血清中針對(duì)TORCH相關(guān)病原的IgG和IgM抗體分析

楊悅　林羅純　胡大春

[摘要] 目的 通過分析孕前、妊娠早期婦女和新生患兒三組人群血清中TORCH[弓形蟲（TOX）、風(fēng)疹病毒（RV）、巨細(xì)胞病毒（CMV）、單純皰疹病毒（HSV1/2）]抗體水平，為TORCH檢測(cè)在優(yōu)生優(yōu)育中的合理應(yīng)用提供理論指導(dǎo)。 方法 收集2014年1月～2017年12月于昆明市第一人民醫(yī)院行孕前檢查（孕前組，1929份）、孕早期檢查（妊娠早期組，15 555份）、新出生即入院治療患兒（新生患兒組，2049份）血清樣本共計(jì)19 533份。采用酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）對(duì)三組人群血清中TORCH病原體的IgG和IgM抗體水平進(jìn)行檢測(cè)和分析。 結(jié)果 TORCH抗體的ELISA分析結(jié)果顯示，19 533份樣品中TORCH病原抗體IgG陽性率為99.41%，其中CMV的IgG抗體陽性率最高（97.27%），TOX的最低（3.73%）。IgM陽性率為12.80%，其中針對(duì)HSV1的最高（6.44%），而CMV的最低（0.39%）。進(jìn)一步分組分析發(fā)現(xiàn)，孕前組、妊娠早期組和新生患兒組血清樣品中TORCH相關(guān)病原IgG抗體總陽性率均在99%以上。孕前組和妊娠早期組血清中TORCH相關(guān)病原IgM抗體陽性率分別為18.87%和13.65%，高于新生患兒組（0.63%）。1例患者同時(shí)攜帶3種TORCH病原IgG抗體的占大多數(shù)（>60%），而攜帶IgM抗體的主要只是針對(duì)一種TORCH病原。 結(jié)論 TORCH相關(guān)病原對(duì)育齡婦女普遍易感，育齡婦女孕前、孕早期、新出生患兒均進(jìn)行TORCH血清IgG和IgM抗體篩查，對(duì)于TORCH病原感染預(yù)防控制、促進(jìn)優(yōu)生優(yōu)育具有十分重要的指導(dǎo)意義。

[關(guān)鍵詞] TORCH；感染；血清抗體；酶聯(lián)免疫吸附法；優(yōu)生優(yōu)育

[中圖分類號(hào)] R714.251 [文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼] A [文章編號(hào)] 1673-7210（2018）04（b）-0085-05

[Abstract] Objective To provide theoretical guidelines for reasonable application of TORCH assay in aristogenesis and fine rearing through analysis of serum antibody of IgG and IgM against TORCH-associated pathogens （TOX， RV， CMV， HSV1/2） from the pre-pregnant， pregnant patients at early stage and new-born patients. Methods From January of 2014 to December of 2017， 19 533 serum samples were collected from pre-pregnant （pre-pregnant group， 1929 samples）， pregnant patients at early stage （pregnant group， 15 555 samples） and new-born patients （new-born group， 2049 samples） in the First People's Hospital of Kunming. ELISA was performed to detect the levels of antibodies IgG and IgM against TORCH-associated pathogens and further determine positive rates of specific antibodies of IgG and IgM. Results ELISA of TORCH antibodies in 19 533 serum samples showed that the positive rate of antibody IgG against any of TORCH-pathogens reached 99.41%. The positive rate of CMV IgG （97.27%） was the highest among four kinds of TORCH-associated pathogens and TOX （3.7%） showed the lowest rate. The positive rate of IgM antibody was 12.8%. The positive rate of HSV1 （6.44%） was the highest and CMV showed the lowest rate （0.39%）. Further analysis of the positive rate of IgG by groups showed the more than 99% of IgG positive rate of TORCH-associated pathogens in all groups of pre-pregnant group， pregnant group at early stage and new born group. The IgM positive rates of TORCH-associated pathogens in pre-pregnant group and pregnant group at early stage， 18.87% and 13.65%， were higher than that in new-born group （0.63%）. There were more than 60% of individual serum sample showed the IgG antibodies against 3 TORCH-associated pathogens. However， most of the IgM antibody in individual serum sample was against one of TORCH-associated pathogens. Conclusion The pre-pregnant， pregnant women at early stage and new-born patients are screened for antibodies of IgG and IgM in serum against TORCH-associated pathogens， which is of instructive significance for controlling infections of TORCH pathogens and aristogenesis and fine rearing.

[Key words] TORCH； Infection； Serum antibody； ELISA； Aristogenesis and fine rearing

TORCH病原體包括弓形蟲（Toxplasma，TOX）、風(fēng)疹病毒（Rubellavirus，RV）、巨細(xì)胞病毒（Cytomegalo virus，CMV）、單純庖疹病毒（Herpes simplex virus，HSV）和其他（Other，包括syphilis、varicella-zoster和parvovirus B19等）微生物。TORCH一詞由美國學(xué)者Nahmias等[1]于1976年首次提。孕前婦女和妊娠早期婦女的TORCH病原體原發(fā)性感染和再發(fā)性感染可引起妊娠期宮內(nèi)胚胎感染，造成胎兒流產(chǎn)、發(fā)育缺陷、早產(chǎn)和死胎等不良后果[2]。目前，優(yōu)生優(yōu)育工作中TORCH檢測(cè)已作為產(chǎn)前檢查的必要檢測(cè)項(xiàng)目[3-4]，但孕前婦女和新生患兒TORCH檢測(cè)的實(shí)施各地區(qū)情況不詳，實(shí)施的必要性也未見相關(guān)報(bào)道，是否需要對(duì)孕前婦女和新生患兒進(jìn)行TORCH病原體的普篩值得探討。同時(shí)，本地區(qū)不同人群（孕前婦女、妊娠早期婦女和新生患兒）TORCH感染情況也未見大數(shù)據(jù)分析報(bào)道。因此，本文期望通過近4年內(nèi)19 533份血清樣本TORCH抗體檢測(cè)結(jié)果，對(duì)本地區(qū)相關(guān)人群TORCH病原體既往感染和現(xiàn)癥感染情況進(jìn)行總結(jié)，為本地區(qū)人口的優(yōu)生優(yōu)育工作提供有價(jià)值的理論依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

收集2014年1月～2017年12月在昆明市第一人民醫(yī)院就診的孕前婦女血清樣本1929例、妊娠早期婦女血清樣本15 555例、收治兒科ICU的新生患兒樣本2049例，共計(jì)19 533例血清樣本及上述三類人群的基本臨床信息。

本研究為臨床大數(shù)據(jù)檢測(cè)結(jié)果回顧性分析，未涉及患者隱私，未涉及相關(guān)倫理學(xué)問題。

1.2 研究方法

1.2.1 檢測(cè)儀器和試劑 應(yīng)用愛康A(chǔ)E100型全自動(dòng)酶免分析儀、德國維潤賽潤研發(fā)有限公司生產(chǎn)的酶聯(lián)免疫法TOX、RV、CMV、HSV1型和HSV2型IgG/IgM抗體檢測(cè)試劑盒，對(duì)血清樣本中上述病毒抗體進(jìn)行定量檢測(cè)。

1.2.2 TORCH檢測(cè)結(jié)果判斷標(biāo)準(zhǔn) TOX IgG抗體定量結(jié)果>20 U/mL判斷為陽性，IgM抗體定量結(jié)果> 540 U/mL判斷為陽性；RV IgG抗體定量結(jié)果>20 U/mL判斷為陽性，IgM抗體定量結(jié)果>3.5 U/mL判斷為陽性；CMV IgG抗體定量結(jié)果>40 U/mL判斷為陽性，IgM抗體定量結(jié)果>15 U/mL判斷為陽性；HSV1型和HSV2型的IgG抗體>30 U/mL判斷為陽性，IgM抗體>30 U/mL判斷為陽性。

1.2.3 檢測(cè)結(jié)果質(zhì)量控制 每批次檢測(cè)均對(duì)檢測(cè)系統(tǒng)重新定標(biāo)，定標(biāo)通過后加入陰性對(duì)照、陽性對(duì)照和弱陽性質(zhì)控品與患者樣本同批次檢驗(yàn)，每批次陰陽性對(duì)照和弱陽性質(zhì)控結(jié)果均通過方可確認(rèn)結(jié)果并發(fā)出報(bào)告。不同批次檢測(cè)結(jié)果間的差異利用校正系數(shù)（F）對(duì)不同批次結(jié)果進(jìn)行校正。校正公式為：F=陽性對(duì)照血清OD參考值/陽性對(duì)照血清OD當(dāng)前測(cè)量值。

2 結(jié)果

2.1 血清中TORCH相關(guān)病原抗體情況總體分析

對(duì)2014年1月～2017年12月4年內(nèi)共計(jì)19 533份血清樣本中IgG和IgM抗體的總陽性率以及CMV、HSV1、HSV2、RV和TOX病原體各自的IgG和IgM抗體陽性率進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)IgG抗體總陽性率為99.41%，其中CMV、HSV1/2、RVIgG抗體陽性率顯著高于TOX的IgG抗體陽性率（3.73%），IgM抗體總陽性率為12.80%，其中針對(duì)HSV1/2和RV的IgM抗體陽性率較其他兩種病原體高。見表1。

2.2 不同組別中TORCH病原IgG抗體的分析比較

為了進(jìn)一步了解孕前婦女和新生患兒中TORCH病原IgG抗體的情況，本文將19 533個(gè)病例樣本分為3組（孕前組、妊娠早期組和新生患兒組），首先統(tǒng)計(jì)了各組中TORCH病原IgG抗體的總陽性率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，孕前組、妊娠早期組和新生患兒組血清樣品中TORCH相關(guān)病原IgG抗體陽性率均在99%以上。進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，三組中CMV的IgG抗體陽性率介于97%～98%之間，而孕前組HSV1/2和RV的IgG抗體陽性率略高于妊娠早期組和新生患兒組，妊娠早期組TOX的IgG抗體陽性率在三組中最高，為3.82%。見表2。

2.3 不同組別中TORCH病原IgM抗體的分析比較

孕前組和妊娠早期組血清中TORCH相關(guān)病原IgM抗體陽性率相對(duì)較高，分別為18.87%和13.65%，而新生患兒組IgM抗體陽性率僅為0.63%，三組CMV和TOX的IgM抗體陽性率低于HSV1、HSV2和RV的陽性率。新生患兒組HSV2和TOX的IgM抗體為陰性。見表3。

2.4 同時(shí)攜帶不同TORCH相關(guān)病原IgG/IgM抗體情況分析

由于同一例患者可能感染1種以上不同TORCH相關(guān)病原，孕前組、妊娠早期組和新生患兒組中，同時(shí)攜帶3種TORCH病原IgG抗體占大多數(shù)，抗體陽性率均在60%以上。其次，依次分別是2種、1種和4種TORCH病原IgG抗體，合計(jì)占比分別為29.98%、4.98%和2.54%。然而，針對(duì)TORCH病原的IgM抗體分析發(fā)現(xiàn)，主要為只攜帶1種TORCH病原IgM抗體，合計(jì)占比為10.02%，其次依次分別是2種、3種和4種TORCH病原IgM抗體。見表4、5。

3 討論

TORCH病原體感染可導(dǎo)致育齡婦女妊娠期宮內(nèi)感染、不良妊娠、胎兒出生缺陷等不良臨床后果，但多數(shù)感染者，特別是成年人無明顯臨床特異性表現(xiàn)，多為隱性感染從而導(dǎo)致忽視TORCH病原體抗體的篩查檢測(cè)[5]。本研究結(jié)果顯示，99.41%的研究對(duì)象既往感染過一種或多種TORCH相關(guān)病原（孕婦的IgG可通過血胎屏障傳遞給新生患兒），12.80%的研究對(duì)象處于現(xiàn)癥感染期。并且通過本文數(shù)據(jù)進(jìn)一步分析發(fā)現(xiàn)，既往感染過3種TORCH病原的病例比率最高，現(xiàn)癥感染中雖然只感染一種TORCH病原的病例占最大比率，但是仍有部分病例出現(xiàn)了多種TORCH病原的混合感染。這說明本文研究人群對(duì)TORCH病原普遍易感且病原感染情況復(fù)雜，文中12.8%的現(xiàn)癥感染者中原發(fā)性感染和再發(fā)性感染的分布情況本文將在后續(xù)做進(jìn)一步研究。

為了進(jìn)一步明確12.8%的現(xiàn)癥感染者在孕前婦女、孕早期婦女、新生患兒中的分布情況，本文對(duì)19 533例病例樣本進(jìn)行分組研究，發(fā)現(xiàn)HSV1/2和RV病原體的現(xiàn)癥感染率在孕前組和妊娠早期組較高，CMV和TOX病原體現(xiàn)癥感染率均低于上述兩種病原。但是在新生患兒組中CMV病原的感染率最高（0.29%），HSV2和TOX的IgM抗體檢測(cè)未出現(xiàn)陽性結(jié)果，同時(shí)新生患兒中也出現(xiàn)了同時(shí)現(xiàn)癥感染兩種病原的情況（0.10%）。上述結(jié)果說明，在孕前婦女、妊娠早期婦女、新生患兒中均有可能發(fā)生TORCH病原體的現(xiàn)癥感染或現(xiàn)癥混合感染。

本研究中CMV病原IgG抗體97.27%的陽性率與國內(nèi)外相關(guān)報(bào)道基本一致[6-8]。人體感染CMV后，病毒無法被機(jī)體清除，妊娠期孕婦內(nèi)分泌功能和免疫功能的改變，在一定條件下可導(dǎo)致CMV病原的再發(fā)感染[9]。過去認(rèn)為只有原發(fā)性CMV感染才會(huì)造成胎兒或新生患兒聽力和中樞神經(jīng)系統(tǒng)損傷[10]，但近年已有報(bào)道[11]，再發(fā)感染（外源性的再感染和體內(nèi)隱性感染病毒的再激活）同樣在胎兒或新生患兒生長發(fā)育過程中具有致畸作用。因此CMV感染在孕期的連續(xù)監(jiān)測(cè)檢測(cè)具有較高價(jià)值[12]。HSV分為1型和2型，其感染途徑主要通過患者和健康帶毒者分泌物與易感染的人密切接觸有關(guān)。目前已有研究報(bào)道稱HSV經(jīng)胎盤致胎兒畸形較為罕見，HSV對(duì)胎兒的感染主要是通過出生過程中接觸感染產(chǎn)婦生殖道分泌物所致[13-14]。因此，對(duì)孕前婦女、妊娠婦女和新生患兒均進(jìn)行HSV血清學(xué)篩查是有必要的。RV病原體抗體的感染性篩查主要目的是預(yù)防和診斷先天性風(fēng)疹綜合征，本文數(shù)據(jù)顯示RV-IgG陽性率72.25%介于國內(nèi)其他城市風(fēng)疹感染率之間[15-16]。因孕婦體內(nèi)的風(fēng)疹抗體可預(yù)防RV再次感染，因此孕前RV-IgG抗體和IgM抗體篩查即可滿足臨床診療需求。如果抗體陰性可通過注射疫苗達(dá)到預(yù)防感染作用。本文TOX病原體既往感染IgG抗體陽性率為3.73%，顯著低于歐美國家[17]，與國內(nèi)報(bào)道數(shù)據(jù)[18-19]基本一致。盡管TOX國內(nèi)感染率較低，但一旦孕婦感染TOX，可通過胎盤垂直感染胎兒，導(dǎo)致胎兒發(fā)育畸形、流產(chǎn)甚至死亡，故TOX檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性尤為重要。為避免篩查檢測(cè)中假陰性結(jié)果的出現(xiàn)，有必要同時(shí)進(jìn)行TOX-IgG抗體、TOX-IgM抗體、和其他檢測(cè)方法的聯(lián)合檢測(cè)[20]，避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。

綜上所述，TORCH病原體感染檢測(cè)應(yīng)強(qiáng)調(diào)孕前、孕早期、新生易感患兒的聯(lián)合檢測(cè)和結(jié)果的綜合判斷，通過不同階段檢測(cè)結(jié)果動(dòng)態(tài)評(píng)估TORCH對(duì)上述人群的感染風(fēng)險(xiǎn)，將進(jìn)一步提高TORCH檢測(cè)在優(yōu)生優(yōu)育中的實(shí)際價(jià)值。

[參考文獻(xiàn)]

[1] Nahmias AJ，Josey WE，Naib ZM，et al. Perinatal risk associated with maternal genital herpes simplex virus infection [J]. Am J Obstet Gynecol，1971，110（6）：825-837.

[2] Neu N，Duchon J，Zachariah P. TORCH infections [J]. Clin Perinatol，2015，42（1）：77-103.

[3] 章錦曼，朱寶生.產(chǎn)前診斷技術(shù)與規(guī)范[J].中國使用婦科與產(chǎn)科雜志，2015，33（90）：803-806.

[4] 倪安平.四種病毒和弓形蟲衣原體支原體感染實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)的重要性[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2003，26（3），133-135.

[5] 孫輝，熊敏，王淑媛.湘潭地區(qū)孕婦TORCH檢測(cè)分析[J].標(biāo)記免疫分析與臨床，2013，20（5）：300-302.

[6] Fatima T，Siddiqui H，Ghildiyal S，et al. Cytomegalovirus infection in pregnant women and its association with bad obstetric outcomes in Northern India [J]. Microb Pathog，2017，113：282-285.

[7] 龔波，張昕民，李俊，等.婦女風(fēng)疹病毒、弓形蟲、巨細(xì)胞病毒感染調(diào)查分析[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2011，15（3）：456-472

[8] 黃佩芬，王耀強(qiáng).番禺區(qū)孕前常規(guī)健康篩查TORCH的結(jié)果及意義[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2013，10（14）：1877-1878.

[9] 王彩鳳，張藴.宮內(nèi)感染與胎兒發(fā)育異常[J].中國實(shí)用婦科與產(chǎn)科雜志，2002，18（9）：526-529.

[10] Stagno S，Reynolds DW，Amos CS，et al. Auditory and visual defects resulting from symptomatic and subclinical congenital cytomegaloviral and toxoplasma infections [J]. Pediatrics，1977，59（5）：669-678.

[11] Boppana SB，Rivera LB，F(xiàn)owler KB，et al. Intrauterine transmission of cytomegalovirus to infants of women with preconceptional immunity [J]. N Engl J Med，2001，344（18）：1366-1371.

[12] de Jong EP，Vossen AC，Walther FJ，et al. How to use neonatal TORCH testing？ [J].The New England Journal of Medicine，2013，344（18）：1366-1371.

[13] Nahmias AJ，Norrild B. Herpes simplex viruses 1 and 2-basic and clinical aspects [J]. Dis Mon，1979，25（10）：1-49.

[14] Wolfert SI，de Jong EP，Vossen AC，et al. Diagnostic and therapeutic management for suspected neonatal herpes simplex virus infection [J]. J Clin Virol，2001，51（1）：8-11.

[15] 錢森林，李艷.湖北某地區(qū)2356例孕婦TORCH抗體檢測(cè)分析[J].檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床，2016，13（4）：522-523.

[16] 倪安平，郝英英，朱曉春，等.孕產(chǎn)婦四種病原體感染血清學(xué)篩查的研究[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，26（3）：142-144.

[17] Pinon JM，Dumon H，Chemla C，et al. Strategy for diagnosis of congenital toxoplasmosis：evaluation of methods comp？鄄aring mothers and newborns and standard methods for postnatal detection of immunoglobulin G，M，and A ant？鄄ibodies [J]. J Clin Microbiol，2001，39（6）：2267-2271.

[18] 陳艷.1876份TORCGH檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)，2014，18（12）：2052-2054.

[19] 徐敏，毛偉，何濤，等.重慶地區(qū)健康獻(xiàn)血人群弓形蟲抗體檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國輸血雜志，2017，30（1）：58-60.

[20] 崔京濤，馬良坤，倪安平.2008至2015年育齡婦女及新生兒TORCH血清學(xué)篩查及臨床意義分析[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2016，39（4）：281-285.

（收稿日期：2018-01-27 本文編輯：任 念）