最新研究成果。
目前,有關植物源性化合物在腸腔內的抗球蟲機制尚不十分清楚。艾美爾球蟲有著復雜的生命周期,包括胞內和胞外階段,以及無性繁殖和有性繁殖階段。一個典型的生命周期包括3個階段:孢子生殖、裂殖生殖和配子生殖。雖然所有艾美爾球蟲的一般生命周期都是相同的,但不同種屬之間,其宿主特異性、侵害部位、潛伏期和顯露期以及致病性存在顯著差異。
最近的一些研究已專注于比較植物源性化合物和傳統抗球蟲藥的效果。而在這些研究中,大多數已調查了單獨或結合形式的植物性化合物的使用效果,以及它們對動物生長性能的影響,不過其對生理學方面的影響卻研究甚少。
據研究表明,許多植物源性化合物的抗菌活性有助于保護上皮細胞免受球蟲的侵害。盡管已有一些體內研究證實,攝入植物源性化合物可抑制腸道內病原菌的生長,但是人們對植物源性化合物在預防或控制球蟲蟲卵方面的認識仍不十分全面。多酚類物質,芳香類植物中一種最重要的成分,及其非水溶劑提取物(EX)對一些腸道寄生蟲表現出明顯的抗寄生蟲活性。
雖然植物活性化合物在反芻動物中的抗寄生蟲活性機制已有充足的證據,但對于在家禽中的抗球蟲作用卻并非如此。一些唇形科的芳香植物(尤其是牛至),可提供豐富的酚類化合物。據Williams(1997)報道,酚類化合物作為消毒劑,可在體內外對柔嫩艾美爾球蟲表現出抗球蟲活性。香芹酚和百里香酚(牛至葉子和花的主要酚類成分)約占香精油成分的78%~82%,被認為是表現抗球蟲活性的主要成分。牛至香精油含有多種具有不同生物活性的物質,而其功效主要取決于所有這些成分的均衡協作效果。除了揮發性化合物以外,牛至中含有多種不易揮發的糖苷類化合物,經酶或酸水解后也能表現出一定生物活性。因此這些化合物被認為是潛在的前體物質。
最近的一項體外研究結果表明,多種香精油具有破壞艾美爾球蟲卵囊的能力。黃花蒿、百里香、丁香和茶樹的香精油(因具有抗氧化活性而著稱)應該特別引起人們的關注,因為它們對球蟲卵囊具有破壞作用。除了用牛至香精油替代肉雞飼料中的傳統抗球蟲藥以外,人們已開始研究香精油混合物(通常含有牛至香精油),并表現出良好的前景。使用低劑量(501.25 g/kg)的香精油混合物有希望作為傳統抗球蟲藥的替代物,這可能主要因為有效香精油化合物之間的協同作用。在所有這些試驗中,香精油混合物已證實對不同種屬的艾美爾球蟲具有一定的功效,而大多數是早期誘導的感染。
1.糞便卵囊的排泄和腸道上皮細胞的炎癥。球蟲感染對機體的主要影響之一是,糞便中含有球蟲卵囊,這取決于感染的劑量。而確保機體從感染中恢復的一個重要因素是,抗球蟲藥可對腸腔內的卵囊增殖起作用。最近的一些研究已證明,使用具有活性成分的藥用植物可產生相似的保護機制,即對寄生蟲本身表現出直接效果,改變其在宿主體內的生命周期。
降低卵囊產量和病變記分可引發機體補償性的增長,并可從感染中得到恢復。植物源性化合物或許也可根據降低糞便卵囊的產量,減輕血性腹瀉的嚴重程度。許多養殖場已開始試驗,在飼養肉雞過程中不使用傳統的抗球蟲藥,而是在飼料中補充牛至香精油的有效性。da Silva等人(2009)通過人工感染柔嫩艾美爾球蟲后,采用腸道形態計量學和卵囊的排泄,研究牛至香精油的抗寄生蟲效果。他們的結果發現,飼料中補充劑量為0.5和1.0 g/kg牛至香精油,可與離子載體抗生素-鹽霉素表現出相似的抗球蟲效果。據Hume等人(2006)報道,香精油混合物可調節腸道微生物菌群,避免在混合艾美爾球蟲感染后發生急劇的變化。
植物源性飼料添加劑抗球蟲作用的另一個影響是,減輕由球蟲感染所造成的腸道上皮的損傷。初步研究結果顯示,在飼料中補充抗球蟲藥或植物源性添加劑,可使家禽感染球蟲后腸道損傷的嚴重程度有所減緩。值得一提的是,在降低病變記分方面,使用植物源性物質要比常規抗球蟲藥的效果更好。
2.胃腸道的形態。艾美爾球蟲感染期間腸道上皮細胞所造成的嚴重炎癥,主要是由原蟲傷害,并發細菌感染或絨毛高度下降,杯狀細胞數量增加以及腸道微生物菌群失衡所引起的。在球蟲感染的急性期也會出現一些生理變化,如(食物)通過的時間延長,消化物的粘度降低,胃腸動力下降,吸收不良,胃酸增多以及消化酶活性降低。這些導致吸收障礙的生理變化,在一定程度上可通過使用常規的抗球蟲藥得以改善);但是,人們對于植物源性化合物是如何影響這些過程知之甚少。
已有的一些研究報道表明,在飼料中補充植物性藥物可增加腸道吸收的表面積。據Reisinger等人報道,輕度球蟲感染期間,在飼料中補充從牛至、八角和柑橘皮中提取的香精油,可在雞群接種球蟲疫苗后提高絨毛高度和杯狀細胞密度。他們得出的結論是,增加回腸中段杯狀細胞的數量可有助于建立一個比較強的抗病屏障。而在另一項研究中,da Silva等人(2009)的結果表明,飼料中補充0.5或1.0 g/kg香精油并不會影響絨毛高度,但可降低雛雞感染柔嫩艾美爾球蟲的隱窩深度。據Bozkurt等人(2012)報道,人工感染多種艾美爾球蟲后,用莫能菌素鈉或香精油混合物均可降低肉雞的小腸長度(4%)和盲腸重量(8%)。而Kü?üky lmaz等人(2012)的研究(感染劑量降低至50%的孢子化卵囊)也證實了這一結果。
由于從芳香族植物中提取的非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)含有大量不同的植物活性物質,因此最有可能的是抗球蟲活性并不取決于某一種特定的機制,而是與多方面的相互作用有關。不同抗生素的相互作用可有三種不同的結果:疊加、協同或拮抗作用。
某種特定香精油的抗菌活性可能僅取決于其中一種或兩種的主要成分。然而,越來越多的證據表明,香精油的內在活性不僅完全依賴于主要活性成分的比例,而且取決于香精油中微量成分與它們的相互作用。據相關研究報道,雙重或多重組合的香精油成分或餾分具有多種協同的抗菌活性。

不過問題是,與使用高劑量的香精油相比,在飼料中補充低劑量的香精油混合物是否具有抗球蟲活性。藥用植物的非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)的有益效果表明,這可能還有其他一些具有抗球蟲活性的化合物仍未被確認。也許,這其中的一些物質可產生協同作用,從而進一步提高它們的生物活性。
在家禽營養中使用植物提取物最常見的問題之一是,缺乏這些材料或提取物以及它們標準化的特征性描述。由于它們的復雜性和這些化合物的不同變化,因此,非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)的潛在生物活性可能會有所不同。因為它們都是天然合成的,所有環境和遺傳因素都將會影響非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)的化學成分。一些因素,如植物的品種、亞種、地理位置、收割時間和部位(如種子、葉子、樹根或樹皮)的化學成分都各不相同。此外,加工工藝(如擠壓法、蒸汽或酒精蒸餾技術、非水溶劑萃取法等)將會改變最終產品中的活性物質及其相關化合物。因此,這很有可能批次產品的變化將會導致其生物活性產生變化。
預期草本提取物將會在食品行業中被廣泛使用,因此用于跟蹤活性物質的分析方法是非常有必要的。然而,這些提取物具有復雜的化學成分,要想鑒定所有的活性成分往往是不可能的,而且已鑒定的化合物成分與其他未知成分之間可能存在的相互作用也不能考慮進去。根據生物活性成分的數量和變化的復雜性,它們之間的相互作用將會成為這一研究領域進展的主要限制。
如今,消費者要求“天然”環保型的產品以作為傳統藥物的替代手段。與傳統的抗球蟲藥相比,來自非水溶劑提取物(EX)和香精油(EO)的植物性化合物可在肉雞營養中作為天然的非抗生素類抗球蟲飼料添加劑。現有的文獻也證實了,這些生物活性物質可在艾美爾球蟲感染后的恢復階段,作為一種生長性能增強劑。不過,在球蟲感染后,有關營養作用,組織形態學變化、胃腸道的菌群組成以及對免疫力的影響等方面的證據仍十分有限。此外,與預防和/或防止卵囊脫落的具體機制尚不完全清楚,仍需要進一步的調查研究。