結直腸腺癌中DNA結合/分化抑制蛋白-1和血管內皮生長因子-C的表達及意義

劉 寧 繆 巍 燕 速 馬曉明 楊賢達

(青海大學附屬醫院胃腸腫瘤外科，青海 西寧 810001)

結直腸腺癌主要見于中老年人，病變形成后的主要播散途徑是淋巴道播散〔1〕。近年人們關注腫瘤間質的淋巴結管生成，認為淋巴管新生與淋巴管生成因子有關，最重要的淋巴管生成因子是血管內皮生長因子(VEGF)-C，其可以與受體結合，促進間質的淋巴管新生，為轉移提供必要的結構〔2,3〕。DNA結合/分化抑制蛋白(ID)-1是近年發現的一種分化抑制因子，通過抑制環-螺旋-環轉錄因子的作用調節腫瘤細胞的增殖及轉移〔4〕。本文關注結直腸腺癌中ID-1和VEGF-C的表達特點，探討其臨床價值。

1 資料與方法

1.1臨床資料 2016年1～12月青海大學附屬醫院住院治療、經病理學確診并行手術根治的患者67例為觀察組。納入標準：①臨床資料完整；②符合WHO中的診斷標準；③患者或家屬簽署知情同意書。排除標準：①伴有其他器官惡性腫瘤；②林奇綜合征；③腸道疾病手術史；④術前有放、化療史。其中男35例，女32例，年齡46～86歲，平均57.3歲。上述患者標本中距腫物邊緣>8 cm的非腫瘤性結腸黏膜組織45例為對照組。其中男23例，女22例，年齡47～81歲，平均58.3歲。兩組性別、年齡比較差異無統計學意義，具有可比性。

1.2ID-1和VEGF-C表達檢測 兩組均應用免疫組化二步法檢測ID-1和VEGF-C的表達。ID-1和VEGF-C試劑均為標準的濃縮液，先進行預實驗，按不同比例進行稀釋，選擇染色效果最好的濃度用在正式實驗，即ID-1配比濃度是1∶50，VEGF-C配比濃度是1∶100。正式實驗均由同一技師進行操作，二氨基聯苯胺(DAB)顯色，做好質控工作。

1.3ID-1和VEGF-C結果 ID-1和VEGF-C的陽性表達部位均為腫瘤細胞的細胞質(部分病例的間質中的弱表達不計為陽性)。著色強度：無著色為0分；弱著色為1分，中等程度著色為2分，強著色為3分。選擇上皮細胞分布區且染色較為明顯的區域進行計數，共選擇2個高倍視野，取平均值，以<5%為0分，≥5%且<10%為1分，≥10%且<30%為2分，≥30%且<50%為3分，以≥50%為4分。按著色強度和陽性率的評分之和進行評定。以≤3分為陰性，>3分為陽性。

1.4統計學方法 采用SPSS17.0統計軟件進行χ2檢驗和線性相關分析。

2 結 果

2.1兩組中ID-1和VEGF-C表達的比較 觀察組ID-1和VEGF-C表達的陽性率明顯高于對照組(P<0.001)。見表1。

表1 兩組中ID-1和VEGF-C陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2觀察組中ID-1和VEGF-C的陽性率在不同臨床特征分組中的比較 ID-1和VEGF-C表達與病變的增殖指數、脈管累犯和淋巴結轉移密切相關，ID-1表達與腫瘤分化程度和浸潤深度密切相關。見表2。

2.3觀察組中ID-1和VEGF-C表達的相關性 ID-1和VEGF-C表達呈正相關(r=0.54，P=0.041)。

表2 ID-1和VEGF-C在觀察組不同臨床特征中表達陽性率的比較〔n(%)〕

3 討 論

結直腸上皮細胞發生異型增生、癌變后，對肌層和周圍組織進行侵犯，形成浸潤性腺癌〔5〕。腫瘤多為高、中分化的，具有腺管樣結構，部分病例由于異型增生明顯，可以表現為低分化，并伴有黏液腺癌形成〔6〕。腫瘤間質可以觀察到比正常結腸黏膜間質更多的淋巴管，這些淋巴管可以為腫瘤細胞進入淋巴循環提供直捷通路〔7〕。淋巴管在腫瘤進展時是由淋巴管內皮細胞增殖后形成的，其中促進增殖的因子最常見的是VEGF-C和VEGF-D，二者也被稱為淋巴管生長因子〔8,9〕。VEGF-C是最早發現的，也是作用最強的，其作用途徑是通過VEGF受體(VEGFR)2實現的，當VEGF-C和VEGFR2結合后，使淋巴管內皮細胞的DNA復制，細胞增生繁殖，同時在淋巴液的沖擊作用下形成管腔，使淋巴液在管腔中流動，進入淋巴管的腫瘤細胞通過此途徑形成轉移性播散〔10,11〕。ID-1基因具有癌基因的特征，被認為有“永生化”的特征，其具有阻止細胞分化、促進細胞增殖的作用〔12,13〕。也有研究認為ID-1過度表達可以延遲細胞老化〔14〕。近年研究顯示ID-1高表達可以促進血管生成，同時對淋巴管生成也有一定的調節作用，ID-1調節轉移的過程主要是對脈管生成的促進作用實現的〔15〕。本研究結果提示ID-1和VEGF-C二者具有癌基因樣的作用，是促進腫瘤形成的重要因素。ID-1和VEGF-C表達上調后可以引起腫瘤細胞的失控性增殖、脈管侵犯和淋巴道播散的形成。ID-1可以調節腫瘤的分化和鄰近組織直接蔓延。ID-1升高時可以調節腺癌細胞的分化，而分化作為細胞在發育進程中的表達過程，其也是細胞生長過程中不同時期細胞形態的反映，ID-1表達上調，細胞處于幼稚階段，腫瘤細胞異型性明顯，與起源組織的差別小，核染色深，此類細胞具有高度增殖的特征。本文結果提示，ID-1和VEGF-C二者具有正向協同作用，ID-1對淋巴管生成因子具有促進作用〔16〕，因此ID-1的作用可能具有多向性。ID-1可能是上游基因，調節VEGF-C、表皮生長因子受體和磷酸肌醇-3-激酶/蛋白激酶B等信號通路，引起細胞增殖和遷移〔17〕。但是否ID-1/VEGF-C/VEGFR-3是一個淋巴管生成的通路有待更多實驗證實。

4 參考文獻

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