低離子凝聚胺開展交叉配血試驗在輸血檢驗中的應用

趙芳賢

(陜西省商洛市中心血站, 陜西 商洛, 726000)

在臨床手術或搶救中，輸血治療能夠迅速改善患者供血不足、血液循環障礙等臨床癥狀。隨著輸血醫學的不斷發展，輸血的安全性已經備受社會關注，不僅關系到患者治療的有效性，還直接影響患者的生命安全[1]。如果輸血期間出現交叉配血錯誤，會導致急性溶血等嚴重的輸血反應，因此保證交叉配血的準確性、靈敏性十分重要。傳統的鹽水法交叉配血技術只能檢測出免疫球蛋白M(IgM)抗體，難以完全、準確地檢測出免疫球蛋白G(IgG)抗體，因此漏檢率較高[2]。低離子凝聚胺法作為近年來新發展的交叉配血方法，可以快速、準確地檢測出IgM和IgG抗體[3]。低離子凝聚胺技術不僅可以檢測出完全IgG抗體，同時對不完全IgG抗體和特殊IgG抗體均具有較高的靈敏性，彌補了鹽水法的不足[4]。研究[5-6]顯示，鹽水法的假陰性率較高，易導致患者出現嚴重的輸血反應。本研究探討低離子凝聚胺開展交叉配血試驗在輸血檢驗中的應用價值，現報告如下。

1　資料與方法

1.1　一般資料

收集本站血型室2017年2月—2018年2月接受輸血治療的患者樣本126例，隨機數字法分為觀察組和對照組各63例。觀察組患者中男29例，女34例; 年齡16～48歲，平均年齡(23.14±5.36)歲; 輸血原因: 車禍傷24例，肝硬化食管靜脈破裂19例，胃癌11例，產后大出血7例，慢性貧血2例。對照組患者中男31例，女32例; 年齡17～50歲，平均年齡(23.14±5.36)歲; 輸血原因: 車禍傷23例，肝硬化食管靜脈破裂21例，胃癌10例，產后大出血6例，慢性貧血3例。2組患者在性別、年齡、輸血原因構成等一般資料上無顯著差異(P>0.05)。納入標準: ① 無嚴重血液系統疾病; ② 無傳染性疾病; ③ 無嚴重精神性疾病; ④ 已簽署之情同意書。排除標準: ① 嚴重肝、腎、心、肺功能不全者; ② 妊娠期或哺乳期女性患者。

1.2　試劑與儀器

低離子凝聚胺試劑盒購自珠海貝索生物技術有限公司。低離子凝聚胺法試劑組成: R1液為低離子介質, R2液為凝聚胺，R3液為假凝集清除液。鹽水法所用試劑為0.9%無菌生理鹽水購自南京樂診生物技術有限公司。儀器包括: TD4ZB血型血清學多用離心機，購自上海斯歐醫療器械有限公司; MM-3D數碼正置金相顯微鏡，購自上海萬衡精密儀器有限公司; HS-6001型電熱恒溫水箱，購自北京長源實驗設備廠。

1.3　方法

對照組采用鹽水法開展交叉配血試驗，具體方法如下: 抽取患者4 mL靜脈血，在試管上注明受血者和供血者的姓名，然后采用離心機對血液樣本進行離心，分離出血清，離心機轉速為3 000 轉/min, 離心時間為2 min。將紅細胞調配成3%～5%紅細胞鹽水懸液，供血者血液樣本采用相同方式配置為2%紅細胞鹽水懸液。取一支干凈試管，裝入受血者血清和供血者紅細胞懸液，并標記為主側管; 再取另一支干凈試管裝入供血者血清和受血者紅細胞懸液，并標記為次側管。刪除(將1滴供血者血清滴入主側管, 1滴受血者血清滴入次側管)混勻后離心，離心機轉速為1 000 轉/min, 離心時間為1 min, 觀察結果。若2支試管中紅細胞仍處于凝集狀態，則為陽性，若凝集狀態消失，則為陰性。

觀察組采用低離子凝聚胺法開展交叉配血，具體方法如下: 采血方法與對照組相同，在試管上明確標出主、次側管。在主側管中加入2滴受血者血清和1滴3%～5%供血者紅細胞懸液，在次側管中加入2滴供血者血清和1滴3%～5%受血者紅細胞懸液。在主、次側管中分別加入0.5 mL低離子介質，充分混勻, 25 ℃靜置1 min。再分別加入2滴凝聚胺試劑，混勻后離心，離心機轉速為3 500 轉/min, 離心時間為15 s。離心結束后去上清，觀察試管底部凝集狀況。在主、次側管中加入2滴假凝集清除液，混勻后觀察。若2支試管中紅細胞處于凝集狀態且不消失，則為陽性，若凝集狀態60 s后消失，則為陰性。

1.4　統計學方法

采用SPSS 19.0進行數據的統計分析，計量資料均采用均值±標準差表示，并通過t檢驗對數據進行分析; 計數資料以百分數(%)表示，并通過卡方檢驗對計數資料和構成比進行統計分析，檢驗指標設置為α=0.05,P<0.05為差異有統計學意義。

2　結　果

2.1　2組患者檢測時間、陽性檢出率及紅細胞 凝集情況比較

觀察組所需要的檢測時間為(2.14±1.36) min, 顯著短于對照組的(7.33±1.15) min (P<0.05); 觀察組陽性檢出率為15.87%(10/63), 且肉眼可見細胞凝集，而對照組陽性檢出率為4.76%(3/63), 只在顯微鏡下可見2～4個紅細胞凝集, 2組比較有顯著差異(P<0.05)。

2.2　2種檢測方法靈敏度、穩定性、準確性對比

觀察組靈敏度、穩定性、準確性分別為93.65%、90.48%、90.48%, 對照組靈敏度、穩定性、準確性分別為79.37%、76.19%、74.60%, 2組比較有顯著差異(P<0.05)。見表1。

表1　2種檢測方法靈敏度、特異性、準確性對比[n(%)]

與對照組比較, *P<0.05。

3　討　論

交叉配血試驗是臨床中判斷能否進行輸血的重要依據，其檢測的準確與及時關系到患者的生命安全。交叉配血的主要原理是將供血者的血清和紅細胞與受血者的血清和紅細胞混合，觀察有無凝集反應[7]。配血過程中包括主側配血和次側配血。前者是將受血者血清和供血者紅細胞相混合，觀察受血者血清中是否含有針對供血者紅細胞的抗體，后者是將供血者血清和受血者紅細胞相混合，觀察供血者血清中是否含有針對受血者紅細胞的抗體，若2次試驗均發現無凝集現象，則配血成功[8]。目前臨床中開展交叉配血的方法很多，主要包括鹽水法、抗球蛋白法、凝聚胺法等。鹽水法檢測方式雖然簡便，但只能對ABO血型進行粗略檢測，檢測的抗體較為局限，以IgM為主，對IgG抗體無法有效檢測[9]。駱建華等[10]研究顯示，鹽水法開展交叉配血具有耗時長、漏檢率高等缺點，無法及時滿足臨床需要。低離子凝聚胺法作為一種新興的交叉配血方法，其原理在于凝聚胺離子溶解后會產生大量正電荷，能夠有效中和紅細胞表面唾液酸帶有的負電荷，有利于凝集。同時低離子溶液可降低紅細胞Zeta電位，增加抗原抗體間的引力，促進特異性凝集[11]。張紅等[12]研究發現，低離子凝聚胺法在交叉配血中，檢測靈敏度和準確性較高，能及時、準確地為臨床提供可靠配血依據，減少溶血反應。

本研究結果顯示，低離子凝聚胺法所需要的檢測平均時間僅為(2.14±1.36) min, 明顯低于鹽水法。同時對陽性率統計發現，低離子凝聚胺法陽性檢出率高達15.87%, 且肉眼可見細胞凝集，而鹽水法檢出率為4.76%, 只在顯微鏡下可見2～4個紅細胞凝集。從結果中可以看出低離子凝聚胺法相比鹽水法，靈敏度較高，凝聚現象明顯，具有快速、高效、穩定等優點。臨床中在保證輸血安全性的同時，減少配血時間并提高輸血效率可以有效降低患者死亡率。在低離子凝聚胺技術中所用到的假凝集清除液可將非特性凝集消除，減少假陽性配血的發生。文獻[13]報道稱，該方法不僅能快速的檢測出紅細胞表面的相應抗體，同時也可避免非特異性凝集的發生，有效降低假陽性率。通過統計2種檢測方法靈敏度、穩定性、準確性也可以看出，低離子凝聚胺法靈敏度、穩定性、準確性分別為93.65%、90.48%、90.48%, 均明顯高于鹽水法。結果進一步說明了低離子凝聚胺法靈敏度、穩定性和準確性均較高。有研究顯示，低離子凝聚胺法容易受氯化鉀、維生素C等外界藥物影響，從而產生假陰性、假陽性結果，因此檢測過程中應采取有效措施避免其發生。

總之，低離子凝聚胺法開展交叉配血試驗臨床價值十分明顯，可快速檢測出IgG和IgM抗體，促進紅細胞與不規則抗體發生反應，陽性檢出率高，耗時較短，具有簡便、高效、準確性高等優勢。在臨床配血中可有效降低溶血反應的發生，提高患者輸血的安全性，同時也可減少受血者的醫療費用，在臨床實踐中具有良好的應用前景。