路紀芳 ,蔡靜蕓 ,趙 斌 ,展茂魁 * ,唐艷龍 ,王 健 ,司徒春南
(1. 貴州省遵義市林業科學研究所,貴州 遵義 563000;2. 遵義師范學院,貴州 遵義 563000)
花絨寄甲(Dastarcus helophoroidesFaimaire),又名花絨穴甲、花絨堅甲、木蜂寄甲和縊翅寄甲,同物異名D. longulusSharp,是 天牛類昆蟲的重要寄生性天敵。原 隸屬鞘翅目( Coleoptera)堅 甲科( Colydiidae),后獨立出來成為穴甲科(Bothrideridae)昆蟲[1-4]。 2004 年,楊忠岐[5]認 為這種甲蟲為寄生性昆蟲,故將其中文名改為更能反映其生物學習性的名稱——花絨寄甲。
花絨寄甲是我國重大林業害蟲——天牛的主要天敵[4],針對其生物學特性、防治技術國內外已經進行了大量研究。張彥龍等[6]研 究了花絨寄甲對松褐天牛越冬后幼蟲或蛹的控制作用以及在林間大規模防治的技術方法,結果表明花絨寄甲是松褐天牛老熟幼蟲和蛹的高效天敵。近幾年,就花絨寄甲室內人工繁育技術許多研究者也進行了一些研究,目前已經實現了其室內人工飼養[7], 但花絨寄甲幼蟲對替代寄主的寄生率較低,大大增加生產成本,這也是影響花絨寄甲實現工廠化生產的關鍵問題。為了提高替代寄主的利用率,筆者研究了花絨寄甲初孵幼蟲對替代寄主的寄生力,確定了花絨寄甲初孵幼蟲的最佳接蟲時間,為進一步完善人工繁育花絨寄甲技術提供必要的依據和技術支持。
試驗選取室內新羽化的健康花絨寄甲成蟲 300 頭,隨機放入帶有蓋子的塑料培養盒內,蓋子四周各留1 個透氣孔(φ= 5 mm),每盒放入成蟲 30頭,共 10盒。培養盒內放入水管和飼料供成蟲補充水分和營養,在盒子的中間放置一塊墊有產卵基質的松木塊,待 成蟲放入后將培養盒放在恒溫恒濕培養箱內( 溫度25 ℃,濕度 60%,無光照)飼養。
當培養室內的花絨寄甲成蟲開始大量產卵后,每天 08:00 把產有卵粒的基質(卵卡)取出,并更換新的產卵基質。連續取卵卡10 d,將取出的卵卡放入干凈的培養盒內(第一天取出的卵卡丟掉不要),蓋上盒蓋并標注產卵日期,將培養盒放入恒溫恒濕培養箱內(溫度 25 ℃,濕度 80%)培養。當培養箱內的卵卡開始孵化后,每天 08:00 把同一天孵化的幼蟲放入同一個培養盒內,盒內放置一個裝有濕海綿的培養皿,蓋上蓋子,并在盒子上標記日期。從卵孵化出來當天 08:00 的幼蟲到第二天 08:00 的幼蟲,定義為 1 日齡幼蟲,第二天 08:00 的幼蟲到第三天 08:00的幼蟲,定義為 2日齡幼蟲……直到幼蟲全部死亡。
挑選大小一致、健康程度相似的新鮮大麥蟲蛹作為替代寄主,供花絨寄甲初孵幼蟲接種。培養箱內的卵開始孵化后,每天08:00 在實驗室內把不同日齡的初孵幼蟲接種在新鮮蛹腹部,每頭蛹上接 10 頭健康活躍的幼蟲。接種后的蛹放在平底離心管內,管口塞上脫脂棉,同一個處理放在同一個培養盒內,然后置于培養箱(溫度為 25 ℃,濕度為 60%)內培養。每個處理 30個重復。
替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d,每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內幼蟲的生長情況,并記錄存活幼蟲數量。接種45 d后,成蟲羽化,在實驗室內掏出每個試管內羽化成蟲并記錄成蟲數量,如果試管內有繭未羽化出成蟲,撥開繭看里面蟲體的狀態并做記錄。
替代寄主接種上花絨寄甲初孵幼蟲后前 15 d,每隔 5 d在解剖鏡下觀察試管內幼蟲的生長情況,分別用數字 1,2,3,4,5 表示接種后5,10,15 d,化蛹期,羽化期,用i表示觀察的時間,i= 1,2,3,4,5,Li表示某時期寄主體表幼蟲或繭和成蟲的數量,D表示存活率,某個記錄時間i的存活率為:
i=1 時,Di=Li/10
i=2,3,4,5 時,Di=Li/Li-1
本試驗所有數據采用 SPSS16.0 進行統計分析,不同處理間的均值差異采用 LSD 法多重比較。
一般情況下,在溫度為 25 ℃,濕度為 60%的培養箱內花絨寄甲初孵幼蟲接種在寄主體表 45 d,成功寄生的幼蟲就會羽化為成蟲。結果表明,2 日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數最大,為 4.60 頭,最小的為 5 日齡幼蟲,2.43頭。且 1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異(df=4,149,S<0.001,F=4.96),而 1日齡、2日齡、3 日齡和 4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無差異(df=3,119,S=0.500,F=0.794)( 圖 1)。
試驗測定了同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5,10,15 d、化蛹期和羽化期的存活率,結果表明初孵幼蟲接種后 5,1 0,1 5 d、化蛹期和羽化期的存活率均呈顯著差異(1日齡:df=4,149,F=46.843,S=0.000;2 日齡:d f=4,149,F=13.006,S=0.000;3 日齡:d f=4,149,F=15.080,S=0.000;4 日齡:d f=4,149,F=28.935,S=0.000;5 日齡:d f=4,149,F=30.707,S=0.000),且各日齡初孵幼蟲接種后5 d 的存活率均為最低,分別為50.67%、55.67%、48.33%、48.00%和 33.00%(圖 2) 。這表明花絨寄甲幼蟲接種到替代寄主后前 5 日是影響出蟲率的關鍵時期。
試驗還測定了不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種到替代寄主體表后 5,10,15 d和蛹期的死亡率,結果表明不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異(df=4,149,F=7.536,S=0.000),而其它時間均無差異(df=4,149,F=0.093,S=0.985;df=4,149,F=0.414,S=0.799;df=4,149,F=0.527,S=0.716;df=4,149,F=0.998,S=0.411)。

圖2 初孵幼蟲接種后不同時間在替代寄主體表存活率
花絨寄甲是大型天牛類林木蛀干害蟲最為有效的天敵昆蟲,已引起我國林業科研工作者的關注,并就如何利用該天敵昆蟲做了大量的研究和實踐工作[3]。 研究表明,花絨寄甲初孵幼蟲依靠發達的胸足迅速爬行尋找寄主,找到寄主后,在寄主幼蟲的節間咬食,咬破表皮后將頭部插入寄主體內,取食體內物質[1,8]。 因此在人工飼養過程中,明確幼蟲的最佳接種時間是有效提高寄生力的關鍵。本研究為了明確花絨寄甲幼蟲的最佳接種時間,在實驗室內測定了前 5 日齡花絨寄甲初孵幼蟲對替代寄主的寄生率,試驗結果表明,2日齡幼蟲接種替代寄主后成蟲出蟲數最大,為 4.60 頭,最小的為5 日齡幼蟲,2.43 頭。且1 日齡、2 日齡、3 日齡、4 日齡和 5 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率呈極顯著差異,而1 日齡、2 日齡、3日齡和4 日齡幼蟲之間接種替代寄主后成蟲出蟲率無差異。該研究結果說明在室內進行花絨寄甲人工繁育時,可在幼蟲孵化后 2日和3 日進行接種,以提高產量。
本研究還測定了初孵幼蟲接種到替代寄主體表后不同時間的死亡率,結果表明,對于同日齡花絨寄甲初孵幼蟲,各日齡初孵幼蟲接種后5 d的死亡率均為最高,分別為 49.33%、44.33%、51.67%、52.00%和67.00%,且各日齡初孵幼蟲接種后 5,10,15 d和蛹期死亡率之間均呈顯著差異;不同日齡花絨寄甲初孵幼蟲,初孵幼蟲接種后 5 d的死亡率呈極顯著差異,而其它均無差異。該結果可為花絨寄甲的規模化繁育生產提供理論依據。
本研究中采用花絨寄甲前 5日齡初孵幼蟲進行試驗,因為試驗中,在溫度為 25 ℃,濕度為 60%的培養箱內,無食物和水分供給的情況下,幼蟲存活第 4日活動力就有所減弱,第 5日大量幼蟲已經死亡,第6 日基本沒有存活的幼蟲。在文獻中尚沒有查到相關報道,接下來會進行進一步研究。
[1]秦錫祥, 高瑞桐.花絨堅甲生物學特性及應用研究[J]. 昆蟲知識, 1988, 25(2): 109-112.
[2]王希蒙, 任國棟, 馬峰. 花絨穴甲的分類地位及應用前景[J]. 西北農業學報, 1996, 5(2): 75-78.
[8]王小東, 黃煥華, 許再福, 等. 花絨堅甲的生物學和生態學特性研究初報[J]. 昆蟲天敵, 2004,26(2): 60-65.
[3]魏建榮, 楊忠岐, 馬建海, 等. 花絨寄甲研究進展[J]. 中國森林病蟲, 2007, 26(3): 23-25.
[4]楊李, 董廣平. 花絨寄甲應用研究綜述[J]. 四川林業科技, 2012, 33(6): 76-78.
[5]楊忠岐. 利用天敵昆蟲控制我國重大林木害蟲研究進展[J]. 中國生物防治, 2004, 20(4): 221-227.
[6]張彥龍, 楊忠岐, 張翌楠, 等. 利用花絨寄甲防治越冬后松褐天牛試驗[J].林業科學, 2014, 50(3): 92-98.
[7]姜嫄. 松褐天牛的天敵: 花絨寄甲繁殖生物學研究[D]. 哈爾濱: 東北林業大學, 2012.