花生四烯酸代謝產物20-HETE、EETs、DHETs與腦梗死相關性研究

陳義明 易興陽 余澤珍 周強

腦血管疾病已成為嚴重威脅人類健康的慢性非傳染性疾病，其中我國國民最主要的腦血管疾病類型是腦梗死。引起腦梗死的危險因素除了傳統的高血壓、吸煙、糖尿病以及其它慢性炎癥以外，遺傳因素也位列其中，如有研究表明花生四烯酸的代謝產物與腦梗死有密切關系[1-4]。本研究探討花生四烯酸細胞色素P450（CYP）的代謝產物20-羥基二十碳四烯酸（20-HETE）、環氧二十碳三烯酸（EETs）和二羥基二十碳三烯酸（DHETs）水平與腦梗死的相關性，現報道如下。

1 對象和方法

1.1 對象 選取2012年8月至2015年2月溫州醫科大學附屬第三醫院收治的急性腦梗死患者395例（腦梗死組），均為發病72 h內入院。排除標準：（1）心源性腦梗死、其它病因的腦梗死及病因不明確的腦梗死患者；（2）既往有卒中病史的患者；（3）腦出血；（4）伴有其它遺傳疾病者。另擇同期溫州醫科大學附屬第三醫院體檢中心的391例體檢者為對照組，經病史、體檢及實驗室檢查證實無顱內病變，無腦血管疾病家族史，無遺傳性疾病史，且與腦梗死組患者之間無血緣關系。兩組受檢者性別、年齡、BMI、吸煙史、飲酒史、TC、LDL-C、HDL-C、TG等比較差異均無統計學意義（均P＞0.05）。

1.3 20-HETE、EETs、DHETs水平檢測 腦梗死組患者入院第2天采集4ml全血注入乙二胺四乙酸溶液中，離心后分離血漿移至-80℃液氮中保存。20-HETE、EETs、DHETs檢測采用穩態同位素稀釋氣體層析法/質譜儀（上海生工生物工程有限公司）進行分析。對照組在體檢中心采血，血樣按上述同樣方法處理。

1.4 觀察指標 比較腦梗死組患者與對照組高血壓、糖尿病發病情況及20-HETE、EETs、DHETs水平，并分析以上指標與腦梗死的相關性。

1.5 統計學處理 應用SSPS 19.0統計軟件；計量資料以表示，兩組比較采用兩獨立樣本t檢驗；多因素分析采用logistic回歸分析；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 腦梗死組患者與對照組高血壓、糖尿病發病情況及20-HETE、EETs、DHETs水平比較 見表1。

由表1可見，腦梗死組患者高血壓、糖尿病發生率均高于對照組（均P＜0.05）；腦梗死組患者20-HETE、DHETs水平均高于對照組（均P＜0.05），而EETs水平低于對照組（P＜0.05）。

2.2 患者高血壓、糖尿病、20-HETE、EETs、DHETs水平與腦梗死的相關性分析 見表2。

表1 腦梗死組患者與對照組高血壓、糖尿病發病情況及20-HETE、EETs、DHETs水平比較

表2 患者高血壓、糖尿病、20-HETE、EETs、DHETs水平與腦梗死的相關性分析

由表2可見，高血壓、糖尿病、高20-HETE、低EETs、高DHETs均是腦梗死發病的獨立危險因素（均P＜0.05）。

3 討論

花生四烯酸CYP的代謝產物為多種生物活性產物，其中對心腦血管疾病影響最大的為EETs和20-HETE。正常生理狀態下，EETs和20-HETE作用互相拮抗，處于平衡狀態。花生四烯酸在CYP代謝途徑下生成5，6-、8，9-、11，12-、14，15-EETs，它們具有舒張血管、抗炎、抗凋亡、抗氧化、促血管生成、抗血小板聚焦、調節腦血流功能，起保護心腦血管的作用[1,3-4]，它們通過可溶性環氧化物水解酶代謝成活性較弱的DHETs，而可溶性的環氧化物水解酶是EETs代謝中的關鍵酶，通過對其活性的調控可改變體內EETs的水平。而花生四烯酸在CYP羥化酶作用下生成20-HETE，20-HETE具有收縮血管、損傷血管內皮、促進炎癥、促進動脈粥樣硬化功能，在腦梗死發病中可能發揮重要作用[5]。研究表明，抑制20-HETE合成可以縮小由于短暫夾閉小鼠大腦中動脈所致腦梗死的范圍[6]。這些研究提示花生四烯酸CYP的代謝產物與腦梗死相關。

本研究發現，腦梗死組患者20-HETE、DHETs水平高于對照組，而EETs水平低于對照組，這與Yi等[7]研究結果一致。然而，Ward等[8]發現，腦梗死組患者20-HETE、EETs、DHETs水平均較對照組升高，可能與研究對象種族不同有關，這值得進一步探討。本研究結果顯示，高20-HETE、低EETs、高DHETs均是腦梗死發病的獨立危險因素。這提示，臨床或可通過減少20-HETE的合成或增加其分解，降低其血漿水平；或增加EETs的合成以及減少其分解，增加其血漿水平，以降低腦梗死的發生風險。

[1]李治菊,朱雨嵐.EETs在神經系統生理功能及疾病中的研究進展[J].中華神經醫學雜志,2015,14(2):198-200.

[2]Saleem S,Shah ZA,Urade Y,et al.Lipocalin-prostaglandin D synthase is a critical beneficial factor in transient and permanent focal cerebralischemia[J].Neuroscience,2009,160(1):248-254.

[3]Yi X,Liao D,Lang W,et al.CYP genetic variants,CYP metabolite levels,and symptomatic carotid stenosis in ischemic stroke patients[J].Journal of Atherosclerosis&Thrombosis,2016,23(5):621-631.

[4]Yi XY,Liao DX,Wang C,et al.Cytochrome P450 Genetic Variants and Their Metabolite Levels Associated with Plaque Stability in Patients with Ischemic Stroke[J].Journal of Atherosclerosis&Thrombosis,2016,23(3):330-338.

[5]Chi LF,Yi XY,Shao MJ,et al.Interaction between ALOX5AP and CYP3A5 gene variants significantly increases the risk for cerebral infarctions in Chinese[J].Neuroreport,2014,25(7):452-457.

[6]Marumo T,Eto K,Wake H,et al.The inhibitor of 20-HETE synthesis,TS-011,improves cerebral microcirculatory autoregulation impaired by middle cerebral artery occlusion in mice[J].British Journal of Pharmacology,2010,161(6):1391.

[7]Yi X,Wu L,Liao D,et al.Interactions among CYP2C8,EPHX2,and CYP4A11 variants and CYP plasma metabolite levels in ischemic stroke[J].J Atheroscler Thromb,2016,23(11):1286-1293.

[8]Ward NC,Croft KD,Blacker D,et al.Cytochrome P450 metabolites of arachidonic acid are elevated in stroke patients compared with healthy controls[J].Clin Sci(Lond),2011,121(11):501-507.