微波萃取-水蒸氣蒸餾純化測定金銀花揮發油成分

夏愛清，王彥娜，邢翠娟，趙 哲，董麗麗,于肖東

(邢臺學院，河北 邢臺 054001)

揮發油為金銀花中的有效成分之一，由于含量低、易揮發，人們對金銀花中揮發油的研究相對較少。因此，對邢臺地區金銀花的揮發油成分進行科學分析具有很重要的意義。在先前的研究中常用揮發油提取器提取法，水蒸氣蒸餾法，索氏提取法，共水蒸餾法，微波提取法，超聲波法提取等單一的提取揮發油法方式[1-3]，其存在著提取成分不完全、峰分離困難以及含有色素及石蠟等沸點高的物質會對色譜柱、MS檢測器造成比較大的污染等缺點[4]。本文兩種方法交叉使用進行實驗，成功的提取、成功地純化了金銀花揮發油組分進而利用GC-MS法對其進行分析檢測，解決了金銀花單一提取方式目前存在的問題。

1 實驗部分

1.1 儀器及試劑

GCMS-QPQP2010ULTRAW氣相色譜條件[5]：進樣口250 ℃；毛細管色譜柱為SH-RXI-5SIL MS；升溫條件:60 ℃以5 ℃/min升溫至150 ℃，以8 ℃/min升至250 ℃；He為保護氣，流速:1 mL/min；壓力:57.4 kPa；不分流進樣；1 μL進樣量。

質譜條件：EI離子源，70 eV電子能；接口250 ℃；離子源200 ℃。

XH100B微波催化合成/萃取儀(北京祥皓科技發展有限公司),試劑均為分析純。

1.2 實驗條件

稱粉碎待用的金銀花粉末20 g于燒瓶中，加入100 g正己烷提取劑，分別進行索式回流2h(索氏提取-水蒸氣蒸餾法);超聲2h(超聲提取-水蒸氣蒸餾法);400 W，60 ℃的微波條件下，萃取40min(微波萃取-水蒸氣蒸餾法)三種方法提取，保留濾液。將濾液進行水蒸氣蒸餾，可以觀察到有油狀餾分餾出，于瓶底發生分層現象。取餾出物于分液漏斗中進行分液，保留上層餾分。密封冷藏，待測[6]。

2 結果與討論

2.1 實驗條件的優化

圖1是微波法提取金銀花揮發油組分圖，揮發油提取器提取法與水蒸氣蒸餾提取法均提取效果不好，未見明顯揮發油成分，這二者未能上機檢測。將待測的剩余幾種單種提取法提取的產品用注射器經濾膜過濾后注入進樣瓶中，系統自動進樣檢測。超聲波提取法(石油醚、無水乙醇)具有一定的可行性。石油醚組由于其沸點太低，出峰具有一定干擾，分析出幾種烷類及酯類；無水乙醇組存在著后期峰分離較差只鑒定出幾種烷類。蒸煮法提取方法提取結果后半部分未見明顯峰值出現效果不理想。直接對金銀花進行提取，多種實驗方法最終所得產品均顯示黃綠色，所以金銀花中的色素及石蠟等沸點高的物質，會對MS檢測器造成比較大的污染，不能直接上機檢測。所以超聲波提取，微波波提取，蒸煮法，索式提取，這幾種方法不可直接利用。需要提純除色素。有過柱、吸附、蒸餾這幾種常用純化方法。過柱溶劑損耗較為嚴重；吸附找不到合適的催化劑；蒸餾采用電熱套溫度高于水蒸氣，導致部分揮發油的熱解。采用水蒸氣蒸餾的方法對提取液進行提純，除去色素對于本實驗的干擾，微波萃取-水蒸氣蒸餾法方法提取得無色透明液體。

圖1 微波萃取法GC-MS圖

圖2 微波萃取-水蒸氣蒸餾法GC-MS圖

微波萃取-水蒸氣蒸餾法能夠將金銀花中揮發油成分提取較完整，峰分開較明顯。比單一方式提取的效果更具有優勢,所得溶液經GC-MS檢測，得出其提取成分相對較好，見圖2。

2.2 揮發油成分分析

多種方法結合而進行的三種方式提取的實驗樣品經上機檢測，其具有多個特征峰且峰分開明顯，可進行定性分析，證明其實驗結果符合要求。用面積歸一法分別從總離子流圖中確定了每種成分的相對含量[7](見表1)。

表1 揮發油成分分析表*

表1(續)

*:a:索氏提取-水蒸氣蒸餾法；b:微波萃取-水蒸氣蒸餾法；C:超聲波提取-水蒸氣蒸餾法。

三種提取方法所提取的物質種類為24、28、26種，占揮發油總量的59.17%、68.25%、71.93%，三種方法提取邢臺地區的金銀花共有成分而且含量最高的是十六酸甲酯(17.39%，11.96%，14.63%)，相對含量>10%；其次是9.12-十八碳二烯酸甲酯(5.02%，5.05%，3.46%)，9,12,15-十八碳三烯酸甲酯(6.05%，4.32%，3.95%)。

3 結論

微波萃取-水蒸氣蒸餾解決了金銀花的揮發油成分測定中MS檢測器污染的問題。邢臺金銀花揮發油的成分為烷烴類(46.3%)，酯類(22.2%)烯烴類(2.2%)，醇類(4.7%)，醛類(4.1%)[8]以及酮類(2.8%)；其它物質占7.4%,為邢臺地區金銀花的開發和利用提供了科學數據。

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