HBV感染者DNA載量分層與血小板相關參數關系

邵璇璇，賈建安，吳黎黎， 黃其峰， 管世鶴

乙型肝炎患者受到感染病毒后，部分患者可轉為慢性肝炎，如未經合理有效的治療則會進一步可發展為肝硬化，再轉為肝癌最后導致死亡，因此是我國當前流行和危害程度較為嚴重的疾病之一。近年的研究[1-2]顯示，乙型肝炎患者常伴隨著血小板(blood platelet，PLT)數量下降的現象，其主要原因可能是乙型肝炎病毒通過對骨髓巨核細胞的抑制造成其成熟不良而引起的。因此，對PLT、血小板比容(thrombocytocrit,PCT)、平均血小板體積(mean platelet volume,MPV)、血小板分布寬度(platelet distribution width,PDW)以及大血小板比率(platelet larger cell ratio,P-LCR)等PLT相關參數的檢測和分析成為了慢性乙型肝炎患者治療決策和預后判斷重要參考。盡管目前關于乙型肝炎與PLT參數的相關研究較多[3-4]，但對于不同乙型肝炎病毒DNA(hepatitis B virus DNA，HBV DNA)載量以及不同性別和年齡與PLT參數變化關系的報道相對較少。該研究通過對169例無癥狀乙肝攜帶者的HBV DNA載量、性別和年齡與PLT相關參數進行相關性分析，明確PLT參數變化在臨床治療中的意義。

1 材料與方法

1.1病例資料選擇2016年4月～2016年8月解放軍第105醫院門診及住院的無癥狀乙肝攜帶者169例，其中男94例，女75例，排除其他類型肝炎及血液系統疾病。根據不同HBV DNA載量以及不同年齡分別進行了分類，檢測其PLT各參數指標和HBV DNA，并按照HBV DNA載量分為3組：<103IU/ml，103～105IU/ml，>105IU/ml。同時選取了250例健康體檢者作為對照，按照年齡和是否乙肝攜帶分為對照低齡組(健康，≤45 歲)、對照高齡組(健康，>45歲)、陽性低齡組(乙肝攜帶，≤45 歲)和陽性高齡組(乙肝攜帶，>45歲)4組。

1.2主要儀器與試劑HBsAg采用蘇州新波生物技術有限公司的時間分辨熒光定量儀進行檢測，HBV DNA檢測試劑購自廈門安普利公司，儀器為廈門安普利GeneLight9800 PCR儀，PLT參數采用Sysmex XE-2100全自動血細胞分析儀及其配套試劑檢測。

1.3檢測方法實時熒光定量PCR檢測HBV DNA下限為500 copy/ml。按照儀器和試劑說明書操作并每日做質控對照，采用全自動血細胞分析儀檢測PLT參數。

2 結果

2.1HBVDNA載量、性別、年齡等對PLT參數的影響對HBV感染者DNA載量、性別以及年齡對PLT參數的影響進行了多因素方差分析，見表1(僅列出差異具有統計學意義的PLT參數)，不同HBV DNA載量、不同年齡對PLT和PCT有顯著影響(P<0.05)，但性別對PLT和PCT參數的影響無統計學意義。

表1 HBV感染者相關因素對PLT參數影響

2.2年齡對HBV感染者PLT相關參數影響的差異分析對健康對照和HBV-DNA陽性人群按性別和年齡分組后，分析了不同年齡的PLT相關參數的差異。結果表明： HBV陽性感染者的PLT相關參數與相同年齡的健康對照組相比，PLT、PCT以及P-LCR參數在高齡組中均存在顯著差異(表2、3)，其它參數在不同的年齡組中差異有統計學意義(P<0.05)。

2.3不同HBVDNA載量對PLT相關參數影響的差異分析根據HBV DNA載量，將HBV陽性感染患者分為3組，進一步對不同HBV DNA載量與PLT相關參數的差異進行了分析。從結果可以看出，隨著HBV DNA載量的升高，其PLT和PCT參數隨之降低，差異達到顯著水平(P<0.05)，PDW在DNA高載量組中顯著性降低，而MPV和P-LCR參數變化并不顯著(表4)。

2.4HBVDNA載量與PLT相關參數的線性相關性分析按照不同年齡組，分別對HBV陽性患者中HBV DNA載量與PLT相關參數的線性相關性進行了分析。結果表明在低齡組HBV感染者中，PLT相關參數的變化與HBV DNA載量均無顯著相關關系(表5)；在高齡組患者中，HBV DNA載量與PLT和PCT參數變化呈顯著負相關關系，而MPV、PDW和P-LCR則無顯著相關關系，與以上分析結果較為一致。

表2 男性健康對照組與HBV感染者的PLT參數比較

與對照低齡組比較：*P<0.05;與對照高齡組比較：#P<0.05

表3 女性健康對照組與HBV感染者的PLT參數比較

與對照低齡組比較：*P<0.05;與對照高齡組比較：#P<0.05;與陽性低齡組比較：ΔP<0.05

表4 HBV DNA 載量分層與PLT相關參數差異分析

與<103組比較：*P<0.05;與103～105組比較：#P<0.05

表5 HBV DNA載量與PLT相關參數的相關分析(r值)

*P<0.05

3 討論

PLT是由骨髓造血干細胞中的巨核細胞發育而成，PLT相關參數(PLT、PCT、MPV、PDW和P-LCR)是反映血小板生成與衰亡、診斷血小板相關疾病的的重要參數和依據[2,5]。隨著全自動血細胞分析儀等檢測技術的快速發展，使臨床上對PLT相關參數的檢測更加方便快捷，為評估各種疾病的PLT生成與功能、巨核細胞增生的動態變化提供了可靠的方法[6]。

PLT數量的降低是HBV感染患者中常見的并發癥，關于HBV 感染引起PLT 減少的原因較為復雜。近年來的一些研究[7]表明，骨髓細胞的生長會受到HBV DNA的抑制，并且拷貝數與抑制效應有一定的劑量依賴關系。因此，對PLT相關參數的測定有助于判斷HBsAg陽性者的病情程度和愈后情況[8]。本研究通過將年齡和性別因素納入分析，對不同HBV DNA載量與PLT相關參數進行差異分析，結果顯示不同HBV DNA載量和不同年齡對PLT和PCT均有有顯著影響，而性別對PLT參數的影響并不顯著。進一步的分析顯示，在高齡組的HBV感染人群中，PLT和PCT參數較對照組顯著降低，差異達到顯著水平。同時，隨著HBV DNA載量的升高，PLT和PCT參數的降低同樣達到顯著差異水平。

HBV DNA是判斷HBV復制和傳染性的金標準。本文研究表明，HBV DNA載量與PLT參數之間存在著一定的關系。HBV DNA載量越大，對巨核細胞的抑制作用可能就越強，進而可能導致PLT的顯著減少，這與有關的報道也較為一致。如施士宇[9]通過臨床統計發現肝炎病毒對骨髓巨核細胞具有明顯抑制作用進而導致PLT減少；張欣 等[10]通過對臨床250例肝病患者進行統計分析，發現肝病的發生程度與PLT相關參數異常正相關。PLT和PCT降低與HBV DNA載量的升高在45歲以上的高齡人群中有密切的關系，其可能原因是HBV DNA 載量對骨髓巨核細胞分化發育具有抑制或破壞作用，而在低于45歲的HBV感染者人群中并無相關關系，這可能與不同年齡人群中骨髓代償功能差異引起的。PLT和PCT只在高齡組患者中與HBV DNA載量呈顯著負相關，說明骨髓抑制并非HBV感染人群PLT降低的唯一原因。因此，HBV DNA與PLT參數之間的關系仍有待進一步研究與探討。

因此，對乙肝患者臨床治療不僅要分析HBV DNA載量的變化，同時還應檢測患者的PLT相關參數，有利于臨床了解患者的病情及預后，為患者制定最佳治療方案。

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