循環腫瘤細胞的研究進展及臨床應用

劉金威　祝英杰　阮友琴

【摘 要】循環腫瘤細胞指進入人體外周血的腫瘤細胞，通常是通過自發或因診療操作而從原發灶或轉移灶釋放進入外周血循環，是導致腫瘤轉移和復發的主要原因。因為外周血中CTC含量極少，需要高敏感性及特異性的檢測方法，這限制了CTC作為“液體活檢”在臨床的實時監測功能及應用，但大量研究顯示，檢測CTC在早期發現微轉移，發現腫瘤復發，制定個體化治療方案，評估預后等方面具有重要的臨床意義，近幾年已逐漸成為臨床研究熱點。本文簡要探討近年來CTC檢測的研究進展及其在臨床的主要應用現狀。

【關鍵詞】循環腫瘤細胞；微轉移；檢測；臨床應用

【中圖分類號】R737.14 【文獻標識碼】A 【文章編號】1672-3783（2018）05-03--02

目前，我們對于惡性腫瘤的治療方案主要是手術，放療，化療以及靶向治療等，而我們對于腫瘤的檢測及發現方式主要是靠影像學方法，血清標志物以及相應的臨床表現，多數腫瘤確診的金標準則是手術之后的病理檢查，但這些方法對于早期發現和預防腫瘤的復發和轉移的作用往往不大，且不能夠及時有效指導我們制定個體化治療方案，我們需要一種更簡便精確的方法，可以在腫瘤形成早期即可檢測到腫瘤的發生，在腫瘤轉移或復發的早期便可發現其微轉移，以利于更積極主動的采取應對方案，進而改善腫瘤患者預后。1896年，澳大利亞學者Ashworth首次在一例因癌癥死亡患者的外周血中發現并提出了循環腫瘤細胞的概念[1]，循環腫瘤細胞是由腫瘤最初的原發灶或后來的轉移灶脫落，繼而進入外周血循環的腫瘤細胞，研究發現，腫瘤患者外周血循環中每106～107個白細胞中才能發現一個CTC。后來人們發現在轉移灶形成前的很長一段時間，這種細胞在血液和骨髓中就已經存在。人們逐漸開始在CTC對腫瘤患者的腫瘤微轉轉的早期發現、療效評估和預后評價等方面做了大量的研究。隨著腫瘤細胞的增殖，一些腫瘤細胞可以通過產生某種抑制粘附因子表達的物質，這種物質可以增加其自身運動能力并可使之從母體腫瘤脫落，這些脫落的腫瘤細胞再產生某種蛋白溶解酶，來破壞宿主周圍結締組織進而侵入血液循環系統。

雖然外周血中的CTC含量極少，若我們有敏感度和特異度均較高的檢測技術，將有可能在腫瘤剛剛形成微轉移時就捕獲到腫瘤發生的信息，這樣就可能早期監測到腫瘤轉移的情況，成為腫瘤的“液態活檢”。由此，我們就可實現對腫瘤向外侵襲的早期發現、對治療效果的準確監測以及對預后的正確評估。

1 CTC常用的檢測方法

由于外周血中的CTC數量極少，若要檢測外周血CTC，首先要進行CTC的富集（分離和純化），即基于密度、體積或免疫磁性等物理化學原理特異性地將這些細胞富集起來，以提高檢測CTC時的敏感性。研究時常用的富集方法包括密度梯度離心法，膜濾過分離法，陽性和陰性免疫磁珠分離法等。富集之后，依靠細胞學方法或核酸檢測技術，利用腫瘤特異性檢測標志物來檢測發現CTC[2]，常用的檢測技術包括免疫細胞化學法，逆轉錄聚合酶鏈反應，流式細胞術，光導纖維陣列掃描技術，酶聯免疫斑點術，鐳射掃描細胞計數器，生物芯片技術等。

2 CTC的檢測在臨床中的應用前景

雖然目前CTC的檢測方法限制了CTC在臨床上的應用，但近年來的大量研究顯示CTC在臨床應用上有巨大的參考價值。目前，CTC在臨床上的應用主要概括如下幾個方面。

2.1 CTC與腫瘤轉移和復發 轉移和復發是腫瘤患者死亡的主要原因，但我們對于腫瘤轉移和復發的發生發展過程知之甚少，目前研究顯示，腫瘤的復發和轉移主要通過淋巴及血液系統播散。即使從外周血中檢測到了CTC并不意味著一定存在或將會形成遠處轉移灶，但可以預測轉移灶形成的概率會大大增加。腫瘤細胞通過脫落、侵襲、滲入等一系列活動進入血液循環或淋巴管，然后種植于遠處器官[3]，并進行增殖，最后形成微轉移灶，可能是腫瘤發生遠處轉移的早期事件，研究結果顯示，外周血中CTC水平與腫瘤遠處轉移具有相關性。因此，可以認為腫瘤的復發與轉移有CTC的參與，CTC可能成為臨床監測早期轉移和復發的指標。

2.2 CTC與個體化治療 個體化治療是指醫生針對每一個不同的腫瘤病人制定出不同的治療方案。目前在臨床上，很少有醫師做嚴格的個體化治療方案，一般是基于患者的一般情況、腫瘤的大小、性質、病理分期、淋巴結或遠處轉移等情況而選擇的綜合治療。近年來對CTC的大量研究顯示，檢測CTC有助于臨床醫師制定個體化治療方案[4]。隨著腫瘤患者化療藥物的使用，腫瘤細胞基因的表達及突變可發生變化，從而導致對藥物敏感性的改變。所以在個體化治療的過程中應該對腫瘤的基因表達及突變進行實時監測，但是臨床的實際情況卻限制了腫瘤細胞的及時獲取。而近年來開發的CTC的檢測及收集技術為解決這一難題提供了可能。

2.3 CTC與腫瘤預后 臨床上常用的診斷轉移的影像學方法以及顯微鏡方法能夠確定存在腫瘤轉移時，事實上已經發生了腫瘤細胞向外周血及骨髓等處的播散，可見這些方法不能很好的顯示患者的存活時間。CTC的檢測及應用使人們第一次可以以一個量化的指標告訴醫生和患者他的存活時間。CTC可以成為判斷肺癌患者預后的獨立預測因子[5-6]，與臨床傳統的影像學檢查相比，可以更早期、更敏感的預測患者的OS，且可檢測的重復性好[7-8]。以上研究顯示惡性腫瘤外周血中CTC的數量是判斷腫瘤患者預后的一個重要的預測因子，將來會對臨床患者治療效果及預后的評估有巨大的研究價值。

結論與展望CTC在臨床具有巨大的潛在價值，盡管目前CTC的檢測方法的敏感性和特異性等有限，限制了CTC在臨床作為“液體活檢”的實時監測功能，但隨著檢測方法越來越成熟，CTC有望成為一種新型非侵入性診斷工具。腫瘤患者在抗腫瘤治療前后，監測外周血中CTC的數量，以判斷腫瘤的轉移復發情況，治療效果，未來可能的預后情況等。這在將來也許是臨床抗腫瘤治療過程中的一項有效評估指標。這個研究領域的不斷發展，有利于腫瘤轉移和復發的早期發現，有利于臨床腫瘤的治療方案的制定，并有助于評估腫瘤患者的治療效果及預后以確定進一步治療手段，進而提高患者生活質量和預期壽命。

參考文獻

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