馬鈴薯脫毒苗快繁生產管理技術

王洪德

隨著高科技的發展 ，作為植物營養繁殖的一個新手段，組織培養技術成為現代生物領域及現代農業生產的一項基本操作手段，其繁殖速度是一般常規方法所不能比的。通過無菌方法進行快繁的方法能在較短的時間和較少的空間內由1個個體迅速繁殖大量群體，實驗室脫毒馬鈴薯試管苗的離體繁殖正是借助這一顯著優勢，在國內外種薯生產上得以廣泛利用，是脫毒馬鈴薯原種大規模產業化生產的前提。

經過多年的實際探索及對馬鈴薯實驗室的改進，大幅度增加了脫毒馬鈴薯原種的生產數量，而脫毒馬鈴薯的優勢，即高產和不易腐爛，被農民（特別是靠天吃飯及高海拔地區的農民）及市場接受，收到了良好的經濟和社會效益，為地方的經濟發展做出了貢獻。

1培養基及其制作對瓶裝苗的生長影響

1.1培養基材料對試管苗的生長影響

培養基包括大量元素、微量元素、鐵鹽、食用白糖、自來水、瓊脂。試管苗單節切斷繁殖宜采用固體培養基，如果工作人員在培養基滅菌過程中，不慎放氣不均，一般滅菌后拿出來的培養基過稀（成糊狀），影響接苗質量和幼苗生長；相反，如果培養基硬度太大，切斷不易插入培養基中，影響苗切斷與培養基的接觸。

1.2培養基制作對試管苗成活率的影響

在快繁苗時，所需的培養基一般應提前2周做，以防使用被污染的培養基，影響試管苗的成活率。如筆者4月中旬快繁大西洋苗時，由于培養基的污染超過了10%，影響很大。另外，培養基的瓶或盒上的水珠影響快繁苗的污染和強壯生長。

2溫度對瓶裝脫毒苗生長的影響

夏天晝長夜短，日光燈照射比冬天短，而 自然 照射光多，可提高組培瓶苗移栽后的成活率；但夏天比冬天室內溫度高，污染增高，所以室內需裝空調。一般溫度應控制在20～25℃范圍內，溫度高于26℃，則苗頂端易產生燒苗現象，高于33℃，則苗停止生長。另外，瓶中或盒中的培養基要比平時多放，以防抽干盒或瓶中的培養基，影響幼苗的正常生長。

生長間的生長架以用玻璃層為宜，因利用散射光可提高組培瓶苗移栽后的成活率。試驗表明，用玻璃作為培養層的生長架比用鐵作為生長架好。用鐵做的生長架，散熱效果比較差，當生長間放滿用鐵做的生長架時，一般早上關燈后，繼續讓空調再開2～3h才能保證整個生長間的溫度較適合幼苗的生長。

3快繁瓶裝苗的控制

在快繁脫毒苗時，瓶中如少放脫毒苗，其長得快，脫毒苗節間長、葉大且須根發達；如放多脫毒苗，其長得慢，脫毒苗弱、葉小且挨瓶的苗腐爛。這2種情況對快繁都不利，故快繁苗時，在瓶中放40～50根脫毒苗為宜；同時快繁脫毒苗應控制苗的節間。

4瓶苗污染的控制

在脫毒瓶苗的繼代培養過程中，常因種種原因出現細菌類和真菌類污染，細菌污染苗極弱，且擴繁后下一代大部分表現為細菌污染，在生產中通常用抗生素來處理細菌污染。對于真菌污染的脫毒瓶苗，除嚴格操作規程外，可在培養基中配制不同濃度多菌靈來減輕瓶苗污染率。最主要是快繁留的基礎脫毒苗沒有細菌和真菌的污染。而對于繼代擴繁4年以上的瓶苗，要定期進行病毒檢測確認是無病毒苗。因此，要定期更新脫毒瓶苗，每年應通過剝離莖尖組織的辦法培養新鮮無病毒瓶苗，以確保繼代培養脫毒瓶苗質量。

5無菌操作室內消毒滅菌

5.1操作前消毒

一是無菌室剛開始工作或間隔1～2個月未進行消毒時，先把高錳酸鉀倒入培養皿，再倒入甲醛，關閉門窗進行熏蒸消毒，間隔1～2d即可在室內工作；二是將工作服、口罩、拖鞋、盛裝75%的酒精瓶、剪刀、鑷子、苗源瓶、快繁瓶等無菌室所需物品放在無菌室固定位置，啟動超凈工作臺，通風殺菌，并將室內紫外燈打開消毒，工作人員快速離開無菌室，滅菌25～30min即可。

5.2操作中消毒

工作人員進入隔離間，穿戴好消毒服裝，在組培室用75%的酒精將雙手消毒，再用酒精泡的酒精棉擦超凈工作臺，同時將鑷子、剪刀和支撐干用酒精擦過后，放在加熱器進行5～6s的消毒，并將已挑揀好的無污染的脫毒苗放在超凈工作臺上，先打開滅菌過的快繁瓶放在超凈工作臺上，然后擰開脫毒苗瓶的口，用已滅菌過的鑷子將脫毒苗瓶中的小苗夾出瓶口，只留根部在瓶內，用剪刀剪掉根部，然后再用鑷子夾小苗離快繁瓶口1～2cm（注意不要讓小苗挨上快繁瓶瓶口，以防感染），剪帶1片小葉莖放在快繁瓶中。蓋上蓋子，在苗瓶外壁用打號槍注明該品種的編號及快繁日期。

6定期檢查

放在生長間的快繁脫毒苗，一般每隔7d要用稀釋好的清潔爾滅噴撒滅菌，每天早關燈和晚開燈時，發現有污染的瓶苗，必須馬上將其拿出生長間，并放入高壓滅菌鍋滅菌，然后用清潔熱水加入適量洗衣粉，用刷子涮洗苗瓶，并換水沖洗，然后倒置木架上晾干水珠待用。健康苗20多天就可快繁或移栽溫室。

7取苗

在取苗時，有時也有真菌污染的脫毒苗，不能作快繁苗但可以作移栽苗。如果下一批苗要得急，取苗的同時需做培養基，若在同一間進行，帶有真菌的脫毒苗被取出時，就會污染正在做的培養基，故應分開進行。

（作者單位：163515黑龍江省大慶市大同區大同農業局農業指導站）