牙周炎合并AECOPD患者血清IL-6、IL-8水平及相關(guān)性研究

楊 揚(yáng)，李 威，王左敏，孫耕耘，周 平，韓曉蘭

關(guān)于牙周炎與慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease，COPD)的相關(guān)性研究正在逐漸深入[1]。COPD是一種以不完全可逆的氣流受限為特點(diǎn)的呼吸系統(tǒng)疾病，研究[2]表明牙齦卟啉單胞菌、具核梭桿菌、伴放線聚集桿菌和中間普氏菌等牙周致病菌能夠刺激呼吸道上皮細(xì)胞產(chǎn)生細(xì)胞因子，其中炎癥因子如白細(xì)胞介素6(interleukin 6，IL-6)、白細(xì)胞介素8(interleukin 8，IL-8)被認(rèn)為在疾病發(fā)生發(fā)展過(guò)程中起到了重要的病理作用。IL-6是多功效細(xì)胞因子，一方面參與牙周炎活動(dòng)期的炎癥反應(yīng)和免疫反應(yīng)，誘導(dǎo)破骨細(xì)胞生成、持續(xù)聚集及破骨活性的發(fā)揮，再次加劇牙周局部組織的破壞[3]；另一方面，IL-6可激活中性粒細(xì)胞并促進(jìn)單核細(xì)胞及T細(xì)胞釋放TNF-α及干擾素等促炎因子，引起支氣管肺泡黏膜的損傷，促進(jìn)免疫粘附和微血栓的形成，加重COPD的炎癥程度和呼吸困難[4]。IL-8是慢性阻塞性肺疾病發(fā)病機(jī)制中最主要的相關(guān)炎性介質(zhì)。并且IL-8參與了牙槽骨的破壞和吸收，在牙周病的進(jìn)展過(guò)程中，其過(guò)量產(chǎn)生導(dǎo)致粒細(xì)胞的過(guò)度激活，不僅直接導(dǎo)致牙周組織破壞，還進(jìn)一步影響宿主的炎癥反應(yīng)和免疫進(jìn)程[5]。為了探討慢性牙周炎及慢性阻塞性肺疾病急性加重(acute exacerbation of chronic obstructive pulmonary disease, AECOPD)患者牙周狀況、肺功能狀況及血清IL-6、IL-8水平變化，現(xiàn)設(shè)計(jì)了病例對(duì)照研究的方法，以分析IL-6和IL-8與慢性牙周炎及AECOPD病理機(jī)制的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1病例資料收集2017年1～5月在安徽醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院呼吸內(nèi)科及安徽省第二人民醫(yī)院呼吸內(nèi)科確診為AECOPD患者，選取合并中、重度慢性牙周炎患者32例，記為AECOPD+P組，包括：男20例，女12例，年齡46～85(67.97±8.9)歲。收集安徽醫(yī)科大學(xué)研究生學(xué)院全身及牙周健康人32例，記為H組，包括：男性10例，女性22例，年齡24～28(25.95±3.6)歲。選取32例單純牙周炎中、重度患者，記為P組，包括：男18例，女14例，年齡52～85(64.28±9.4)歲。選取單純急性期慢性阻塞性肺疾病患者32例，記為AECOPD組，包括：男性15例，女性17例，年齡40～86(66.08±7.8)歲。采集所有受試者的一般資料，包括性別、年齡、身高、體質(zhì)量、種族、居住地、吸煙史、既往史、家族史、發(fā)病危險(xiǎn)因素接觸史等。

1.2研究對(duì)象入選標(biāo)準(zhǔn)要求在近6個(gè)月內(nèi)未做過(guò)牙周治療，包括齦上潔治術(shù)、齦下刮治術(shù)、根面平整術(shù)、牙周手術(shù)，未使用過(guò)藥用漱口水。年齡在18周歲以上且全口牙數(shù)大于等于15顆。無(wú)心腦血管疾病、腫瘤、糖尿病、遺傳性疾病、自身免疫性疾病。其中AECOPD患者的入選標(biāo)準(zhǔn)是根據(jù)呼吸內(nèi)科的入院診斷，診斷為AECOPD的患者進(jìn)行入選，AECOPD診斷標(biāo)準(zhǔn)包括肺功能檢查、X線檢查、CT檢查、血?dú)鈾z查、肺功能檢查。要求患者入院前1個(gè)月內(nèi)未自行大劑量服用急性期慢性阻塞性肺疾病用藥，包括抗生素、激素類(lèi)、氣管擴(kuò)張藥、各類(lèi)中藥。穩(wěn)定期維持類(lèi)藥物除外。所有入選的牙周炎患者牙周狀況要保持基本一致，保持資料具有均衡可比性。

1.3研究對(duì)象排除標(biāo)準(zhǔn)排除標(biāo)準(zhǔn)為存在全身其他疾病，包括：① 1型與2型糖尿病；② 心血管疾病；③ 消化系統(tǒng)疾病；④ 家族遺傳性疾病；⑤ 血液系統(tǒng)疾病；⑥ 除慢性阻塞性肺疾病外無(wú)其他呼吸系統(tǒng)性疾病。

1.4牙周狀況檢測(cè)將全口牙列按四分法分區(qū)，參考牙周病流行病學(xué)的牙周健康指數(shù)，檢測(cè)指標(biāo)包括牙松動(dòng)度檢查、牙周袋探診深度(probing depth，PD)、牙齦溝出血指數(shù)(sulcus bleeding index，SBI)、附著水平(attachment level，AL)。

1.5肺功能檢測(cè)檢測(cè)肺功能的主要指標(biāo)：最大肺活量(VC Max)，第一秒用力呼氣容積(FEV1)，第一秒用力呼氣容積與用力肺活量的比值(FEV1/FVC)。

1.6血清IL-6和IL-8水平測(cè)定血液采集時(shí)間一般盡量為入院當(dāng)天晚上，最遲為入院第2天清晨5～6點(diǎn)，不超過(guò)入院24 h，采集期間24 h內(nèi)未用藥。采集受檢者空腹靜脈血2.5 ml，半小時(shí)后2 500 r/min離心15 min取血清，放入-80 ℃環(huán)境保存。使用ELISA法檢測(cè)血清水平。檢測(cè)前將血清及試劑盒平衡至室溫20～25 ℃方可實(shí)驗(yàn)。操作按檢測(cè)試劑盒(Abcam公司，英國(guó))說(shuō)明書(shū)。實(shí)驗(yàn)用酶標(biāo)儀(Infinite M1000PRO TCAN公司，瑞士)。

2 結(jié)果

2.1牙周狀況AECOPD+P組和P組牙松動(dòng)度均為Ⅱ～Ⅲ度，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；AECOPD+P組與P組SBI、PD結(jié)果差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，AL指標(biāo)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表1。

2.3IL-6與IL-8水平AECOPD+P組較H、P、AECOPD組血清IL-6與IL-8水平均明顯升高(P<0.000 1)；P組和AECOPD組較H組血清IL-6與IL-8水平均明顯升高(P<0.000 1)。見(jiàn)表3。

2.2肺功能AECOPD+P組與AECOPD組比較主要肺功能指標(biāo)均差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果見(jiàn)表2。

表1 AECOPD+P組與P組牙周探診臨床指標(biāo)的比較

表2 AECOPD+P組與AECOPD組肺功能檢測(cè)指標(biāo)的比較

3 討論

牙周炎以牙菌斑為始動(dòng)因子，累及牙周支持組織，其發(fā)生發(fā)展受局部促進(jìn)因素和全身性促進(jìn)因素的雙重影響，機(jī)體自身的免疫炎癥反應(yīng)可進(jìn)一步加快和加劇牙周組織的破壞。AECOPD是指在疾病過(guò)程中，患者短期內(nèi)咳嗽、咳痰、氣短和(或)喘息加重、痰量增多，呈膿性或者黏膿性，可伴發(fā)熱等炎癥明顯加重的表現(xiàn)[6]。國(guó)內(nèi)外研究[7]表明，COPD患者口腔健康狀況普遍較差。本次研究顯示AECOPD合并慢性牙周炎患者普遍存在牙齦出血、深牙周袋形成、牙齒松動(dòng)、牙周附著較為嚴(yán)重的情況；有研究指出附著>3 mm是罹患COPD的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[8]，本研究的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示隨著附著水平的增加，肺功能改善情況愈差，也進(jìn)一步印證了這一觀點(diǎn)。本次實(shí)驗(yàn)還顯示，AECOPD+P組較P組患者牙周健康水平更差，尤其是附著水平更嚴(yán)重，提示慢性阻塞性肺疾病炎癥因子可能加速牙周附著的發(fā)生，或使原有的牙周附著進(jìn)一步加重。慢性牙周炎的致病因子牙菌斑可作為呼吸道致病菌的儲(chǔ)存庫(kù)，唾液及齦溝液中的牙周炎相關(guān)酶類(lèi)、纖維連接蛋白、溶解酶等可以改變氣道黏膜表面，從而促進(jìn)呼吸道致病菌的黏附和定植[9]，另一方面，牙周炎癥的相關(guān)酶類(lèi)能夠破壞COPD病菌表面的唾液薄膜從而使它們逃避唾液將其從黏膜表面清除的作用，造成致病菌的持續(xù)聚集，故而牙周疾病亦可升高慢性阻塞性肺疾病的患病風(fēng)險(xiǎn)并促進(jìn)疾病的惡化程度。呼吸系統(tǒng)的炎癥促進(jìn)白細(xì)胞介素等炎癥細(xì)胞因子的過(guò)量產(chǎn)生與集聚，通過(guò)氣道吸入及血源途徑與口腔相通，在牙周炎的發(fā)生發(fā)展中起到加劇牙周破壞的作用[10]，兩者相輔相成。

表3 AECOPD+P組與H組、P組、AECOPD組血清IL-6和IL-8水平的比較

與H組比較：*P<0.000 1；與 P組比較：*P<0.000 1；與 AECOPD組比較：▲P<0.000 1

本次研究顯示，IL-6和IL-8在四組研究對(duì)象外周血中均可檢測(cè)出，其中正常人組血清含量水平為最低。AECOPD+P組較P組血清含量明顯升高，且附著更嚴(yán)重，提示慢性阻塞性肺疾病急性期炎癥反應(yīng)可能加重牙周炎癥狀況。AECOPD+P組較AECOPD組血清含量升高，提示牙周病可能促進(jìn)慢性阻塞性肺疾病急性期的炎癥程度。這兩組實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)結(jié)合住院病歷資料提示兩者的病理進(jìn)程可能存在相互作用關(guān)系。慢性阻塞性肺疾病急性加重炎癥的發(fā)生發(fā)展可能導(dǎo)致自身的慢性牙周炎炎癥程度加重，而牙周炎炎癥程度的加深也會(huì)對(duì)慢性阻塞性肺疾病肺功能的改善產(chǎn)生不良影響。

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