SREBP1在多囊卵巢綜合征和Ⅰ型子宮內膜癌中的表達及意義

鈕紅麗，王孜涵，翟俊英

0 引言

子宮內膜癌(Endometrial cancer，EC)是發生于女性子宮內膜的一組上皮性惡性腫瘤，以雌激素依賴型(Ⅰ型)較為常見[1]。Ⅰ型EC患者固醇調節元件結合蛋白質1 (Sterol regulatory element binding protein 1，SREBP1)表達上調，與患者脂代謝紊亂相關[2]。多囊卵巢綜合征(Polycystic ovary syndrome，PCOS)是一種多發于育齡期婦女的內分泌、糖脂代謝異常性疾病，影響患者生育能力，增加患者內分泌失調、罹患心血管疾病的風險[3]。研究表明，PCOS可能增加患者發生Ⅰ型子宮內膜癌的風險，嚴重影響女性身體健康和生命安全[4]。然而，PCOS和EC發病的分子機制尚不明確。因此，尋找與PCOS和Ⅰ型EC疾病相關的基因，對評估PCOS和EC發病風險具有重要價值。本研究旨在通過檢測PCOS患者和Ⅰ型EC患者血清中SREBP1水平，分析其與PCOS患者和Ⅰ型EC患者代謝參數之間的關系，探討SREBP1水平與PCOS和EC發病的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2015年10月至2017年7月在我院婦產科診治的PCOS患者47例、Ⅰ型EC患者41例為研究對象，選取同期45例正常女性體檢者作為對照。其中PCOS組年齡(39.75±11.97)歲，EC組年齡(50.95±19.84)歲。PCOS診斷標準[5]：①月經稀發、閉經、子宮不規律流血；②至少一側卵巢直徑2～9 mm小卵泡數目≥12和/或卵巢體積≥10 ml；③血清睪酮≥60 mg/dl或雄烯二酮≥9.5 nmol/L。PCOS組納入標準：①符合鹿特丹會議修訂的診斷標準[5]，即出現第1條和2～3條任一癥狀且排除其他病因者，可診斷為PCOS；②子宮內膜經組織病理學檢查未見異常增生者；③臨床資料完整患者。PCOS組排除標準：①排除分泌雄性激素瘤患者；②排除1、2型糖尿病患者；③排除甲狀腺功能障礙患者；④排除3個月內接受過藥物或手術治療患者。Ⅰ型EC組納入標準：①經組織檢查首次確診為子宮內膜癌患者；②Ⅰ型子宮內膜癌患者；③患者1個月均未進行任何放化療及激素治療；④臨床資料保存完整。EC組排除標準：①排除Ⅱ型子宮內膜癌患者；②排除其他惡性腫瘤患者；③排除1、2型糖尿病患者；④排除年齡超過70歲的患者。選取同期月經正常、因其他因素在我院檢查的健康女性45例作為對照，年齡(48.79±12.73)歲。本研究經我院道德倫理委員會批準通過。所有患者均知悉全部研究內容，并簽署知情同意書。

1.2 研究方法

1.2.1 臨床參數檢測 基本參數：分別測量各受試者身高、體重、臀圍、腰圍等并做好記錄，計算腰臀比(Waist-hip ratio，WHR)和體重指數(Body mass index，BMI)，WHR=腰圍/臀圍；BMI=體重/身高2。

生化參數：采集受試者清晨空腹肘靜脈血(5 ml/例)，采用DI-806全自動生化分析儀(江西英諾華醫療公司)檢測三酰甘油(Triglycerides，TG)、總膽固醇(Total cholesterol，TC)、高密度脂蛋白膽固醇(High density lipoprotein cholesterol，HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(Low density lipoprotein cholesterol，LDL-C)水平及空腹血糖(Fasting blood-glucose，FBG)、空腹胰島素(Fasting insulin，FINS)水平。根據HOMA-IR=FINS×FBG/22.5，計算各受試者胰島素抵抗指數(Homeostasis model of assessment for insulin resistance index，HOMA-IR)。

1.2.2 ELISA法檢測血清SREBP1水平 主要試劑：ELISA SREBP1試劑盒(武漢華美生物公司)。采用酶聯免疫吸附(Enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)法檢測各受試者血清中SREBP1蛋白含量，嚴格按照ELISA試劑盒說明書進行操作。

2 結果

2.1 不同婦女血清中SREBP1含量比較 Ⅰ型EC組、PCOS組、對照組血清中SREBP1含量分別為(467.59±59.77)、(384.75±36.91)、(211.38±30.39) pg/ml，三組比較差異有統計學意義(F=392.854，P<0.05)。Ⅰ型EC組血清SREBP1含量高于PCOS組和對照組(P<0.05)；PCOS組血清SREBP1含量高于對照組(P<0.05)。

2.2 受試者基本資料比較 對照組、PCOS組、Ⅰ型EC組WHR、MBI均逐漸升高，差異有統計學意義(P<0.05)。PCOS組患者年齡小于Ⅰ型EC組和對照組，差異有統計學意義(P<0.05)；Ⅰ型EC組與對照組年齡比較，差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 受試者基本資料比較

注：*與對照組比較，P<0.05；#與PCOS組比較，P<0.05

2.3 三組受試者脂代謝指標比較 與對照組比較，PCOS組和Ⅰ型EC組的TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平升高，HDL-C水平降低，差異均有統計學意義(P<0.05)；與PCOS組比較，Ⅰ型EC組TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平升高，HDL-C水平降低(P<0.05)。見表2。

2.4 血清SREBP1含量與Ⅰ型EC、PCOS患者代謝參數的相關性分析 Spearman檢驗結果表明，血清SREBP1含量與PCOS患者BMI(r=0.549)、WHR(r=0.517)、TG(r=0.731)、LDL-C(r=0.573)、HOMA-IR(r=0.624)水平呈正相關，差異均有統計學意義(P<0.05)；與TC、Apo A、Apo B、HDL-C水平無明顯相關性，差異無統計學意義(P>0.05)。血清SREBP1含量與Ⅰ型EC患者BMI (r=0.581)、WHR (r=0.607)、TG (r=0.683)、HOMA-IR (r=0.597)水平呈正相關，差異均有統計學意義(P<0.05)；與TC、Apo A、Apo B、HDL-C、LDL-C水平無明顯相關性(P>0.05)。見表3。

2.5 影響PCOS患者發病的危險因素分析 Logistic多因素回歸分析表明，在調整年齡、BMI、WHR、脂代謝參數、胰島素抵抗等因素后，血清SREBP1、HOMA-IR是影響患者PCOS患者發病的危險因素(OR=1.327，95%CI1.025～1.718，P<0.05；OR=1.307，95%CI1.011～1.670，P<0.05)。見表4。

2.6 影響Ⅰ型EC患者發病的危險因素分析 Logistic多因素回歸分析表明，在調整年齡、BMI、WHR、脂代謝參數、胰島素抵抗等因素后，血清SREBP1是影響 Ⅰ 型EC患者發病的危險因素(OR=2.723，95%CI1.017～7.219，P<0.05)。見表5。

3 討論

PCOS是一種病因復雜、臨床表現多樣的內分泌代謝紊亂疾病[6]，在我國育齡婦女中的發生率為5%～10%[7]。EC是發生于女性生殖器最常見的婦科惡性腫瘤之一，近年來，其發病呈年輕化趨勢[8]。隨著PCOS疾病的發展，患者易發生Ⅰ型EC等疾病，嚴重威脅女性生命健康。

SREBP是哺乳動物細胞中一類固醇調節元件結合蛋白，存在SREBP1a、SREBP1c和SREBP2 3種形式，其表達受到細胞中胰島素和固醇水平調控，參與調節組織細胞中脂肪的合成，SREBP1主要參與調節脂肪酸合成和代謝[9]，而SREBP2主要參與膽固醇調節[10]。Guo等[11]發現，SREBP1不僅參與調解癌癥發生過程中的脂質合成，還可激活磷脂酰肌醇-4、5-雙磷酸鹽3-激酶(PI3K)通路，協同促進膠質母細胞瘤等腫瘤細胞的增殖和生長。Lin等[12]發現，與正常子宮內膜比較，EC患者子宮內膜組織中SIRT1和SREBP1表達上調，可通過促進腫瘤細胞脂質合成促進子宮內膜腫瘤生長。本研究結果顯示，與對照組比較，PCOS組、EC組患者血清中SREBP1含量明顯增加，與Lin等[12]在EC患者中的結論一致。推測血清SREBP1表達異常可能是導致PCOS、EC發病的原因之一。

脂肪呈男性化分布即中心性肥胖，是脂代謝異常的一個重要標志。Moran等[13]發現，PCOS患者往往存在脂肪代謝異常，表現為肥胖，發生胰島素抵抗和心血管疾病的風險較高[14]。Papalou等[15]發現，PCOS的發生與患者BMI呈正相關。本研究顯示，PCOS組WHR、MBI高于對照組，且WHR、MBI是影響PCOS發病風險的危險因素。表明PCOS患者體型多呈中心性肥胖。血脂異常是代謝紊亂的另一重要表現。易丹妮等[16]發現，PCOS患者往往存在脂肪代謝異常，并發現與肥胖、高胰島素血癥及胰島素抵抗有一定關系。本研究發現，PCOS患者的TG、TC、LDL-C水平均顯著升高，且TG、LDL-C、HOMA-IR與血清SREBP1含量呈正相關，與易丹妮等[16]結論一致。結果表明，PCOS患者存在血脂代謝紊亂，與SREBP1異常表達有關。胰島素抵抗在女性中很常見，尤其是在超重和肥胖的人群中，是一種PCOS常見并發癥。洪宇等[17]也發現，PCOS患者血脂異常發生率為24.7%，其中合并IR組的TG、TC、LDL、HDL均顯著高于非IR組。本研究顯示，PCOS患者HOMA-IR水平均高于2.69，判斷為胰島素抵抗。進一步分析發現，PCOS患者HOMA-IR水平與血清SREBP1含量呈正相關，推測血清SREBP1表達上調可能導致PCOS患者脂肪代謝紊亂，加劇胰島素抵抗的發生。

表2 三組受試者脂代謝指標比較

注：*與對照組比較，P<0.05；#與PCOS組比較，P<0.05

表3 SREBP1含量與代謝指標的相關性分析

表4 SREBP1表達與PCOS發生的關系

表5 SREBP1表達與Ⅰ型EC發生的關系

高血壓、糖尿病、肥胖等是導致Ⅰ型子宮內膜癌發生的危險因素，增加子宮內膜癌的發病率[18]。Shaw等[19]發現，肥胖女性(30 kg/m235 kg/m2)則比正常體重女性增加4.7倍；尤其是中央脂肪的增加與子宮內膜癌發病風險和子宮內膜癌特異性死亡率密切相關。Mahdi等[20]發現，患有子宮內膜癌的嚴重肥胖患者發生手術并發癥和感染性并發癥的比例顯著高于正常體重患者。本研究顯示，EC患者的WHR、MBI與血清SREBP1含量呈正相關，均明顯高于對照組女性，表現為中心性肥胖，且WHR、MBI是影響EC發病風險的危險因素，表明肥胖可能是導致EC發生的因素之一。進一步研究發現，EC患者的TG、TC、LDL-C、HOMA-IR水平均顯著高于對照組，且EC患者的TG、HOMA-IR與血清SREBP1含量呈正相關。表明EC患者存在血脂代謝紊亂和胰島素抵抗，且可能與SREBP1表達異常有關。

研究表明，SREBP1與脂代謝紊亂、宮頸癌、卵巢上皮性癌等疾病的發生、發展相關。張占薪等[21]研究表明，SREBP1在宮頸癌組織中表達上調，其表達與宮頸癌臨床分期和病理分級有關，提示SREBP1參與宮頸癌的發生、發展。聶龍云等[22]研究顯示，卵巢上皮性癌組織中SREBP1的陽性表達率明顯高于卵巢良性腫瘤，SREBP1陽性表達率與卵巢上皮性癌患者組織學分級和FIGO分期有關，是影響患者預后的因素之一，推測SREBP1與卵巢上皮性癌的發生、發展及預后有關。李衛華等[23]發現，SREBP1在子宮內膜癌組織中高表達，其表達與子宮內膜癌組織分化情況相關，SREBP1 shRNA可顯著抑制子宮內膜癌細胞的增殖及侵襲，推測內源性SREBP1參與子宮內膜癌的進展與轉移。本研究結果表明，血清SREBP1、BMI、WHR、TG、HOMA-IR是影響PCOS患者和EC患者發病的危險因素，進一步分析發現，只有SREBP1是影響患者PCOS和EC發病風險的危險因素。Gottschau等[24]對12 070例曾被診斷為PCOS的患者進行研究，發現279例PCOS女性被確診為EC，發病風險增加近4倍。據此推測，血清SREBP1異常可能是影響PCOS女性發生EC風險的原因之一，但影響EC發生的因素較多，該部分研究較少，仍需大量研究進行證實，本課題組將于后期進行相關研究。

綜上所述，SREBP1在PCOS患者和EC患者血清中含量增加，與PCOS患者WHR、BMI、TG、LDL-C、HOMA-IR水平呈正相關，與EC患者WHR、BMI、TG、HOMA-IR水平呈正相關，是影響PCOS和EC發病風險的危險因素。推測SREBP1可作為預測PCOS疾病和EC疾病發生的有效生物指標。

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