金黃色葡萄球菌檢測輔助手段
——HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒

◎ 王東玉

（錫林郭勒職業學院，內蒙古 錫林浩特 026000）

金黃色葡萄球菌（Staphyloccocus aurens）是一種重要病原菌，隸屬于葡萄球菌屬（Staphyloccocus），呈革蘭氏陽性。金黃色葡萄球菌廣泛存在于自然界中，與人類生活相關的空氣、灰塵、水等自然界中均能檢測到金黃色葡萄球菌[1]。在世界各個國家中，由金黃色葡萄球菌引起的食物中毒在細菌性食物中毒中均占較大比例，已成為世界性的公共衛生問題[2-3]。

根據國家標準GB 4789.10-2010金黃色葡萄球菌檢驗中的方法，約需78 h方可出結果，此方法存在耗時長、工作量大的缺陷，很難適應現在快速檢驗要求。目前，金黃色葡萄球菌檢測在日常微生物檢驗工作中所占比重越來越大，所以選出一個簡便、快捷并準確的方法變得十分有必要。本文研究了HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒對金黃色葡萄球菌檢驗的作用，將結果進行分析研究，旨在探求一種適應食品微生物實驗室檢測要求的快速準確的方法，為提高今后金黃色葡萄球菌檢測效率提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 主要培養基與試劑

TSA平板（青島高科園海博生物技術有限公司），Baird-Parker平板（北京路橋技術股份有限公司），HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒（廣東環凱微生物科技有限公司）。

1.1.2 試驗菌株

金黃色葡萄球菌（CMCC26003），表皮葡萄球菌（CICC10294），糞腸球菌（ATCC29212），藤黃球菌（CMCC28001）。

1.1.3 儀器設備

分析天平，生物安全柜，生化培養箱，高壓滅菌鍋。

1.2 試驗方法

將4株純化好的試驗菌株分別劃線于Baird-Parker平板，培養48 h后待用。根據HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒說明書，先滴一滴測試液于測試片上，然后挑取單個菌落混勻于測試液中，晃動2 min左右，觀察凝集現象。根據上述方法，挑取60株金黃色葡萄球菌、20株表皮葡萄球菌、20株糞腸球菌、20株藤黃球菌分別進行乳膠凝集試驗，觀察凝集現象。

2 結果與分析

120株分離菌株在HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑上的試驗結果見表1。60株金黃色葡萄球菌在2 min內均出現明顯凝集反應；20株表皮葡萄球菌均未出現凝集反應；20株藤黃球菌均未出現凝集反應；20株糞腸球菌均出現凝集反應，但凝集現象不明顯。

表1 120株分離菌株在葡萄球菌乳膠凝集試劑上的凝集結果表

通過試驗結果分析可知，HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑在金黃色葡萄球菌檢測中靈敏度為100%，特異性為66.6%。

在試驗過程中發現，接種量的多少會影響凝集現象產生的快慢。接種量少，凝集產生慢且不明顯，接種量多，凝集產生快且明顯，但均不影響試驗結果的判斷。

3 結論與討論

Baird-Parker法需在接種后48 h觀察平板，并挑取可疑菌落轉種到BHI肉湯中，再經18～24 h培養后做血漿凝固酶試驗進行證實[4]。一般耗時約需78 h，操作步驟繁瑣、耗時長、工作量大。而在Baird-Parker法接種平板48 h后，可利用HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑，通過有無凝集現象來快速初步判斷是否為金黃色葡萄球菌。由于HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑在金黃色葡萄球菌檢測中靈敏度高，但特異性不強，所以在出現凝集反應后，需按照國家標準GB 4789.10-2016進行后續證實試驗，如未出現凝集反應，在保證菌落純度高的前提下，在應急檢測中可不做后續證實試驗。

在金黃色葡萄球菌檢測占日常微生物檢驗工作比重越來越大的今日，HM43葡萄球菌乳膠凝集試劑盒可作為一種簡便、快捷的輔助手段，來實現實驗室金黃色葡萄球菌快速檢測的要求，尤其在食物中毒等應急檢測方面更顯其使用方便的優越性，值得在微生物實驗室日常檢測中推廣應用。

[1]趙永勝.兩種不同培養基分離金黃色葡萄球菌的比較[J].河南預防醫學雜志，2017（11）：834-835.

[2]李自然，施春雷，宋明輝，等.上海市食源性金黃色葡萄球菌分布狀況[J].食品科學，2013（1）：268-271.

[3]陳廣全，張惠媛，曾 靜.微生物檢驗[M].北京：中國標準出版社，2010：351-352.

[4]梁景濤，謝 翊，林秋芬，等.3種食品中金黃色葡萄球菌檢測方法的比較研究[J].中國衛生檢測雜志，2010（4）：790-791.