黑果腺肋花楸的組織培養快繁技術

田明芳

黑果腺肋花楸具有食用、藥用、園林觀賞和生態環境改善等價值，對人類十分有益，在種植地區，人們已投入生產。黑果腺肋花楸適應性極強，具有很強的抗寒能力和抗旱能力，我國有大片干旱地區和高寒地帶，若能引種成功，將擴大種質資源對土地的利用率。下面主要圍繞黑果腺肋花楸的引種及利用組織培養快繁技術展開探討，從組織培養快繁技術的各個階段的必要操作和注意事項進行論述。

1.研究意義

黑果腺肋花楸屬薔薇科，原產地是北美東北部地區，極地特有的環境條件，那里的植物都能蓄積較多人體所需而溫和地區不能供給給人體的微量元素。黑果腺肋花楸色、香、味俱全，具有很高的觀賞價值，還富含黃酮等物質，其提取物對心腦血管疾病有突出的療效，在西方適宜種植的國家已用來提取藥物成分。黑果腺肋花楸還有不老莓的別名，顧名思義，此果有很好的保健作用，富含大量維生素和多酚，含有抗氧化劑，可以抗衰老，用來萃取精油支撐化妝品也是不二之選。我國除遼寧省干旱地區造林研究所引種外，暫無栽培。黑果腺肋花楸采用各種繁殖方式均可進行繁殖，采用組織培養快繁技術可以人工控制環境，提高抗逆性，增強適應性。引入新品種，可以增加園林觀賞性。我國有大量的薔薇科植物，如月季、桃、李、杏種植栽培歷史悠久，因而種植黑果腺肋花楸有很大的可能性。如果能引種栽培成功，后期大面積推廣，對我國種質資源利用將會有突出貢獻。

2.無菌培養物的建立

2.1外植體的選擇

組織培養快速繁殖選擇的外植體一般為莖尖、芽、嫩梢和莖段、鱗芽和原球莖等，根據植物本身的特性選擇外植體。黑果腺肋花楸莖尖容易進行套袋采摘及無菌化處理，而且容易形成愈傷組織，因而選用帶有三四個芽的莖尖進行組織培養。

2.2外植體的滅菌與接種

取回的外植體應盡快進行表面滅菌處理，剪除多余部分，先用自來水沖洗30min以上，在70%的酒精中迅速浸泡30s左右，再用稀釋15倍的潔爾滅溶液浸泡3min，取出后用無菌水沖洗4～5次，在無菌條件下接種到已備好的培養基上。

3.外植體生長與分化的誘導

比較不同濃度培養基中外植體的生長可看出，適宜濃度的培養基下外植體發育快，較易形成愈傷組織，出芽率高，濃度過高或過低都會影響外植體的發育速度和出芽速度，甚至導致外植體階段就死亡的現象。

為誘導芽的分化生長，據實驗數據得出加入0.2mg·L-1的NAA，1.0mg·L-1的6-BA時，出芽率最高，莖尖離體組織生長旺盛，基部形成芽叢。在出芽階段，要保證操作在無菌環境下進行，否則容易導致病毒細菌感染。根據外植體形成愈傷組織和生長情況適時控制培養基溫度和光照時間，每隔一周記錄出芽情況。

4.生根與壯苗培養

由于繼代培養形成的不頂芽和側芽等一般沒有根，必須轉移到生根培養基上進行生根培養。經過實驗表明，培養基配制為MS+ABT6.0mg·L-1時，黑果腺肋花楸的離體組織生根率可以達到100%。因而采用此培養基，待根原基形成時立即移栽，不容易感染，而且栽后能很快生根，具有較高的成活率。

壯苗時可以控制室內溫度，加入培養基中的糖含量。黑果腺肋花楸本身含有多種礦物質元素，因而在培養基上可以加入礦物質元素和微量元素，增加培養基的營養成分。

5.試管苗的出瓶與栽移

隨著試管苗瓶外生根技術的發展，工廠常采用穴盤苗進行移栽，不僅簡單易行，育苗周期短，而且操作流程一體化，植株抗逆性強、繁殖系數高。試管苗大小的選擇和黑果腺肋花楸的植株大小有密切關系，太小會抑制根的延伸與生長，太大又會增加培養基物質的使用量。

生根苗馴化后可移植到經高溫消毒加有50～60%草炭、30～40%蛭石、10%左右珍珠巖的方形穴盤中進行后續生長。控制土壤PH在5.0～8.0之間，黑果腺肋花楸的抗寒性和抗旱性較強，對溫度沒有太高的要求。若有葉片老化脫落，應立即處理，防止腐爛，影響其他部位的生長，也要及時摘掉枯黃葉片，保持無細菌、無病毒感染的環境。

育苗時要多次少量澆水，防止植株倒伏或發育不良，按時定量施肥能讓植株長勢更旺，保證充足的光照，促進光合作用，可以積累植株體內的花青素，增加每株的花青素含量。

作對照實驗，可以比較不同情況下植株的長勢情況，進行拍照存檔。從對照實驗中可以得到黑果腺肋花楸的最適合的培養條件，把植物所需的土壤、水分、光照、溫度、有效積溫都調節好，能夠快速育種。

由于引進新品種沒有前人的操作經驗，借鑒常規的組織培養快速繁殖技術，應保證操作的熟練度和整個過程的無菌化進行，防止植株感染細菌、病毒。控制各個階段的光照時間和溫度，每隔三四天記錄植株的長勢情況，移栽試管苗后適當的澆水施肥，進行養護管理。建立適宜的環境和自動化大規模生產與植株的生長有很大聯系，如果能進行工廠化生產栽培，那么黑果腺肋花楸將會有很大的前景。

（作者單位：123100國有阜蒙縣林業科技示范林場）