氟丙菊酯原藥對大鼠亞慢性毒性作用的研究＊

李本長，謝興華，朱若凱，楊慎華

(江西省職業病防治研究院毒理/實驗動物中心，南昌 330006)

氟丙菊酯（Acrinathrin）屬于高效、低毒、廣譜、新型的擬除蟲菊酯類殺螨、殺蟲劑。對多種食植性害螨具有良好的活性，并對刺吸口器害蟲和鱗翅目害蟲，如木虱、潛葉蛾、薊馬、蚜蟲等也具有良好的活性。其具有用量少、高效、低毒等優點，常用于棉花、果樹、大豆、玉米、蔬菜、茶葉、葡萄、柑橘、煙草等作物，在國內外受到廣泛的應用[1，2]。為了明確氟丙菊酯的亞慢性毒性并確定其最大無作用劑量，我們依據GB 15670-1995《農藥登記毒理學試驗方法》對96%氟丙菊酯原藥進行了大鼠亞慢性經口毒性試驗，現將實驗情況分析討論如下，以供生產單位、使用者、同行及農業衛生監督管理部門參考。

1　材料與方法

1.1實驗動物、試劑設備 SD大鼠（SPF級）80只，90-120g，雌性、雄性大鼠各半，來源為斯萊克景達實驗動物有限公司（湖南），許可證號：SCXK（湘）2011-0003；實驗在江西省職業病防治研究院動物房完成，許可證號：SYXK(贛)2013-0002。動物飼料購自科奧協力飼料股份有限公司（北京），許可證號：SCXK（京）2009-0012。氟丙菊酯原藥，主要成分為96%氟丙菊酯，性狀為白色粉末，由國內化工股份有限公司提供；檢測設備包括深圳邁瑞BC-2800vet全自動血液細胞分析儀、日本TOSHIBA TBA-40FR全自動生化分析儀、德國Bayer公司Clinitek STATUS拜施達尿分析儀。

1.2方法 實驗動物適應性飼養5d后，依據氟丙菊酯原藥雌性大鼠急性經口LD50（1470mg/kg）的1/3200、1/400、1/50 將雌性大鼠隨機分成低、中、高3個實驗組，設立正常對照組，每組10只。依據氟丙菊酯原藥雄性大鼠急性經口LD50（3590mg/kg）的1/7360、1/920、1/115將雄性大鼠隨機分成低、中、高3個實驗組，設立正常對照組，每組10只。將受試物混入飼料中連續喂飼90d，動物自由飲水進食，低、中、高劑量組雌性大鼠染毒劑量分別為0.45mg/kg·bw、3.62mg/kg·bw、29mg/kg·bw，低、中、高劑量組雄性大鼠染毒劑量分別為0.49mg/kg·bw、3.91mg/kg·bw、31.25mg/kg·bw。

1.3指標檢測

1.3.1常規觀察 每天定時觀察和記錄實驗動物的各種狀態及異常表現。每周定期測量一次體重，依據每周各劑量組體重結果來配制下一周喂飼飼料。動物常規染毒結束后每組動物稱取空腹體重，計算各劑量組實驗動物臟器系數。

1.3.2尿常規檢測 90d染毒結束，隔夜禁食后，從股動脈處取血，檢測指標分別為亞硝酸鹽（NIT）、pH 值、尿比重（SG）、尿糖（GLU）、尿隱血（BLD）、尿膽紅素（BIL）、尿蛋白（PRO）、白細胞（WBC）、尿膽元（URO）和酮體（KET）。

1.3.3血清生化檢測 90d染毒結束后，隔夜禁食后，從股動脈處取血 5ml，離心 10min（3000r/min）分離血清，檢測指標分別為天門冬氨酸氨基轉移酶活性（AST）、血糖含量（GLU）、丙氨酸氨基轉移酶活性（ALT）、堿性磷酸酶活性（ALP）、白蛋白含量（ALB）、總蛋白含量（TP）、總膽紅素含量（TBIL）、尿素氮含量（BUN）、肌酐含量（CREA）、膽固醇含量（CHOL）、甘油三脂含量（TG）、膽堿酯酶（CHE）。

1.3.4臟器系數檢測 90d染毒結束后，隔夜禁食后，檢查心、腦、脾、肝、肺、腎、腎上腺、睪丸、卵巢（含子宮）等器官，并測定其臟器系數。

1.4統計學處理 實驗所得數據以（x±s）表示，采用SPSS 16.0軟件包，組間均數比較采用LSD-t檢驗，數據分析采用單因素方差分析。

2　結果

2.196%氟丙菊酯原藥對大鼠常規狀態和體質量的影響 試驗期間各組動物一般情況良好，無厭食和其它異常行為；雄性大鼠中、高劑量組周平均體重從第1周開始至實驗結束均明顯低于對照組（P＜0.05），雌性大鼠高劑量組周平均體重從第1周開始至實驗結束均明顯低于對照組（P＜0.05）。見表1、表 2。

2.296%氟丙菊酯原藥對大鼠臟器系數的影響 雄性大鼠高劑量組腦重量系數明顯高于對照組（P＜0.05），中、高劑量組腎、睪丸臟器重量系數明顯高于對照組（P＜0.05）；雌性大鼠高劑量組腦重量系數明顯高于對照組（P＜0.05），中、高劑量組肝臟器重量系數明顯低于對照組（P＜0.05）。 見表 3、表 4。

2.396%氟丙菊酯原藥對大鼠血液學指標的影響各劑量組中，只有雌性大鼠的中劑量組RBC、HGB值明顯高于對照組 （P＜0.05），其它均無顯著性差異，見表 5、表 6。

2.496%氟丙菊酯原藥對大鼠血清生化學指標的影響 雄性大鼠高劑量組的ALT、TBIL值明顯高于對照組（P＜0.05），CHE 明顯低于對照組（P＜0.05），中、高劑量組的GLU明顯低于對照組（P＜0.05）。雌性大鼠高劑量組的ALP明顯高于對照組 （P＜0.05），中、高劑量組的 TP、ALB、CHE 明顯低于對照組（P＜0.05）。其他顯著性差異無毒理學意義。見表7、表 8。

表1　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠體質量的影響（x±s，n=10）

表2　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠體質量的影響（x±s，n=10）

3　討論

90d喂養氟丙菊酯原藥的大鼠經口毒性試驗的結果表明，雄性大鼠中、高劑量組體質量增長較對照組緩慢，雌性大鼠高劑量組體質量增長較對照組緩慢，而實驗動物體質量的變化是反映動物機體中毒效應及毒物毒性的最基本指標[3]。實驗動物血清生化、尿常規和臟器系數是生物醫學研究的重要基礎指標，是臨床醫療和科學研究的重要依據，是病理學、毒理學研究以及探討發病機理等研究中動物選擇的根據。在本試驗中，90d喂養氟丙菊酯原藥對雄、雌性大鼠血常規無明顯影響。在血清生化學檢測中，31.25mg/kg劑量對雄性大鼠ALT、TBIL、CHE 有明顯影響，3.91mg/kg 及以上劑量對雄性大鼠GLU有明顯影響，29mg/kg劑量對雌性大鼠ALP有明顯影響，3.62mg/kg及以上劑量對雌性大鼠TP、ALB、CHE有明顯影響，可能由于受試物對實驗動物的毒性作用，造成實驗動物肝功能和脂類代謝出現異常，另一方面可能免疫缺陷引起繼發感染，從而造成實驗動物對受試物毒性作用敏感的靶器官受損，進而表現出了一系列的異常反應。本試驗所測定的血清生化、血常規及臟器系數等指標，在受試雄、雌性動物的中、高劑量組中均呈現出明顯的毒理學變化，并呈現出一定的劑量-效應關系，結合體質量的檢測結果，能反映出90d喂飼氟丙菊酯原藥可以造成實驗動物亞慢性毒理學損傷，表明氟丙菊酯原藥有一定的毒性作用。

表3　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠臟器系數的影響（x±s，n=10）

表4　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠臟器系數的影響（x±s，n=10）

表5　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠血液學指標的影響（x±s，n=6）

表6　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠血液學指標的影響（x±s，n=6）

表7　96%氟丙菊酯原藥對雄性大鼠血清生化學指標的影響（x±s，n=6）

表8　96%氟丙菊酯原藥對雌性大鼠血清生化學指標的影響（x±s，n=6）

上述試驗結果表明，實驗動物體質量、生化指標、血常規指標和臟器重量系數相互支持，表明氟丙菊酯原藥對雄性大鼠染毒劑量為3.91mg/kg.bw.d及以上時，對雄性大鼠有毒性效應。氟丙菊酯原藥對雌性大鼠染毒劑量為3.62mg/kg.bw.d及以上時，對雌性大鼠有毒性效應。因此，在本試驗條件下，90d喂養氟丙菊酯原藥對雄性大鼠經口毒性的最大無作用劑量為0.49mg/kg.bw.d，對雌性大鼠經口毒性的最大無作用劑量為0.45mg/kg.bw.d。